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相似文献
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1.
聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶合成头孢氨苄的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
将巨大芽孢杆菌胞外青霉素酰化酶通过共价键结合到聚丙烯腈纤维的衍生物上。制成的丝状固定化青霉素酰化酶表现活力达 1 5 3U g(湿重 )。固定化酶合成头孢氨苄的最适pH为 6 5 ,最适温度为 40℃。 7 ADCA的投料浓度以 4%为好 ,7 ADCA与PGME的投料量比率为1∶2 ,最佳用酶量为 1 70U g 7 ADCA。在pH6 5、温度 3 0℃时 ,固定化酶对 7 ADCA的表观米氏常数K7 ADCA为 0 1 6 2mol L ,对PGME的表观米氏常数KPGME为 0 3 6 4mol L ,最大反应速度Vmax为0 0 4 6 2mol·L- 1·min- 1,用固定化酶合成头孢氨苄 ,使用 5 0次保留酶活力 83 9%  相似文献   

2.
酶法合成头孢环己二烯   总被引:3,自引:0,他引:3  
以环己二烯甘氨酸甲酯盐酸盐为酰基供体,7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸为酰基受体,γ-氧化铝为载体的固定化巨大芽孢杆菌胞外青霉素G酰化酶为酰化剂,合成了头孢环己二烯。5%酰基供体,2%酰基受体,每毫升反应物加44IU固定化酶,pH7.5,25℃振荡反应5h,头孢环己二烯产率为81%。苯乙酸、苯氧乙酸和头孢霉素G对酶法合成有不同程度的抑制作用。  相似文献   

3.
1.三角酵母冻融细胞用海藻酸钙包埋后,可获得D一氨基酸氧化酶活力较高的固定化细胞。固定化细胞的最适Ph与冻融细胞相同,均为Ph8.3I最适温度为40℃,而冻融细胞.为33℃,和冻融细胞相比,固定化细胞对温度和Ph的稳定性提高,表观米氏常数增大。 2.固定化细胞以头孢菌素c为底物时,得到的产物经高压液相色谱鉴定为GL一7AcA。 3.固定化细胞装柱,Ph8.3,室温时,GL一7AcA的转化率在通气条件下可达92%,产生GL一7AcA的能力为9.2mg/g固定化细胞·小时。  相似文献   

4.
壳聚糖固定化德氏根霉脂肪酶的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
研究了壳聚糖吸附和戊二醛交联对脂肪酶固定化条件,在室温条件下将0.4g酶粉溶于pH6.0缓冲液中,加入10g壳聚糖,摇匀,再加入浓度为0.6%戊二醛交联6h,得到固定化酶,酶活力回收率约为54.2%。固定化酶的半失活温度比游离酶的高,半失活温度由游离酶的47℃提高到100℃,最适反应温度由40℃上升至80℃,最适pH由6下降到5.5,固定化酶K’m值由游离酶的Km 50mg/mL增加到56mg/mL。该固定化脂肪酶用于酯的合成;在80℃条件下经过10批次连续水解植物油反应,固定化酶的活力仍保持在82.6%以上。  相似文献   

5.
酶法合成羟头孢霉素   总被引:1,自引:1,他引:0  
本文报道具有青霉素酰化酶的大肠杆菌(E. coli PN-66)细胞酶促合成羟头孢霉素的研究结果。酶反应的最适温度为20℃,最适pH为6.0。羟头孢霉素的合成率随着母核7一氨基脱乙酰氧基头孢烷酸的浓度的增加而提高,随侧链对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐在与7一氨基脱乙酰氧基头孢烷酸的配比中的增加而提高。苯乙酸和苯氧乙酸对羟头孢霉素的合成有着强烈的抑制作用。在合适的条件下,羟头孢霉素的合成率可达90%以上。  相似文献   

6.
β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化而生成。酰化有化学法和酶法两种。采用青霉素G酰化酶或a—氨基酸酯酶或,a—氨酰转移酶的酶法,具有工艺操作简单、无需基团保护、环境污染轻等优点。继日本人于70年代初试验成功酶法之后,80年代初我们开展了这方面研究。制备方面,胞外酶优于胞内酶;使用方面,固定化酶优于固定化细胞。在用具有青霉素G酰化酶活性的固定化大肠杆菌(Escherichia coli)细胞合成头孢氨苄的基础上,又研究了用固定化巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP931胞外青霉素G酰化酶酰化合成头孢氨苄的条件。本文报道这一研究结果。  相似文献   

7.
高产天冬氨酸酶的大肠杆菌细胞的固定化   总被引:6,自引:1,他引:5  
用聚乙烯醇凝胶包埋具有高活力天冬氨酸酶的大肠杆菌(Escherichia coli)No.1细胞。该酶的表现活力高达1638 00u/g湿细胞,酶活力的回收率为97.5%。固定化细胞和游离细胞天冬氨酸酶的最适pH均为8.0,最适温度分别为40—45℃和40—55℃。二价金属离子Mn2+、Mg2+、Ca2+和Fe2+对热钝化的天冬氨酸酶活力具有保护作用。在37—45℃下,两种细胞的热稳定性相同。二者在pH6.0的柠檬酸缓冲液中比较稳定。固定化细胞在1mol/L、pH8.0的底物溶液(内含Mn2+1mmol/L)中于4℃冰箱保存6个月,天冬氨酸酶的活力保持不变。用固定化细胞柱连续生产L-天冬氨酸,底物转化为产物的转化率达95%以上;产物的总 收率为91.1%。固定化细胞柱连续运转40天,天冬氨酸酶活力仍保持最初酶活力的90%。  相似文献   

8.
选择6种吸附树脂和离子交换树脂对D-泛解酸内酯水解酶进行固定化,筛选出了固定化效果较好的大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂D-380为载体,用先吸附后交联的方法固定化。通过实验对固定化条件进行了优化,得出最佳的固定化条件为:加酶量6U/g树脂、吸附pH7.5、吸附时间4h、吸附温度30℃、交联剂戊二醛终浓度0.1%、交联时间2h。实验表明在此条件下制得的固定化酶有很好的稳定性:固定化酶在连续20次的底物水解反应后,剩余酶活达到71%。当温度达到80℃时游离酶几乎失去酶活,而固定化酶剩余酶活为60%以上。游离酶的pH稳定性范围为pH7~8,而固定化酶为pH6.5~8.5。  相似文献   

9.
谷胱甘肽硫转移酶(GST)的固定化及酶学特性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
蔡俊  邱雁临 《生物技术》2003,13(5):11-12
对谷胱甘肽硫转移酶的固定化、游离酶和固定化酶的酶学特性进行了研究,通过试验,确定谷胱甘肽硫转移酶的最佳固定化条件为先用2%壳聚糖吸附酶,然后再加戊二醛交联,交联用戊二醛浓度为1.2%,交联时间6h;游离酶的最适温度为45—55℃,最适pH值为6.5-7.0:固定化酶的最适温度为45-50℃,最适pH值为7.0;游离酶和固定化酶的最适酶促反应时间为30min。  相似文献   

10.
固定化诺卡氏菌细胞生产L(+)酒石酸的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
用明胶包埋酒石酸诺卡氏菌(Nocardia tartaricans SWl3—57)得到顺式环氧琥珀酸开环水解酶活力较高的固定化细胞。固定化细胞的最适温度为30~45℃,而游离细胞的最适温度为35~45℃。两者的最适pH均为8.0~9.0,固定化细胞的表观米氏常数Km为0.256mol/L,而游离细胞有底物抑制作用,在底物浓度小于0.45mol/L时Km为0.246mol/L。用固定化细胞装柱(y=100ml),pH8.S,温度37℃,稀释速率D=0.25h-1,以0.5mol/L浓度顺式环氧琥珀酸钠溶液为底物,连续运转53d,平均产L(+)酒石酸66.95g/L,克分子转化率为92.09%,反应器生产能力达到16.58g/L·h。  相似文献   

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