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相似文献
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1.
根癌农杆菌介导转化谷子的影响因素   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用GUS报告基因,建立了农杆菌介导的谷子(Setaria italica)遗传转化体系,并研究了多种影响因素对转化效率的影响,包括受体基因型、外植体类型、菌液浓度、培养基中乙酰丁香酮的浓度、侵染时间和共培养时间.确定了最优的转化条件为:以谷子幼穗诱导的愈伤组织为外植体,用低浓度的农杆菌菌液侵染30~40min,然后在含有0.1mmol/L乙酰丁香酮的LS培养基上共培养2d.  相似文献   

2.
转基因育种是快速定向改良兰花育种目标性状的有效方法,但迄今未见有关墨兰转基因育种的研究报道。试验以‘企剑白墨’墨兰Cymbidium sinensis cv.‘Qijianbaimo’的根状茎为受体材料,研究了影响农杆菌介导墨兰遗传转化效率的因素,以建立有实用价值的墨兰遗传转化技术体系。结果表明,受体的预培养时间、乙酰丁香酮的添加方式及浓度、农杆菌工程菌液浓度(OD600)、侵染时间和共培养时间均对‘企剑白墨’根状茎的GUS瞬时表达率有显著影响。以预培养39 d的根状茎尖为材料,在添加200μmol/L乙酰丁香酮,OD600为0.9的工程菌液中侵染35 min后,转入添加200μmol/L乙酰丁香酮的共培养基中培养7 d时,‘企剑白墨’根状茎的GUS瞬时表达率最高,为11.67%。采用上述条件对‘企剑白墨’墨兰进行遗传转化,经PCR鉴定和GUS染色检测,从400株再生植株中获得了3株转基因植株,转化率为0.75%。研究表明通过农杆菌介导法对墨兰进行遗传改良是可行的。  相似文献   

3.
影响花椰菜农杆菌介导转化因素的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
以花椰菜赛雪的带柄子叶为外植体,以MS为基本培养基,GUS基因为报告基因,分析了遗传转化过程中的影响因子,如预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度、延迟筛选时间等对外植体瞬间表达和稳定表达的影响。结果显示,以花椰菜的带柄子叶为外植体,预培养2d,农杆菌菌液为OD6000.3~0.4,侵染8min,共培养2d,乙酰丁香酮浓度为100μmol/L,延迟筛选7d,卡那霉素筛选压为5mg/L为最优的遗传转化方案,转化率最高可达35.7%。另外,GUS瞬间表达率和转化率并不存在绝对的相关性,但瞬间表达分析仍然可以作为外源基因进入受体细胞的指示。花椰菜农杆菌介导转化方案的优化研究为芸薹属蔬菜高效遗传转化提供了技术保障,有利于芸薹属蔬菜遗传育种与种质创新研究。  相似文献   

4.
农杆菌介导GUS基因对多年生黑麦草转化的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
张振霞  刘萍  杜雪玲  苏乔  杨中艺   《广西植物》2007,27(1):121-126
通过检测愈伤组织中GUS基因的瞬间表达,研究农杆菌LBA4404/pCAMBIA1301介导多年生黑麦草的转化体系。通过对多年生黑麦草瞬间表达率的比较,确立了其遗传转化的最佳优化条件。研究发现,多年生黑麦草不同品种的转化率在25%~45%之间变化。多年生黑麦草遗传转化最佳优化条件是预培养10d的胚性愈伤组织、浓度为0.5~0.8OD的农杆菌菌液以及2d共培养时间。在共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮能有效地提高植物瞬间表达率。两种侵染处理方法比较结果为滤纸滴加法比浸泡法更优。转化后对愈伤组织的干燥处理能抑制农杆菌过度繁殖,能改善愈伤状态,有利于提高转化率。  相似文献   

5.
不同理化因子对黄芩毛状根诱导的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
张东向  王蕊  张磊 《生物技术》2008,18(1):63-66
目的:利用发根农杆菌1.2556诱导黄芩,得到毛状根.方法:采用共培养法诱导黄芩毛状根,研究不同外植体,不同预培养时间,不同菌液浓度,不同感染时间,乙酰丁香酮,抗生素浓度等条件对转化率的影响.结果:利用预培养2d后的茎段为转化材料,当发根农杆菌浓度在OD600值为0.5时感染10min,转化率最高.在菌液中或培养基中添加100umol/L,乙酰丁香酮可以提高黄芩毛状根的转化效率.培养基中加入250mg/L抗生素Cef能较好地抑制发根农杆菌生长.结论:用共培养法诱导出黄芩毛状根,并确定了最佳诱导条件,以提高黄芩外植体的诱导率.  相似文献   

6.
宁夏枸杞发根农杆菌转化系的建立及影响转化因素的研究   总被引:21,自引:2,他引:19  
胡忠  杨军 《西北植物学报》2000,20(5):766-771
以发根农杆菌A4菌株介导,对宁夏枸杞叶片和茎切段的遗传转化进行了初步研究,建立了发状根体系,并优化了转化条件。乙酰丁香酮的添加、农杆菌液的浓度、共培养时间、外植体取材部位及时间,均可以影响发状根的诱导频率。采用添加100μmol/L的 乙酰丁香酮、振荡培养24h的A4菌液感染3周龄的叶片切段,并共培养3d,可以得到最佳的转化效果,发状根的诱导率为48.9%。在同样的转化条件下,只有13.6%的茎切  相似文献   

7.
《菌物学报》2015,(4):653-661
以刺芹侧耳菌丝球为受体,潮霉素(Hyg)为筛选标记,应用农杆菌介导法对刺芹侧耳菌丝进行了遗传转化研究。潮霉素敏感性测试结果表明,刺芹侧耳Hyg耐受浓度为50mg/L。农杆菌介导的刺芹侧耳菌丝最佳遗传转化体系为:菌液浓度OD600=0.6–0.7,侵染时间30–35min,共培养时间2d,侵染液和共培养培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为1mg/m L;经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定和GUS活性的组织化学分析,表明外源基因GUS已转入到刺芹侧耳菌丝中,并获得表达。本实验成功地建立了稳定的农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系。  相似文献   

8.
影响根癌农杆菌介导甜瓜转化NP-1基因的外部因子研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
张勇  周小云  何江  李冠 《生物技术》2004,14(4):9-11
以新疆伽师、皇后两个甜瓜品种的子叶切块与农杆菌共培养,将NP-1基因导入甜瓜。以再生植株的PCR检测阳性和卡那霉素抗性作为转化植株的初步判定。研究了甜瓜转化的外部因子:甜瓜子叶外植体经3d预培养,重悬于MS液体培养基使菌液浓度达OD600为0.6后进行侵染8~12min,再经3d共培养对转化最为有利;在侵染前进行0.2mg/L甘露醇高渗处理可提高转化率6.6%,乙酰丁香酮在甜瓜的转化中并未有显著影响。转化中卡那霉素合适筛选压力为100mg/L,转化后抑菌氨苄青霉素浓度为500mg/L有利于获取转化植株,转化率可达到12%。  相似文献   

9.
EuFPS基因表达载体构建及对杜仲遗传转化的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
本实验用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切植物表达载体pSH737和含有目的基因的pUC-FPS,定向连接得到重组质粒pSH-FPS,将其导入农杆菌EHA105.采用农杆菌介导法对杜仲进行遗传转化,研究了卡那霉素(kanamycin,Km)浓度、预培养时间、菌液浓度及侵染时间、乙酰丁香酮(acetosyringone,AS)浓度、共培养时间等对杜仲遗传转化效率的影响.结果表明,选择无菌苗苗龄15 d的杜仲下胚轴,卡那霉素浓度50mg/L,农杆菌浓度OD600值0.3-0.6,侵染时间8 min,侵染时菌体重悬液中添加50 μmol/L乙酰丁香酮,共培养时间3 d,抗性芽的获得率最高.对再生植株进行GUS检测发现有45%的植株呈阳性.  相似文献   

10.
农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。  相似文献   

11.
应用石蜡切片法、荧光显微镜和紫外分光光度法,对不同年生巴戟天根组织结构的变化进行了观察、对蒽醌类化合物在根中的分布场所及其积累动态进行了研究。结果表明:巴戟天根的结构类似一般多年生草本植物,薄壁细胞是巴戟天根中蒽醌类化合物的分布储存场所,蒽醌类化合物含量随着根生长年限的增加而增加。由以上研究总结出巴戟天以四年或四年以上采收为好,并以根皮厚、木心细者为上品。  相似文献   

12.
This paper covers major events of the early history of chlorophyll research in the Russian Empire and the Soviet Union from 1771 until 1952, when the modern period of studies on photosynthesis began in full swing. Short biographical sketches of key scientists, reviews of their major research contributions and some selected photographs are included. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.  相似文献   

13.
生长因子(Growth Factors,GFs)对于调节哺乳动物胚胎的早期发育和分化起着重要作用,这些GFs存在于雌性生殖道,也可由胚胎自身合成。正是由于这种自分泌GFs的存在,使我们可以通过改变胚胎培养密度或添加外源性GFs来定性或定量研究GFs对胚胎发育和分化的影响,对于了解GFs在分子水平上的作用途径和机制有着重要的意义。  相似文献   

14.
15.
16.
The effects of adding lysine, arginine and ammonia to gluten on the self-selection of protein and energy by the weanling rat simultaneously offered a choice of two diets differing only in gluten concentration (15 and 55%) were tested. Previous studies have shown that while lysine (6 g/100 g) additions to gluten decreased the amount of gluten selected by the rat from 40 to 20 g per 100 g of food eaten, selection was not related to the nutritional quality of the gluten. When graded levels of arginine (1.8, 3.6 or 7.2 g/100 g) were added to the gluten with or without lysine (0 or 6 g/100 g) the dietary protein selection was unaffected. The addition of ammonia (1.4 g/100 g as NH4Cl) to gluten had initially the same effect as lysine (6 g/100 g) but with time protein intake returned to control levels. This effect of ammonia was unaltered by arginine additions. It is concluded that the mechanisms which lead to decreases in gluten selection caused by lysine or ammonia are not similar, and that the effects of lysine on gluten selection are not caused by an increased arginine requirement for urea cycle activity.  相似文献   

17.
18.
河南玉兰属两新变种   总被引:1,自引:0,他引:1  
发表河南玉兰属两新变种,即:①狭被望春玉兰(Yulania biondii (Pamp.) D. L. Fu var. angustitepala D. L. Fu, T. B. Zhao et D. W. Zhao,var. nov.);②椭圆叶罗田玉兰(Y. pilocarpa (Z. Z. Zhao et Z. W. Xie) D. L. Fu var. ellipticifolia D. L. Fu, T. B. Zhao et J. Zhao,var. nov.)。  相似文献   

19.
20.
ABSTRACT. A unique group of entodiniomorph protozoa was found in forestomach contents from quokka ( Setonix brachyurus ), western grey kangaroo ( Macropus fuliginosus ), red kangaroo ( Macropus rufus ) and euro ( Macropus robustus erubescens ). A new genus, Macropodinium n.g., containing five new species, is described. Three species are described from forestomach contents of the quokka: Macropodinium baldense n. sp., Macropodinium moiri n. sp. and Macropodinium setonixum n. sp. A single species, Macropodinium ennuensis n. sp., is described from the red kangaroo and euro. The last species, Macropodinium yalanbense n. sp., is described in forestomach contents from the western grey kangaroo. At least three distinct features in the new genus are incompatible with any of the described families in the order Entodiniomorphida. On this basis, the new family Macropodiniidae has been created.  相似文献   

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