混合感染后杆状病毒间的增效作用——病毒蛋白及核酸的初步分析

AsNPV+HasNPV、AsNPV+HaNPV、AsNPV+PsNPV分别感染烟青虫、棉铃虫和粘虫幼虫,对分离到的核型多角体病毒(AsNPV+HasNPV)-Helicoverpa assulta、(AsNPV+HaNPV)- H.Armigera和(AsNPV+PsNPV)-Pseudaletia separata,经电镜观察,多角体蛋白及病毒粒子蛋白SDS-PAGE电泳,病毒核酸的限制性内切酶酶解分析等研究,证明各病毒的多角体形态不规则,大小差异极大,病毒粒子为杆状,(AsNPV+HasNPV)-H.Assulta 和(AsNPV+HaNPV)-H.Armigcra病毒粒子有单粒和多粒包埋类型, (AsNPV+PsNPV)-P.Separata为多粒包埋型。各病毒的多角体蛋白基本上只有一种多肽,分子量为25 000道尔顿左右。(AsNPV+HasNPV)-H.Assulta、(AsNPV+HaNPV)-H.armigera和(AsNPV+PsNPV)-P.Separata的病毒粒子分别有10、14、5条多肽,分子量大小在13 500～98 000,13 000～88 000,18 500～52 000道尔顿之间。病毒核酸经EcoRI,HindIII,HindIII+BamHI酶解,其DNA的酶切位点,大小及DNA的总分子量与AsNPV和原寄主的Has-NPV,HaNPV和PsNPVDNA的酶切图谱存在一定差异,混合病毒侵染昆虫后新复制的病毒核酸发生一定的变化,从而导致病毒蛋白和病毒形态的变化。混合感染后AsNPV对Has-NPV、HaNPV和PsNPV的侵染有明显的增效作用,其机理有待深入研究。     

棉铃虫核多角体病毒DNA的限制性内切酶酶解图谱和电镜观察

棉铃虫核多角体病毒(NPV)加入0.01 Mna₂CO₃—0.05 MNaCl溶解后,用水饱和苯酚-SDS提取NPV DNA。电镜观察证明NPV DNA为非均一性环状结构分子。测量了28个分子的长度,其中15个分子长度为27±5μm,相当分子量为(73±13)×10⁶道尔顿,其余的是较大和较小的分子。限制性内切酶XbaⅠ,XhoⅠ BamHⅠ,EcoRⅠ,BgⅠ Ⅱ分别把NPV DNA酶解为20,9,10,18和11个限制性片段。由片段总和法计算得平均分子量是73.3×10⁶道尔顿。     

烟青虫质型多角体病毒的形态及某些理化特性

本文对烟青虫(Heliothis assulta)质型多角体病毒(CPV)的形态大小以及某些理化特性进行了研究。烟青虫CPV多角体为正五角形的十二面体,大小为0.8-4.6μm;CPV 粒子为外形呈六角形或球形的廿面体,大小为62nm。CPV多角体蛋白的主要多肽为一种,分子量23000,为非糖蛋白。 用SDS-酚法提取的CPV基因,经Rnase I和Dnase I处理后在1%琼脂糖凝胶上电泳,结果表明 其基因是双链RNA,并由10个基因片段组成。各片段大小为0.3-2.68X10⁶,总分子量为15.85x10⁶。本文所报道的烟青虫质型多角体病毒在国内外尚属首次。     

红胫戟纹蝗痘病毒形态及理化性质研究

红胫戟纹蝗Dociostaurus kraussi是新疆草原优势种蝗虫。1989年首次从新疆玛纳斯红胫戟纹蝗上分离到痘病毒Dociostaurus kraussi ntomopoxvirus(DkEPV),1992年又在新疆巴里坤发现, 自然流行率达23.3%。显微镜观察表明该病毒主要感染脂肪体。病毒球状体为圆球状,直径为2—7μm,大小差异悬殊,病毒粒子砖形或椭圆形,表面呈桑椹结构, 大小平均为144nlnx269nn。病毒DNA具有典型的核酸紫外吸收光谱。根据热变性曲线测得DkEPV—DNA的T_m,值为79.0,(G+C)%为23.7%。病毒DNA经限制性内切酶EcoRI、Bgl IIH和Hind III酶切后,分别得到29、21和18个片段。以λDNA Hind III酶切片段为标准分子量,计算出各酶切片段的分子量为155.45x10⁶、155.69x10⁶和155.40x10⁶D, 由此得出DkEPV—DNA总分子量为55.5x10⁶D。     

达乌尔鼠兔和高原鼠兔肝脏线粒体DNA的限制性内切酶图谱的比较研究

达乌尔鼠兔肝细胞线粒体DNA(mtDNA),经限制性内切酶HindⅡ、HindⅢ、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后分别产生 5、4、3、2个片段。通过琼脂糖凝胶电泳对这些片段进行测定,并画出其酶切图谱。高原鼠兔肝细胞mtDNA经限制性内切酶EcoRⅠ和 BamHⅠ酶切后,分别产生4、2个片段,对其片段的分子量也进行了测定。测定结果,达乌尔鼠兔肝细胞mtDNA的分子量为10.25MD(兆道尔顿),大小为16.25kbp(千碱基对);高原鼠兔肝细胞mtDNA的分子量为9.31MD,大小为15.066kbp。并对两种鼠兔的限制性内切酶片段进行了比较讨论。     

鳗鲡线粒体DNA的研究

本文采用差速离心法及RNase消化法制备并纯化了级鲡(Anguilla Japonica Temmink et Schlegel)肝脏线粒体DNA(mtDNA),用8种限制性内切酶对mtDNA进行了分析．BgП、Xhoh、Psth、EcoRL、BamHI、HindШ、Bgli、Xbal在鳗鲡mtDNA分子上分别具0, 1, 3, 5, 2, 7, 2, 4个切点．mtDNA分子量约10.16x10⁶道尔顿,大小为16.44kb.根据鳗鲡肝mtDNA的单酶及双酶完全酶解片段的大小,建立了鳗鲡mtDNA的限制性酶切图谱．     

丁酰苷菌素产生菌Bacillus circulans3342质粒pBCl的分离及其性质

在氨基寡糖类抗生素丁酰苷菌素的产生菌Bacillus circulans 3342中发现了一种质粒DNApBC1,其分子量为9.0×10~6道尔顿。 用限制性内切酶BglⅠ、SmaⅠ和Hind Ⅲ酶切这种质粒DNA,构成了pBC1的限制性内切酶图谱。selⅠ、SmaⅠ和Hind Ⅲ分别将这种质粒DNA切为2、2和5条片段,EcoRI则切为4条片段,而SalⅠ、Bam HI和Pv(?) Ⅱ不能切这种质粒DNA。     

薄荷伪造桥虫多角体病毒及其核酸的限制性内切酶酶解分析

本文描述了从薄荷伪造桥虫(Argrogramma agnata stgr.)幼虫分离到的一种核型多角体病毒的形态以及采用简便的方法提取的核酸,经限制性内切酶 EcoRI,BamHI,HindⅢ,BglⅠ,BglⅡ和BglⅠ+BglⅡ,BamHl+EcoRl 酶解,获得该病毒核酸的酶解带谱。以入 DNA 的 EcoRl 酶解片段在凝胶中的迁移率与相应 DNA 片段分子量的对数值作标准曲线。从曲线上求得薄荷伪造桥虫多角体病毒核酸酶解各片段的分子量.此病毒核酸的平均分子量为108.51×10~6道尔顿。     

武昌鱼肝线粒体DNA限制性内切酶酶解图谱与12SrRNA基因的初步定位

武昌鱼肝线粒体(mt)DNA经六种限制性内切酶BamHI,BgⅢ,BgⅡ,EcoRI,HindⅡHpall单酶完全酶解分別得到2,2,3,3,3和7个片段。用琼脂糖凝胶电泳测得各个酶解片段的长度和分子量,经计算该mtDNA长约16.6kb,分子量10.2×10~6道尔顿(dalton)。用七对限制酶双酶全酶解,构建出五种限制性内切酶图谱。以酵母线粒体15SrRNA基因为探针对武昌鱼肝mtDNA中的12SrRNA基因进行初步定位。     

脂肪嗜热芽孢杆菌质粒pFD101的限制性内切酶图谱

从脂肪嗜热芽孢杆菌T525中抽提得到的隐蔽性质粒pFD101,经纯化后通过琼脂糖凝胶电泳和电镜观察,确证为cccDNA。经测定,pFD101的分子量为3.83×10~6道尔顿。具有限制酶HindⅢ切点1个、SalⅠ和HpaⅡ切点各2个,没有EcoRI、BamHI和PstⅠ切点。根据限制酶片段的分子量作出了pFD101的简单酶切图。