中国球盖菇科(六):盔孢菌属

通过观察吉林农业大学菌物研究所标本馆(HMJAU)、中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)、中国科学院昆明植物研究所标本馆隐花植物标本馆(HKAS)和广东微生物研究所标本馆(GDGM)及作者野外采集标本的宏观形态和微观结构,对中国盔孢菌属进行了分类学研究。对中国分布的16个种进行了形态学描述、显微线条图绘制,并编写了分组、分种检索表。其中,包括内蒙古新记录种2个:秋生盔孢菌[Galerinaautumnalis(Peck)A.H.Sm.&Singer]和单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer];黑龙江省新记录种3个:异囊盔孢菌[Galerina heterocystis(G.F.Atk.)A.H.Sm.&R.Sin.]、黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];吉林省新记录种2个:异囊盔孢菌[Galerina heterocystis(G.F.Atk.)A.H.Sm.&R.Sin.]和苔藓盔孢菌[Galerina hypnorum(Schrank)Kühner];辽宁省新记录种1个:黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)singer];浙江省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];湖北省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];湖南省新记录种1个:秋生盔孢菌[Galerina autumnalis(Peck)A.H.Sm.&Singer];广西省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vit-tiformis(Fr.)Earle];四川省新记录种3个:苔藓盔孢菌[Galerina hypnorum(Schrank)Kühner]、条盖盔孢菌[Galerina sulciceps(Berk.)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];贵州省新记录种3个:单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer]、毒盔孢菌(Galerina venenataA.H.Sm.)和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];西藏新记录种3个:单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer]、黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];新疆新记录种1个:黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]。     

中国盔孢伞属的分类

根据采自全国20个省、自治区的盔孢伞属Galerina真菌标本整理、鉴定,确认出36种,其中包含28个已知种和8个中国新记录种。对中国新记录种褐柄盔孢伞G. badipes、帆孢盔孢伞G. calyptrata、迦佩盔孢伞G. jaapii、假拟提灯藓盔孢伞G. pseudomniophila、沼泽盔孢伞G. paludosa、泡孢盔孢伞G. physospora、萨列里盔孢伞G. sahleri和胫囊盔孢伞G. tibiicystis进行了详尽的形态学描述,提供了原生态照片和显微特征线条图以及分亚属、分种检索表。通过相关研究材料进行DNA提取,所得21条ITS序列与73条下载序列利用贝叶斯法及最大似然法构建系统发育树,验证鉴定结果的准确性。     

长白山鹅膏菌肽类毒素的HPLC分析

采用HPLC法对长白山地区分布的10种鹅膏菌中的α-鹅膏毒肽（α-amanitin)、β鹅膏毒肽（β-amanitin)和鬼笔毒肽（phalloidin)3种毒素的含量进行了测定。结果表明：白鹅膏（A.verna)和磷柄白鹅膏（A.virsa)中含有α-amanitin和β－amanitin两种毒素,二者β－amanitin的含量分别为1861．85μg/g和2477.02μg/g,均高于欧洲产毒鹅膏（A.phalloides)中的含量（1607μg/g）而接近灰花纹鹅膏Amanita fuliginea中的量（2633.80μg/g)。毒鹅膏A.phalloides中含有3种毒素,并且菌蕾中的含量高于成熟子实体,尤其菌蕾中Phalloidin的含量（1113.35μg/g)是灰花纹鹅膏成熟子实体中（432．5μg/g）的3倍。     

三种鹅膏菌培养条件及所产肽类毒素的比较研究

以外生菌根菌鹅膏菌属三个种Amanita muscaria,A.pseudoporphyria和A.fritillaria为研究材料,以生长速率为评价指标,对其最适生长温度、pH值、光照、培养基、C及N源的利用等基本培养条件及所产肽类毒素进行了比较研究。研究结果表明,三种菌株最适生长温度有差异,A.pseudoporphyria和A.fritillaria的最适温度为28℃,A.muscaria的最适温度为22℃;A.muscaria菌丝体生长的pH值范围为5-7,另外两个菌株的pH值范围为3-6;24h光照、12h光暗交替和24h黑暗对鹅膏菌的生长速率影响不大;SPDM培养基和MMN培养基都适合三种菌株的生长,但对于A.muscaria来说PDM培养基更适合其生长。鹅膏菌能够利用比较广泛的C、N源,但三个种在利用的C、N源种类上有一定的差别。通过抑芽法实验和HPLC分析分别表明三种鹅膏菌所含肽类毒素在种类和含量上有所不同,但都对绿豆发芽有一定的抑制作用。A.pseudoporphyria和A.fritillaria菌丝体中α-amanitin的含量分别为35.56μg/gDCW(drycellweight细胞干重)和26.02μg/gDCW,不含有phalloidin和β-amanitin;A.muscaria菌丝体中没有检测到α-amanitin、β-amanitin和phalloidin。结果表明供试的三种鹅膏菌在基本培养条件及所产肽类毒素方面存在种水平上的差异。     

致命鹅膏不同生长时期α-amanitin毒素的含量变化

采用高效液相色谱(HPLC)技术对我国剧毒蘑菇新种——致命鹅膏AmanitaexitialisZhuL.Yang&T.H.Li子实体不同生长时期的主要鹅膏毒素α-amanitin(α-鹅膏毒肽)的含量进行了分析。结果表明:致命鹅膏在不同的生长阶段,其α-amanitin的含量有较明显变化:成熟老化时期的子实体α-amanitin的含量最低,仅为1462.7μg/g干重;含量最高的是生长旺盛时期的子实体,达2226.8μg/g干重,比成熟老化期的多34%;菇蕾时期的含量处于前两者之间,为1725.9μg/g干重,比成熟老化期的多15%,但比生长旺盛期的少22%。这表明致命鹅膏在子实体生长过程中,其α-amanitin的含量可能呈正态分布变化。     

我国28种鹅膏菌主要肽类毒素的检测分析*

利用高效液相色谱(HPLC)技术对产于我国的28种鹅膏菌的主要肽类毒素(鹅膏毒肽和鬼笔毒肽)进行了检测分析,并和采于欧洲(德国)的毒鹅膏Amanita phalloides作对照,结果表明,3种东亚所特有的鹅膏菌(灰花纹鹅膏、致命鹅膏和黄盖鹅膏白色变种)和欧洲毒鹅膏所含毒素种类多、含量高,其子实体菌盖部位主要毒素总量分别达到12583.7μg/g、8152.6μg/g、1058.2μg/g、7456.2μg/g干重子实体,这4种鹅膏菌可称之为剧毒鹅膏菌。其它25种鹅膏菌中有10种检测出含有微量鹅膏毒肽,含量在19.5μg/g-151.2μg/g之间。在4种剧毒鹅膏菌中,子实体组织部位不同,毒素含量以及鹅膏毒肽和鬼笔毒肽在其中的分布也不一样,菌盖中的毒素含量最高,菌柄的毒素含量次之,菌托中的毒素含量最低;对于灰花纹鹅膏、致命鹅膏和黄盖鹅膏白色变种,无论在菌盖、菌柄和菌托中,鹅膏毒肽类毒素的含量都高于鬼笔毒肽类毒素,尤其以α-amanitin的相对含量最高;而在欧洲毒鹅膏中,菌盖、菌柄和菌托中都以鬼笔毒肽为主,尤其以phallacidin的相对含量最高,并且从菌盖至菌柄到菌托,鬼笔毒肽的相对含量依次增加。     

盔孢伞属三个中国新记录种

盔孢伞属Galerina隶属于担子菌门Basidomycota蘑菇纲Agaricomycetes蘑菇目Agaricales球盖菇科Strophariaceae,目前该属全球已知300多种,多分布于北半球。中国报道30余种,目前20余种已得到确认,本文是对以往工作的补充。在对该属新近采集的标本进行研究时,发现3个中国新记录种,即小盔孢伞G.pumila、阿氏盔孢伞G.atkinsoniana和纹柄盔孢伞G.stylifera,对其进行详细的形态特征描述,并绘制其担子体宏观结构及光学显微镜下其担孢子、担子、缘生囊状体、柄生囊状体、菌盖表皮菌丝显微结构的线条图,提供了扫描电子显微镜的担孢子照片,对所研究材料进行DNA提取、PCR扩增、测序获得其ITS序列并上传到Gen Bank。下载Gen Bank中通过Blast比对所得该属北美序列及对该属分子系统学文献中的盔孢伞属欧洲序列,选择盔孢伞属的姊妹群裸伞属Gymnopilus作为外类群,并与所用材料获得的ITS序列结合,通过贝叶斯建立系统发育树。从系统发育树结果看,本文报道的3个新记录种皆与所下载的该种序列聚在一枝,且支持率较高,验证了3个新记录种的形态学鉴定结果。     

块磷鹅膏的培养条件及所产Amanitins毒素的分析

采集并组织分离到块磷鹅膏Amanita spissa的纯培养菌丝。探讨了各种培养条件对块磷鹅膏菌丝生长的影响,实验结果表明,在28℃,pH 6.0,避光的条件下块磷鹅膏的菌丝体生长最好。液体反应器人工培养块磷鹅膏获得成功,其液体培养的菌丝体干重在摇瓶中为0.893g/L,在气升式反应器内可达到2.33g/L。固体斜面培养和气升式反应器液体培养的菌丝体的HPLC分析表明菌丝体内含有鹅膏毒肽,而不含有鬼笔毒肽。两种培养条件下菌丝体的-αamanitin毒素含量略有不同,固体斜面菌丝体为26.02μg/gDCW、反应器培养菌丝体为15.25μg/gDCW。通过抑芽法试验也证明固体和液体培养菌丝体中含有-αamanitin,且具有和子实体中-αamanitin相同的生物学活性。结果表明有可能通过液体大规模培养鹅膏菌丝体来生产鹅膏毒素。     

致命鹅膏不同生长时期α-amanitin毒素的含量变化

采用高效液相色谱（HPLC）技术对我国剧毒蘑菇新种——致命鹅膏Amanita exitialis Zhu L.Yang＆T.H.Li子实体不同生长时期的主要鹅膏毒素α-amanitin（α-鹅膏毒肽）的含量进行了分析。结果表明：致命鹅膏在不同的生长阶段,其α-amanitin的含量有较明显变化：成熟老化时期的子实体α-amanitin的含量最低,仅为1462．7μg/g干重;含量最高的是生长旺盛时期的子实体,达2226．8μg/g干重,比成熟老化期的多34％;菇蕾时期的含量处于前两者之间,为1725．9μg/g干重,比成熟老化期的多15％,但比生长旺盛期的少22％。这表明致命鹅膏在子实体生长过程中,其α-amanitin的含量可能呈正态分布变化。     

我国28种鹅膏菌主要肽类毒素的检测分析

利用高效液相色谱(HPLC)技术对产于我国的28种鹅膏菌的主要肽类毒素(鹅膏毒肽和鬼笔毒肽)进行了检测分析,并和采于欧洲(德国)的毒鹅膏。Amanita phalloides作对照,结果表明,3种东亚所特有的鹅膏菌(灰花纹鹅膏、致命鹅膏和黄盖鹅膏白色变种)和欧洲毒鹅膏所含毒素种类多、含量高,其子实体菌盖部位主要毒素总量分别达到12583．7μg／g、8152．6μg／g、1058．2μg／g、7456．2μg／g干重子实体,这4种鹅膏菌可称之为剧毒鹅膏菌。其它25种鹅膏菌中有10种检测出含有微量鹅膏毒肽,含量在19．5μg／g—151．2μg/g之间。在4种剧毒鹅膏菌中,子实体组织部位不同,毒素含量以及鹅膏毒肽和鬼笔毒肽在其中的分布也不一样,菌盖中的毒素含量最高,菌柄的毒素含量次之,菌托中的毒素含量最低;对于灰花纹鹅膏、致命鹅膏和黄盖鹅膏白色变种,无论在菌盖、菌柄和菌托中,鹅膏毒肽类毒素的含量都高于鬼笔毒肽类毒素,尤其以α-amanitin的相对含量最高;而在欧洲毒鹅膏中,菌盖、菌柄和菌托中都以鬼笔毒肽为主,尤其以phallacidin的相对含量最高,并且从菌盖至菌柄到菌托,鬼笔毒肽的相对含量依次增加。     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.