蟾酥的采集与鉴别

蟾酥的采集与鉴别王加龙（江苏省东海县岗埠职业中学２２２３４４）蟾酥是蟾蜍耳后腺和皮肤腺的白色分泌物,是一种重要的中药材,含有中华蟾蜍毒素、精氨酸、辛二酸等物质。具有强心、利尿、消肿、止痛等,主治痈肿疮毒、咽喉肿痛,是中成药“六神丸”、“消炎解毒片”等...     

东北蟾蜍血清蛋白质成分初步分析

东北蟾酥为两栖纲动物 ,蟾酥耳后腺及皮肤毒腺所分泌的白色汁液加工制成的蟾蜍 ,具有强心利尿、解毒清热的作用 ,是著名的中药。《本草纲目》谓蟾蜍是“攻坚结、祛疗毒、治恶疮之要药”。解放军第四军医大学研制的“蟾蜍抗癌胶囊”经大量动物和药理实验后用于临床 ,对肺、胃、食道、淋巴等多种恶性肿瘤有明显抑制效果。抗癌总有效率达93%。我们对蟾蜍血液中血清蛋白质的成分进行了初步分析。1　材料和方法1 1　材料 :取东北蟾蜍洗净 ,固定四肢及头部 ,然后剪开腹部 ,用 6号针头 ,2ｍｌ注射器 ,进行心脏采血 (每只蟾蜍可抽出 1ｍｌ左右鲜血 …     

蟾酥中甾体物质对钠、钾ATP酶的抑制

蟾酥是蟾蜍腮腺分泌的毒液干燥物,有强心、止痛、解毒、消肿等作用。它的应用在祖国医学上已有悠久的历史,至今许多中药成药如六神丸、痧气丸和梅花点舌丹等都含有蟾酥。毛主席教导我们:“中国医药学是一个伟大的     

两种常见蟾蜍的越冬生态比较

我国目前已知有12种蟾蜍,其中以中华大蟾蜍(Bufo gargarizans)和花背蟾蜍(Bufo racldei)最为常见。这两种蟾蜍数量多、分布广、食性杂、食量大,能消灭大量的农林害虫,其耳后腺分泌物蟾酥可入药,是一     

浙江农林大学动物学科杨仙玉课题组简介

浙江农林大学动物学科杨仙玉课题组目前主要从事纤毛虫发育学和蟾酥多肽类有效成分基因克隆两方面研究:以尾草履虫(Paramecium caudatum)为模式生物,重点研究核发育的详细过程,并借助分子生物学技术手段探讨其调控机制;已开展对蟾蜍皮肤cDNA质粒文库的筛选工作,克隆到多个与癌症的发     

蟾蜍抗肿瘤作用研究进展

本文简述蟾蜍的化学成分,主要针对近１５年蟾蜍的抗肿瘤作用机制、蟾蜍及其制剂的抗肿瘤、癌症镇痛、放射增敏作用进行综述,为含蟾蜍的抗肿瘤新药的开发研究提供依据。     

基于指纹图谱结合多成分定量分析的蟾酥药材质量评价研究CSCD

建立蟾酥药材HPLC指纹图谱和多成分含量测定方法。选用Agilent C_(18)色谱柱(150 mm×3 mm,2.7μm),流动相为0.1%乙酸水(A)-乙腈(B),流速0.5 mL/min,柱温30℃,检测波长296 nm,进样量5μL。40批蟾酥药材指纹图谱相似度0.779~0.991,表明不同批次蟾酥药材的差异性较大;共标定了21个共有峰,指认了伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基以及华蟾酥毒基,质量分数分别为0.019%~0.163%、0.528%~1.608%、0.943%~5.413%、0.204%~0.815%、0.474%~1.825%、1.115%~2.019%、0.030%~0.249%、0.148%~1.661%、1.206%~2.752%、0.345%~3.287%、1.426%~5.875%。聚类分析将40批样品分为3类,主成分分析筛选出了4个主成分,累计方差贡献率为91.122%,说明主成分能够综合蟾酥药材成分的大部分信息,偏最小二乘判别分析标记出药材中12个差异性成分。此方法可以为蟾酥成分的品质控制及其评价工作提供参考。     

蟾酥抗肿瘤有效成分的作用研究

蟾酥(Venenum Bufonis)一词源自《本草衍义》,为我国名贵的传统中药。其含有多种化学成分,具有镇痛、强心、升压、局麻、抗炎和抗肿瘤等药理活性,临床应用广泛。蟾酥中抗肿瘤的有效成分为蟾毒配基类化合物,包括脂蟾毒配基、华蟾毒配基和蟾毒灵等。抗肿瘤活性主要包括诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化等。近年来,有关蟾酥中活性成分在抗肿瘤方面的作用越来越成为国内外学者研究的热点。     

日本蟾蜍聚集素cDNA的克隆与序列分析

为研究蟾酥、蟾衣、蟾皮中多肽类有效成分,通过菌落PCR对日本蟾蜍(Bufo japonicus formosus)皮肤cDNA质粒文库进行了筛选,获得了聚集素(clusterin,CLU)全长cDNA序列(GenBank登录号为JX035891)并对其进行了生物信息学分析。日本蟾蜍clucDNA全长为1 616 bp,包括1 332 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF)、5’端30 bp及3’端254 bp的非翻译区(untranslated region,UTR)。根据cDNA序列推导的日本蟾蜍CLU前体蛋白由443个氨基酸残基组成,其中含20个氨基酸残基组成的信号肽,6个糖基化位点,10个可形成二硫键的半胱氨酸残基和2个卷曲螺旋区域。氨基酸序列同源性分析显示,日本蟾蜍CLU与非洲爪蟾(Xenopus laevis)的同源性为65%,与其他7种动物的同源性则介于41%-48%之间。     

蟾酥的采集与加工

蟾酥,古名月魄、蟾宝,俗称癞团浆,为两栖纲蟾蜍科动物耳后腺及皮肤腺分泌的白色乳浆,经加工干燥而成。蟾酥为我国传统名贵中药材,具有解毒、消肿、止痛、开窍、强心多种功效,主治疗疮、痈疽、发背、瘰疬、小儿疳积、咽喉肿痛、龋齿牙痛、心衰等症。蟾酥是国内外市场上的紧缺商品,医药需求量大,我国每年出口1500公斤左右,每公斤创汇高逾2000美元。捕捉蟾蜍,采浆制酥,投资少,收益快,简便易行,经济效益高,属开发性商品生产,发展前景乐观。现     

亚成体中华蟾蜍端脑形态学与组织学的初步研究

为了探讨亚成体端脑的形态学和组织学特点,充实比较发育神经生物学的研究资料,本文采用脊椎动物神经标本制作技术和常规HE染色法,初步研究了亚成体中华蟾蜍端脑的形态学和组织学结构.结果表明:嗅球位于大脑半球的腹前外侧,细胞从外到内大致可分为7层结构;大脑半球内原始海马较原始梨状区发达;隔区位于原始海马的下方,有外侧隔核和内侧隔核之分;侧脑室的侧壁有内侧界沟区将始海马和隔区分开,也有外侧界沟作为原始梨状区和纹状体的分界;少量脉络丛伸入侧脑室;杏仁核是位于第三脑室两侧的两个细胞核团;纹状体是位于原始梨状区下方和侧脑室底部的细胞团,在两个侧脑室连通时较明显.此外,亚成体端脑内细胞形态和大小分化较为单一.本实验在一定程度上填补了有关无尾两柄类神经系统资料的空白.     

镉、铅对蟾蜍精巢毒作用的酶学研究

为研究镉、铅对精巢的生化毒作用机理 ,应用氯化镉、硝酸铅溶液对成年雄性蟾蜍进行腹腔染毒 (按镉计 0 .1、0 .2、0 .4、0 .8mg/ kg体重 ;按铅计 1、2、4、8mg/ kg体重 ) ,连续染毒 7d后活体解剖 ,测定分析精巢中各种酶的活性。结果显示 ,在镉染毒下 ,精巢乳酸脱氢酶 (L DH)和酸性磷酸酶 (ACP)的活性随镉染毒剂量的增加而降低 ,而碱性磷酸酶 (AL P)未发现明显变化 ;在铅染毒下 ,乳酸脱氢酶 (L DH)和碱性磷酸酶 (AL P)的活性随铅染毒剂量的增加而降低 ,而酸性磷酸酶 (ACP)未发现明显变化 ;乳酸脱氢酶 (L DH)同工酶在镉、铅染毒下则主要表现为酶带 L DH1 、L DH2 的抑制或缺失和 L DH5活性的增强。因此 ,镉、铅对蟾蜍的雄性生殖毒性机理可能与酶的活性存在着一定的关系 ,L DH可以考虑作为反映镉、铅中毒对精巢功能影响程度的一种有价值的生化指标     

中华大蟾蜍卵母细胞质膜存在钙依赖性的氯离子通道

本文采用双微电极电压钳方法研究了中华大蟾蜍卵母细胞内源性电压门控型离子通道的成分及其生理特性。卵母细胞去极化至 -30 mV 及更正电压时,有一持续的电压依赖性外向电流出现。钾离子通道拮抗剂四乙基氯化氨(tetraethy-lammonium chloride, TEA, 10 mmol/L)和 4- 氨基吡啶(4-aminopyridine, 4-AP, 10 mmol/L)协同作用时,该电流只能被抑制到最大电流幅度的(23.4±0.72)%。但是,上述浓度的TEA和4-AP 与氯离子通道拮抗剂5- 硝基-2, 3- 苯酚丙胺苯甲酸盐 (5-nitro-2,3-phenypropylamino benzoate, NPPB, 30 μmol/L)、无钙 Ringer 氏液或钙离子通道拮抗剂维拉帕米(40 μmol/L)协同作用时,可分别将此外向电流抑制到最大电流幅度的(2.1±0.08)%、(2.2±0.04)% 和(3.1±0.15)%。结果表明,中华大蟾蜍卵母细胞质膜上除有钾离子电流之外,还存在钙依赖性的氯离子电流。     

四种除草剂对中华大蟾蜍蝌蚪红细胞微核及核异常的影响

研究了除草剂精克草星、苯磺隆、使它隆和乙草胺单独及联合作用时对中华大蟾蝌蚪红细胞微核及核异常的影响。结果表明,处理２４小时时,单独作用的除草剂均可不同程度地引起微核率及核异常细胞率等遗传指标的上升。而且,在一定的浓度下各指标分别有高峰期,其中微核率与对照组差异极显著（Ｐ〈０．０１）或显著（Ｐ〈０．０５）。微核率与除草剂浓度之间无显著相关,不表现出剂量－效应关系。四种除草剂联合作用的微核率等指标反而     

Population Genetics and Phylogeography of Bufo gargarizans in China

The Chinese toad Bufo gargarizans has an extensive range, covering nearly all of China. This study addresses the population genetic structure of this toad and the relation to geographic location. Partial sequences of the mtDNA control region were obtained from 14 populations, 29 haplotypes were defined, and 73 variable sites were found, including 66 parsimony informative sites. All population genetic analyses indicated no clear geographic pattern in the distribution of haplotypes. The genetic divergence between the populations was significant. Phylogeographic analyses suggested that past fragmentation and/or long-distance colonization seemed to have shaped the present-day distribution of the haplotypes of B. gargarizans.     

除草剂丁草胺对蟾蜍红细胞微核及核异常的影响

本文研究除卓剂丁革胺对蟾蜍红细胞核的诱变效应。采用体内红细胞微核测定法,观察蟾蜍在不同浓度和不同的染毒时间红细胞微核及核异常的变化。结果表明,在一定的范围内,丁草胺可引起蟾蜍微核细胞率和核异常细胞率等遗传指标发乍明显变化,随着丁草胺浓度的增加和作用时间的延长,蟾蜍红细胞微核和核异常率呈现先上升后下降的规律性变化。丁草胺的作用具有双向性。一定利量的除草剂丁草胺对蟾蜍红细胞具有明显的遗传毒性,除草剂对水体的污染不容忽视。     

激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎染色体的影响

应用YAG倍频激光器对中华大蟾蜍四细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育,并对激光照射致畸的胚胎在尾芽期用压片法进行染色体分析。实验结果表明：激光照射后正常的胚胎其染色体无变化,激光照射致畸的胚胎其染色体有丢失和加倍等变化。     

Phylogeny and Biogeography of Common Toad(Bufo bufo) in Xinjiang,China

The common toad, Bufo bufo(Linnaeus, 1758), is widely distributed in Europe and parts of Africa. Previous studies of the genetic relationships among B. bufo populations have not included Asian populations. Here, we investigated the phylogenetic relationships of B. bufo, including a population from Xinjiang, China, using 722 bp of the mitochondrial cytochrome b sequence and identified six subclades and 85 haplotypes in populations from 22 countries. Phylogenetic analyses and pedigree differentiation revealed that the subclade containing the Xinjiang population has undergone a relatively recent expansion. Combining our results with those of previous studies, we found that the common toad population of Xinjiang, China, belongs to the European-Caucasian lineage and that its closest relatives based on phylogenetic relationships were eastern European populations. Our research contributes to expanding knowledge of the geographic distribution of B. bufo and illuminates the lineage and genetic relationships of the B. bu fo population in Xinjiang, China. Future research should continue to update the geographic distribution of B. bufo and complete a genetic investigation of the full range of this species.     

蟾蜍卵母细胞的Na~+/H~+交换

应用pH选择性徽电极和普通檄电极测量了蟾蜍卵母细胞内的pH值(pHi)。当用含NH_4~+而不含HCO_3~-的溶液培灌卵母细胞时,pHi逐渐下降,在停止培灌后,pHi恢复到对照值。这个pHi恢复过程是一个H~+的主动转运,用胆碱离子取代培灌液中的Na~+可以抑制pHi的恢复,这种抑制作用是可逆的。伴随着细胞内pH值的恢复,细胞内Na~+活度(Na_1~+)呈现暂时性增加,而细胞内Cl-活度(Cl_1~+)不变或稍有增加。实验结果提示在蟾蜍卵母细胞膜上存在着Na~+/H~+的交换。     

不同能量激光照射后中华大蟾蜍早期胚胎发育及其蛋白质谱变化的研究

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,统计出膜率、畸胎率和死亡率。实验结果表明：低能量激光照射明显地提高了胚胎的孵化速度,且使畸变率降低;而高能量激光对胚胎发育有明显抑制作用,而且使畸变率增高。不同能量密度激光微束照射中华大蟾蜍早囊胚,0．5h后制备样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析。结果显示激光照射对蛋白质点数及其分布有影响,影响程度与照射激光密度有关。结论：激光照射可以影响胚胎发育和蛋白质的合成。