斑茅割手密复合体（GXAS07-6-1)及其与甘蔗F1 的GISH 分析

斑茅割手密复合体(GXAS07-6-1)是广西蔗茅属斑茅和广西甘蔗属割手密的属间杂种,聚集了双亲的优点。本研究利用基于Alu-like的PCR鉴定方法对GXAS07-6-1及甘蔗与GXAS07-6-1的3份F_1材料进行真实性鉴定,基于基因组原位杂交技术(GISH)对父本GXAS07-6-1及其3份F_1染色体组成及核型进行分析。研究结果表明:3份F_1材料为GXAS07-6-1的真杂种;父本GXAS07-6-1的染色体众数为62条,其中30条来自蔗茅属斑茅,32条来自甘蔗属割手密,核型分类属于1B,其染色体按\"n+n\"方式传递;GXASF_108-2-17、GXASF_108-2-22、GXASF_108-2-32的染色体数目为78~80条,其中69~71条来自甘蔗属,9~11条来自蔗茅属斑茅,3份F_1的核型分类分别属于2B、1B、1B,染色体传递方式均为\"n+n\"。父本GXAS07-6-1及3份F_1材料中均未发现有染色体的交换或易位现象。甘蔗与斑割复合体杂交,蔗茅属斑茅染色体在亲子间传递过程存在丢失现象。     

云南割手密82-114种间杂交后代SSR分子标记鉴定

针对云南割手密82-114(简称云割82-114)丰产、强生势的种质特性,利用福州果蔗(百眉蔗)×云割82-114获得99-67,利用99-67与云瑞99-248杂交获得03-1、03-3、03-12、03-16等18个杂交后代,利用03-16与ROC10杂交获得04-65,利用03-12与云瑞03-122杂交获得04-66等优良创新种质.SSR分子标记鉴定表明:99-67及03-5、03-7、03-10、03-13、03-15是真杂种,为甘蔗新品系的选育提供优良的创新种质.     

甘蔗与斑茅BC1分子鉴定、抗黑穗病和花叶病初步评价

为了解甘蔗(Saccharum)与斑茅(Erianthus arundinaceus)杂交后代作为抗病亲本的利用价值,通过特异引物PCR鉴定出78份甘蔗与斑茅杂交BC_1真实杂种;通过人工接种花叶病毒和黑穗病菌,初步评价了甘蔗和斑茅杂交BC_1的抗病表现。结果表明,甘蔗和斑茅杂交BC_1的抗花叶病具有普遍性,而黑穗病抗性则出现分离。初步筛选出BC_1无性系YCE01-48、YCE01-71、YCE01-105、YCE01-125、YCE02-184和YCE01-118可同时抗花叶病和黑穗病,有望成为甘蔗杂交利用的高抗病源亲本。     

斑茅割手密复合体杂交利用过程野生特异基因遗传分析

揭示斑茅割手密复合体在杂交利用过程中的斑茅、割手密野生特异基因在各世代的遗传规律,为利用斑割复合体创制甘蔗育种新亲本提供理论依据。利用AFLP-PCR分子标记结合毛细管电泳技术对斑割复合体在杂交利用过程中的斑茅、割手密野生特异基因在各世代的传递动态进行分析,并研究它们之间的遗传关系。29对AFLP引物组合共扩增出3695个位点,多态性比例为97.89%。斑茅和割手密对斑割复合体的遗传贡献率分别为43.96%和56.04%。斑茅特异位点在F1、BC1和BC2 3个世代的平均遗传率分别为8.25%、1.90%和0.63%,割手密特异位点在F1、BC1和BC2 3个世代的平均遗传率分别为16.98%、2.40%和0.21%,特异遗传物质均呈逐代减少趋势。比较不同世代甘蔗栽培种亲本遗传到后代的特异位点比率,F1的GT02-761特异位点比率最高,BC1的GT05-2743特异位点比例平均高达92.75%,BC2的ROC23遗传率最低,为49.09%,FN39遗传率最高,达94.32%。聚类分析结果表明斑割复合体偏向父本遗传,斑割复合体杂交后代偏向甘蔗栽培种遗传,与分子遗传关系分析结果一致。研究表明,经过3代的遗传重组,斑割复合体后代的遗传物质与斑割复合体相比已发生了很大的改变;研究明确了斑茅、割手密2个亲本在3个世代的遗传贡献规律,为进一步的杂交选育提供理论支持。     

SCoT分子标记在割手密遗传图谱构建中的应用

本研究以割手密GXS85-30×GXS87-16的杂交后代为材料,应用目标起始密码子多态性(SCoT)分子标记对杂交后代进行杂种鉴定,获得由157个单株组成的F1杂种群,同时对比SCoT、AFLP和SSR分子标记在割手密基因组多态性分析和获得分离标记的效果,证实SCoT在扩增DNA多态性上优于SSR分子标记,在获取分离标记上优于AFLP分子标记,验证了SCoT分子标记技术在割手密遗传分析中的应用效果,为割手密遗传分析和遗传图谱构建提供了一种新型高效的目的基因分子标记技术。     

甘蔗、斑茅及其杂种的过氧化物酶同工酶

甘蔗属(Saccharum L.)主要包括热带种(S.officinarum L.)、中国种(S.sinensisRoxb)、印度种(S.barberi Jeswiet)、“割手密”种(S.spontaneum L.)和大茎野生种(S.robustum Brandes)。甘蔗属的近缘植物——斑茅(Arundinaceum Retz)应该划归甘蔗属、蔗茅属(Erianthus Michx)或另立一属,意见不一。Dutt 等将斑茅列入蔗茅属,耿以礼等则将其划归甘蔗属。甘蔗糖业栽培的甘蔗(糖蔗)是热带种与割手密种、大     

中国斑茅种质资源分子多态性分析

采用ISSR分子标记技术,对采自我国8省区的30个斑茅[Erianthus arundinaceus (Retz.) Jesw.]无性系的分子多态性进行了分析, 共扩增出87条多态带, 平均每个引物扩增的多态带数为 5.1条, 多态性条带比率(PPB)为 64.89%,多态信息量(PIC)为0.58,说明我国斑茅具有较丰富的遗传多样性.根据研究结果进行聚类和主成分分析,可将30个斑茅无性系归为4大类,同一地区的斑茅无性系基本聚在同一类,呈现出一定的地域性分布规律.     

不同基因型割手密无性系的核型分析

为探讨不同基因型割手密无性系间的亲缘关系,采用酶解去壁低渗法对不同基因型的割手密材料进行核型分析。10份供试材料的绝大多数染色体为中部着丝点(m)染色体,少数为近中部着丝点(sm)染色体及正中部着丝点(M)染色体,部分材料中还具有端部着丝点(T)染色体及近端部着丝点区染色体(t);依据分析结果总结了参试材料的核型公式;参试材料中有2份为1B核型、7份为2B核型、1份为2C核型。参试材料间的核型均存在差异且不对称。     

基于GISH的甘蔗与斑茅F1染色体遗传与核型分析

斑茅在甘蔗育种的利用是现代甘蔗育种种质创新的热点,育种者期望把斑茅中优异的特性通过杂交渗透到甘蔗中。甘蔗与斑茅的F1是斑茅利用研究的难点也是基础。本研究利用基因组原位杂交技术(GISH)分析甘蔗与斑茅的F1染色体构成和核型,探讨甘蔗与斑茅F1染色体的遗传行为。GISH结果表明,甘蔗与斑茅杂交F1的染色体众数68~69条,其中40条来自甘蔗热带种Badila,28~29条来自海南斑茅,未发现有染色体的交换或易位现象。参试材料大部分染色体都属于中部着丝点(m)的染色体,少数为近中部着丝点(sm),YCE95-41核型属2B型,其余的核型都为1B型。甘蔗与斑茅的染色体按n+n的方式传递给F1,本研究结果为斑茅种质在甘蔗育种中的利用及其杂交后代染色体细胞遗传研究提供参考依据。     

芥菜型油菜与海甘蓝属间杂种的获得与鉴定

通过常规杂交,结合胚胎挽救方法,获得“泸州四棱油菜”(Brassica juncea(L.)Coss.)与海甘蓝(Crambe abyssinica Hochst.ex R.E.Fries)的属间杂种,杂种的诱导率为2.1％。杂种F_1形态分别倾向于双亲之一或介于双亲之间,后期发育延迟,叶子皱缩。F_1的花粉大小变幅很大,同时还具有父本的4沟花粉类型,占10％～15％;花粉育性很低,通过荧光素二醋酸酯(FDA)测定,有活力的花粉平均为18.5％。F_1体细胞染色体数为63,介于双亲染色体数之间,花粉母细胞具有63~I。采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳,杂种F_1代的同工酶具有父本的特征酶带,这进一步说明杂种的正确性。     

Access and Identification of Intergeneric Hybrid Between Brassica juncea×Crambe abyssinica

An intergeneric hybrid between Brassica juncea (L.) Coss. x Crambe abyssinica Hochst. ex R. E. Fries was obtained for the first time through routine method combined with embryo rescue. The inductivity of hybrids was 2.1%. In many respects the Fl hybrid resembled either its maternal or paternal parent br both. Consequenfiy, retarded growth, wrinkled leaves and rudimentary anthers in Fl plant were observed. Fl pollen varied in size and 10% ~ 15% were of the paternal pollen type,i.e. ,4-colpate. Fl pollen viability was low and 12% ~ 25% of pollens was viable, with a mean of 18.5%. The chromosome number of Fl somatic cell was 63 which was intermediate between the two parents. Most of pollen mother cells had 63 chromosomes. Analysis of isozymes further confirmed that the F1 hybrid combined the paternal characteristic bands.     

Production and characterization of somatic hybrids between Brassica napus and Raphanus sativus

Intergeneric somatic hybridization between Brassica napus and Raphanus sativus was carried out to enrich gene pool of B. napus. Twelve somatic hybrids were produced via PEG-mediated protoplast fusion between B. napus and R. sativus. The hybridity was confirmed by morphological observation and molecular marker analysis. Hybrid progenies (BC₁) were obtained via backcrosses with B. napus. Behaviour of R. sativus chromosomes in a B. napus background in the F₁ and BC₁ plants was revealed by genomic in situ hybridization (GISH). The potential of somatic hybridization to enrich the suitable gene pool for rapeseed breeding is discussed.     

拟三属间杂交品系神农高糖蔗种质来源鉴定

新品种选育的关键在于优异种质资源的创制和利用,远缘杂交是创新种质的重要手段。近年来,有机构宣称培育了一种由高粱、玉米、甘蔗属间杂交而成的神农高糖蔗新品系。为了准确地鉴定其种质来源,本研究利用形态学、SCo T标记和GISH技术对神农高糖蔗进行了研究。形态学初步鉴定结果表明:从根、茎、叶等不同器官的形态特征来看,神农高糖蔗与甘蔗、玉米、高粱都具有较多相似之处,无法准确地甄别出神农高糖蔗是否为真杂种。根据SCo T标记的聚类结果,可以将12份供试材料分成I、II、III 3大类,I类包括3份高粱材料和神农高糖蔗,6份甘蔗材料均聚为II类,2份玉米材料聚为III类。在整个聚类图中神农高糖蔗和非洲甜高粱的相似系数最大,说明神农高糖蔗与非洲甜高粱的遗传距离较小,它们之间存在较小的遗传差异。比较基因组原位杂交结果表明,神农高糖蔗只含有甜高粱的血缘,而不含有甘蔗和玉米的血缘。本研究结合3种鉴定方法,可以基本确定神农高糖蔗并非甘蔗、高粱和玉米的属间杂种,而是甜高粱的一个品系(品种)。本研究结果不仅揭露了虚假报道,避免不必要的损失,还探讨了甜高粱作为甘蔗远缘杂交种质资源的利用前景。     

Phylogenetics of Miscanthus,Saccharum and related genera (Saccharinae,Andropogoneae, Poaceae) based on DNA sequences from ITS nuclear ribosomal DNA and plastid trnLintron and trnL-F intergenic spacers

DNA sequences were used to assess the monophyly and inter-relationships of Miscanthus, Saccharum and related genera in the Saccharum complex. Three DNA regions were sequenced, including the trnL intron and the trnL-F intergenic spacer of the plastid genome and the ITS region of nuclear ribosomal DNA (nrDNA). Because it was more variable, the ITS region proved most suitable for phylogenetic reconstruction at this level, and the results indicate that Miscanthus s.l. and Saccharum s.l. are polyphyletic. A set of species from Saccharum section Ripidium (clade a) do not group closely with any members of Saccharum s.l.. A number of Miscanthus species from eastern or south-eastern Asia represent a monophyletic group with a basic chromosome number of 19 (clade b), but the other species from Africa and the Himalayas are clearly excluded. There is support for a monophyletic Saccharum s.s. clade including S. officinarum and S. spontaneum that is sister to Miscanthus s.s (clade c). There is no evidence to support the division of some Saccharum s.l. into the genera currently known as Erianthus and Narenga. Saccharum contortum (=Erianthus contortus), S. narenga (=Narenga porphyrocoma) and Erianthus rockii, group more closely with Miscanthus fuscus, a species from the Himalayas and also with the African Miscanthus s.l. species (=Miscanthidium, clade d). Electronic Publication     

一株高效解无机磷细菌BS06的鉴定及其解磷能力分析

【目的】对一株来源于广西甘蔗根际土壤的高效解无机磷细菌BS06的分类和解磷能力进行探讨,以期为解磷微生物在广西甘蔗生产上的开发和应用提供理论依据。【方法】通过形态观察、生理生化测定及16S rRNA基因序列同源性分析,进一步结合种特异的recA基因序列分析对解磷菌BS06进行分类鉴定;通过改变无机磷培养基中的碳源、氮源对菌株解磷能力的影响,分析菌株的解磷特性;通过盆栽试验了解菌株对甘蔗品种粤糖00236、桂糖28磷素吸收的影响。【结果】分类鉴定结果表明菌株BS06属于洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia);菌株在以乳糖为碳源条件下具有较强的解磷能力,其发酵液中水溶性磷含量为262.71 mg/L;在以硝酸钠为氮源条件下有较强解磷能力,其发酵液中水溶性磷含量达到305.85 mg/L;接种BS06菌株显著促进甘蔗组培苗的生长并提高甘蔗植株的含磷量。【结论】解磷细菌BS06具有较大的开发利用潜力。     

分子标记及其在鸟类分子生态学研究中的应用

分子生态学是一门相当新的分支学科,从前人的研究工作来看,分子标记在这个学科中应用非常广泛,本文描述了RFLP、RAPD、MinisatelliteDNA,MicrosatelliteDNA和AFLP这5个分子标记的优缺点及其在鸟类分子生态学中的应用和研究概况。     

普通小麦与东方旱麦草属间杂种的形态和细胞遗传学研究

本文对普通小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．ｅｖ．Ｆｕｋｕｈｏ,２ｎ＝６ｘ＝４２,ＡＡＢＢＤＤ）与东方旱麦草（Ｅｒｅｍｏｐｙｒｕｍｏｒｉｅｎｔａｌｅ（Ｌ．）Ｊａｕｂ．ｅｔＳｐａｃｈ,２ｎ＝４ｘ＝２８,Ｂ′Ｂ′Ｃ′Ｃ′）属间杂种Ｆ_１进行了形态和细胞遗传学方面的探讨。首先,在形态方面的研究表明：（１）杂种Ｆ_１植株生长旺盛,分蘖力强;（２）绝大部分性状如株高、穗长、芒长等介于双亲之间而呈中间型,少数性状如颖脊、颖壳茸毛可作为鉴别杂种的形态标记;（３）花粉粒空秕、无可染性,花粉高度不育,自交完全不结实。其次,从杂种Ｆ_１的细胞遗传学研究表明：（１）染色体平均构型为：２６．０９Ⅰ＋４．３６Ⅱ＋０．０９Ⅲ,二价体数目从０－７个均有分布,但大多数为棒状二价体;（２）每细胞平均交叉数为４．７８;（３）染色体臂平均配对频率（Ｃ值）为０．１７。由上可知,在普通小麦ＡＢＤ基因组与东方旱麦草Ｂ′Ｃ′基因组之间存在微弱的部分同源关系,或在东方旱麦草基因组中可能存在一种抑制普通小麦Ｐｈ基因作用的抑制因子（ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ）。     

青花菜与萝卜属间杂种的表型和分子鉴定

应用形态学、细胞学和分子标记的方法对通过胚挽救获得的青花菜与萝卜属间杂种植株进行了鉴定。结果表明:杂种植株的生长势明显强于父本和母本,大部分形态性状超出了父、母本的范围,部分性状介于父母本之间或偏向于父本或母本一方。表型和细胞学观察显示杂种植株具有类似母本的雄性不育特性。SSR分子标记分析表明,杂种植株包含了双亲的遗传信息。可见,远缘杂种是双亲间的真杂种。远缘杂交种的获得与初步鉴定为促进萝卜属和芸薹属的基因交流提供了桥梁种质,为进一步创制萝卜或芸薹属作物新种质提供了基础材料。