丙二醛破坏大鼠海马神经元胞质钙离子稳态的信号机制

目的研究丙二醛（MDA）对原代培养的海马神经元胞质中钙离子稳态的破坏作用及可能的信号机制。方法以Fur2／AM为荧光指示剂,采用荧光分光光度法定量测定原代培养海马神经元胞质游离钙浓度变化。结果随着MDA浓度的升高和作用时间的延长,导致胞质中游离钙水平显著升高,破坏其钙稳态。MDA所导致的海马神经元胞质游离钙水平升高包括两个过程：100μmol／L的MDA可使胞质[Ca2＋]i水平在0—10min内的早期渐进升高过程,经历中间大约5min的平台期后,接下来15—30min的晚期显著升高。以细胞膜电压依赖的Ca2＋通道抑制剂nimodipine抑制外钙内流后,可显著抑制晚期胞质[Ca2＋]i水平的升高,以PLC的抑制剂U73122作用后,则可抑制早期胞质[Ca2＋]i水平的升高。结论100μmol／L的MDA作用下,海马神经元胞质中早期钙离子水平的升高和晚期钙离子水平的升高可能分别由不同的信号机制所介导。     

小麦条锈菌胞质游离钙离子动态检测方法的建立

胞质游离钙离子变化与植物病原真菌侵染寄主的动态过程具有重要的关联性。本研究以侵染小麦叶片的条锈菌31号生理小种(CYR31)为材料,以孵育法将Ca2+荧光探针Fluo-3-AM载入到小麦条锈菌细胞中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,建立了测定侵染过程中条锈菌胞质游离Ca2+分布的试验方法。结果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM装载顺次进行低温4℃孵育1h,25℃孵育1h,可获得较为理想的条锈菌胞质游离Ca2+染色结果。该方法可用于检测不同侵染阶段的小麦条锈菌细胞质游离钙离子的分布变化,为进一步研究锈菌胞内钙离子动态与侵染寄主的关联性提供了技术支撑。     

电磁场暴露海马神经元自由基和胞内Ca2+的变化

电磁场对健康影响的研究包括流行病调查、人体与动物、细胞、生化与分子生物、生物物理等5个层次,电磁生物效应最初是通过物理作用产生化学反应,继而产生后续生物反应.自由基、电磁能量和生物钙是分属于化学、物理学和生物学的3个概念,研究它们之间的关系对于认识电磁生物效应的原初作用具有意义.选择海马神经元,观察在0.1mT、0.5mT和1.0mT电磁场暴露48h,海马神经元ROS水平和胞内Ca2+浓度的变化.实验结果表明:暴露于0.1mT,0.5mT和1.0mT电磁场海马神经元的ROS水平和Ca2+浓度都比对照组有显著性提高(P<0.01).暴露于0.1mT和0.5mT电磁场的ROS水平和暴露于0.1mT电磁场的Ca2+浓度与自由基清除剂+电磁场(Trolox+EMF)组比较没有差异(P>0.05),暴露于1.0mT电磁场的ROS水平和暴露于0.5mT和1.0mT电磁场的Ca2+浓度比Trolox+EMF组有显著性提高(P<0.01).表明电磁场可以促进细胞自由基的产生,并且ROS水平与胞内Ca2+浓度有正相关性.     

谷氨酸促进大鼠海马神经元的内钙升高

谷氨酸能影响大鼠海马神经元胞内钙信号的变化,进而影响海马神经元神经冲动的发放和学习记忆过程。运用荧光测钙技术实时监测了大鼠海马神经元内钙信号的动态变化,同时分析了谷氨酸对其胞内钙信号的影响。试验表明：谷氨酸能够显著提高胞内游离钙离子的浓度;细胞外钙离子的存在、谷氨酸刺激时间及刺激频率的增加都能引起胞内钙信号不同程度的升高;但谷氨酸的过度刺激会引起钙离子浓度的超负荷,从而导致神经元结构和功能的损坏。     

高温胁迫对花生幼苗光合速率、叶绿素含量、叶绿体Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase及Ca2+分布的影响

将水培后盆栽的花生幼苗,置于培养箱42℃高温培养,定时测定幼苗叶光合速率、叶绿素含量和叶绿体Ca2 -ATPase、Mg2 -ATPase的相对活性,并观察幼叶细胞内Ca2 分布的变化。试验结果表明:高温胁迫过程中,光合速率及叶绿素含量都随处理时间的延伸而下降,并呈显著正相关;叶绿体Ca2 -ATPase和Mg2 -ATPase高温胁迫过程中相对活性呈先升后降趋势,Ca2 -ATPase热敏性高于Mg2 -ATPase;高温胁迫过程中,Ca2 具有从胞外转运到胞质内和叶绿体中的趋势,Ca2 能够稳定高温胁迫下叶肉细胞膜和叶绿体的超微结构。     

GW0742对全脑缺血再灌注大鼠脑损伤的作用观察

目的 初步观察PPARβ激动剂对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的影响.方法 采用双侧颈总动脉夹闭合并低血压的方法建立大鼠全脑缺血/再灌注模型.GW0742(22μg、67μg和200 μg)于建模前30 min脑室注射给予,Morris水迷宫测定大鼠空间学习记忆能力,HE染色观察海马神经元形态变化,生化法检测大鼠海马SOD活性和MDA含量变化.结果 全脑缺血/再灌注大鼠空间学习记忆能力明显下降、海马神经元核固缩,海马SOD活性降低、MDA含量增加;GW0742给予能明显改善全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆能力的损害和海马神经元损伤,并能明显阻遏全脑缺血再灌注大鼠海马的SOD活性降低、MDA含量增加.结论 PPARβ激动剂对全脑缺血/再灌注大鼠脑损伤有明显保护作用,其神经保护作用机制可能与通过PPARβ激动从而抑制氧化应激反应有关.     

豌豆根胞质V1-ATPase的鉴定

利用免疫印迹、免疫电镜和ATP水解活性的测定对豌豆(Pisum sativum L.)根细胞胞质中V1-ATPase复合物的存在进行鉴定.用兔抗绿豆V-type H+-ATPase 的A、B亚基的抗体进行的immuno-blotting和胶体金电镜结果都表明,胞质中存在有A、B亚基.活性测定结果进一步表明胞质具有ATP水解活性.这些结果说明豌豆根胞质具有有活性的V1-ATPase复合物.这是首次直接证明植物中有胞质V1-ATPase的存在.     

钙-钙调素在零下低温诱导毛白杨扦插苗抗冻性中的作用

以零下低温锻炼和结合效应剂(CaCl2、钙离子螯合剂EGTA、钙离子通道阻断剂LaCl3或钙调素拮抗剂CPZ)处理的低温锻炼下的毛白杨(Populus tomentosa)扦插苗为试材,对其体内丙.醛(M D A)及钙调素(CaM)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及线粒体腺苷三磷酸酶(Ca2 -ATPase)活性,以及幼苗的半致死温度(LT50)分别进行测定.结果表明,低温锻炼不仅在一定程度上提高了幼苗 CaM含量,SOD、POD和线粒体Ca2 -ATPase活性,降低了MDA含量和幼苗半致死温度;而且减小了低温胁迫所引起的SOD、POD、线粒体Ca2 -ATPase活性和CaM含量的下降程度以及MDA的增加幅度,促进了胁迫后恢复过程中SOD、POD、线粒体Ca2 -ATPase活性和CaM水平的迅速回升以及MDA的下降.在低温锻炼的同时,用CaCl2处理能加强低温锻炼的效果,但这种效应可被EGTA、LaCl3或CPZ处理抑制.经或未经CaCl2处理的低温锻炼后,幼苗中CaM含量的增加有助于SOD、POD和线粒体Ca2 -ATPase活性的提高,进而对幼苗抗冻性的提高有明显的促进作用.看来,Ca2 -CaM信号系统可能参与了SOD、POD和线粒体Ca2 -ATPase活性的调节和抗冻性的低温诱导.     

抑郁症大鼠海马神经元凋亡率和自噬相关蛋白的改变

目的 观察抑郁症模型大鼠海马神经元形态结构改变及凋亡、自噬的变化,探讨抑郁症海马体积异常的机制.方法 选用雄性成年SD大鼠,随机分为正常对照组和模型组,通过给予不可预见慢性温和应激建立抑郁症模型;采用尼氏染色、透射电镜技术观察海马神经元形态变化,流式细胞术检测海马神经元凋亡,采用透射电镜观察海马神经元自噬体,Western blott检测自噬相关蛋白LC-3和Beclin 1.结果 与对照组比较,模型组海马神经元体积萎缩,数量减少,细胞凋亡率增高（P〈0.05）.模型组海马神经元胞质内可见自噬体;与对照组相比,模型组LC-3Ⅱ蛋白和LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ比值增高,Beclin-1相对表达增高（P〈0.05）.结论 抑郁症大鼠海马神经元存在体积萎缩现象,可能与神经元凋亡和自噬增强有关.     

视黄酸对海马神经元细胞内钙离子浓度的影响

探讨全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,atRA)对原代培养的海马神经元胞内钙离子浓度的影响,以进一步了解atRA参与学习记忆可能机制。分离新生Wistar大鼠海马,采用添加B27的无血清培养液进行海马神经元原代培养,免疫荧光鉴定培养的神经细胞;以fura-2/AM温育海马神经元,采用钙离子测定系统动态观察视黄酸对海马细胞内钙离子浓度的影响。结果显示:(1)培养的神经元纯度达90%;(2)atRA作用于海马神经元,能引起海马神经元胞内钙离子浓度的升高;(3)这种升高与atRA浓度及神经元的发育时间相关;(4)钙离子升高的具体方式是通过细胞外钙离子内流;(5)视黄酸核受体alpha(RARα)的拮抗剂Ro41-5253(Ro)对atRA升高的神经元胞内钙离子浓度有抑制作用。atRA与RARα结合,促使海马神经元胞外钙离子的内流,这可能是atRA参与学习记忆的机制之一。     

花粉形态计算机量化分析研究

以白莲花粉为实验材料,介绍了进行花粉形态计算机量化分析的步骤。花粉经醋酸法处理后,用电子显微镜对花粉进行观察照相,尔后用计算机技术对花粉电镜照片进行处理,最后用C语言编制了计算花粉形态面积的计算机程序。结果表明：花粉计算机量化分析有助于快速定量测定有关花粉形态指标,是花粉数量分类的一种有效方法。     

花粉形态计算机量化分析研究

以白莲花粉为实验材料 ,介绍了进行花粉形态计算机量化分析的步骤。花粉经醋酸法处理后 ,用电子显微镜对花粉进行观察照相 ,尔后用计算机技术对花粉电镜照片进行处理 ,最后用C语言编制了计算花粉形态面积的计算机程序。结果表明 :花粉计算机量化分析有助于快速定量测定有关花粉形态指标 ,是花粉数量分类的一种有效方法。     

芒果品种的花粉形态

用扫描电镜和光学显微镜对芒果（ＭａｎｇｉｆｅｒａｉｎｄｉｃａＬ．）１０个栽培品种的花粉形状、大小、外壁纹饰作了比较研究,结果表明：不同品种花粉粒形状、外壁纹饰等性状存在不同程度的差异,可作为区分某些品种的参考。三年芒、元江象牙、虎豹牙、红象牙、马切苏、椰香芒、大青皮、黄皮大头芒花粉外壁纹饰较为相似,可能反映出较为紧密的亲缘关系。三克里芒纹饰与以上８个品种区别较大,红光６号脊宽等性状介于二者之间     

SKF-96365对SD大鼠急性分离下丘脑神经元温度敏感性的影响

采用电流钳技术观察SD大鼠急性分离下丘脑神经元的自发性放电及其温度敏感特性,显微镜下,急性分离神经元表现为两种形态,一种具有突起,另一种表现为无突起的形态,记录到的有突起的78例神经元中,可以记录到4例热敏神经元（wsn）,但在无突起的61例神经元没有观察到热敏神经元的存在．在浴槽液体中加入SKF96365,这些热敏神经元就会失去温度敏感性．以上结果表明pWSN可能通过突起部位上分布的TRPV4而起到对周围环境温度的感受作用．     

Observations on the Ultrastructure of the Root Nodules and Its Endophyte of Elaeagnus mollis Diels

The ultrastructure of the root nodule infecting cell of Elaeagnus mollis Diels and its shapes of the endophyte were observed by light microscope, scanning electron microscope and transmission electron microscope. The endophyte in the root nodules of Elaeagnus mollis D. has five different developing forms: hyphae, nitrogen fixing vesicles, sporangia, sporangio-spores and bacteroid-like cells. The roles played by the different forms of the endophytes in symbiotic nitrogen fixation arc discussed also.     

丙二醛对大鼠空间学习、记忆能力及海马CA1区超微结构的影响

研究了氧化应激毒性中间产物丙二醛(MDA)对SD大鼠空间学习、记忆的影响。用Morris水迷宫方法研究发现,经侧脑室注射丙二醛的大鼠在定位航行试验中寻找水下平台的逃避潜伏期极显著地延长,同时在空间探索试验中120s内穿台次数减少,说明较高浓度的丙二醛能导致大鼠的空间学习、记忆能力降低。电镜观察研究发现,处理组大鼠海马CA1区神经元细胞内线粒体变形、嵴消失,说明不同浓度的丙二醛在非氧自由基条件下也能直接对大鼠海马CA1区神经元造成一定程度的损伤。     

高寒区10种青藓科植物茎结构的生态适应性

该研究对新疆天山一号冰川地区的10种青藓科植物茎的解剖结构进行了光镜和扫描电镜观察。结果表明:它们的茎横切面形状不同,表皮细胞均为1层,内、外皮部分化明显,细胞壁由外向内逐渐变薄,中轴分化明显,所占茎面积的比例、细胞厚度以及大小都不尽相同,大多数种类的细胞壁具有角隅加厚的现象。当茎干时,细胞壁表面的凹陷程度不同,其上具有不同形状的纹饰及附属物,大多数种类的表面有深浅和大小不一的小窝点分布。这些特征在不同属及不同种之间均有差异,反应出对环境的适应性,可作为青藓科植物潜在的分类依据。     

翅果油树根瘤超微结构及其内生菌的观察

作者用光学显微镜,透射电镜和扫描电镜对翅果油树(Eldaeagnus mollis D.)根瘤侵染细胞的超微结构及其内生菌的形态进行了观察研究。翅果油树根瘤中的内生菌具有五种不同的发育形态:菌丝、固氮泡囊、孢囊、孢囊孢子和拟类菌体。内生菌的这些不同形态以及它们在共生固氮中的作用,本文也作了讨论。     

Control of actin moving trajectory by patterned poly(methylmethacrylate) tracks.

Poly(methylmethacrylate) (PMMA), a photoresist polymer, was found to be useful for immobilizing heavy meromyosin (HMM) molecules while retaining their abilities to support the movement of actin filaments. PMMA substrate was spin-coated on a coverslip, and various shapes of PMMA tracks, such as straight lines, concentric circles, and alphabetical letters, were fabricated by UV photolithography. An observation by a Tapping mode atomic force microscope (AFM) shows that the typical circular tracks were 1-2 microns wide and about 200 nm high. In in vitro motility assay, a solution of HMM molecules was applied to immobilize the molecules on the tracks by adsorption, and movement of actin filaments labeled with tetramethylrhodamine-phalloidin were observed in the presence of ATP by using an epifluorescence microscope and an image-intensified CCD camera. Actin filaments were seen to move precisely only on the PMMA tracks, and their traces drew the exact shapes of the tracks. The mean velocity of actin movement on the PMMA was 4.5 mm/s at 25 degrees C, and it was comparable to that on a conventionally used nitrocellulose film.     

Leukotriene D4 receptor antagonist montelukast alleviates water avoidance stress-induced degeneration of the gastrointestinal mucosa

We investigated the role of montelukast (ML), a cysteinyl leukotriene-1 receptor antagonist, on the water avoidance stress (WAS)-induced degeneration of the rat gastric, ileal and colonic mucosa. One group of Wistar albino rats were exposed to chronic WAS (WAS group) 2h daily for 5 days. Another group was administered ML (10mg/kg; i.p.; WAS+ML group) following every WAS exposure for 5 days. Control rats were injected with the vehicle solution only. The stomach, ileum and colon were dissected and investigated for histopathological changes with a light microscope as well as for topographical changes with a scanning electron microscope. The levels of malondialdehyde (MDA, a biomarker of oxidative damage) and glutathione (GSH, a biomarker of protective oxidative injury) were also determined in all dissected tissues. In the WAS group, the stomach epithelium showed ulceration in some areas, dilatations of the gastric glands, degeneration of gastric glandular cells, and prominent congestion of the capillaries. In a similar fashion, degenerated epithelium and severe vascular congestions were observed in the ileum and colon. In all the tissues dense inflammatory cell infiltration and mast cell degranulation in mucosa were observed. The levels of MDA were significantly increased whereas those of GSH were significantly decreased in all test tissues in the WAS group compared to the control group. The morphology of gastric, ileal and colonic mucosa in WAS+ML group showed a significant amelioration showing a reduction in inflammatory cell infiltration and mast cell degranulation. Increased MDA and decreased GSH levels in the WAS group were also ameliorated with ML treatment. Based on the results, ML supplement seems attenuated inflammatory effects of WAS induction in gastrointestinal mucosa.