高羊茅和其他羊茅植株再生与遗传转化研究进展

高羊茅、紫羊茅和草地羊茅均为很重要的多年生冷季型牧草与草坪草,生物技术在其品种改良中具有很大的应用潜力。30年来,三种羊茅的组织培养、胚性培养物的长期保存以及遗传转化等研究取得了较大进展,已建立起多种植株再生体系和遗传转化技术,但作为单子叶植物,这些草种的组织培养和转基因遗传改良也还存在一些问题。本文就以上几方面的内容进行了综述。     

高羊茅的组织培养和植株再生

1　植物名称　高羊茅 (Ｆｅｓｔｕｃａａｒｕｎｄｉｎａｃｅａ) ,又称苇状羊茅。2　材料类别　成熟种子。3　培养条件　胚性愈伤组织诱导培养基 :( 1 )ＭＳ大量及微量元素 (下同 ) 2 ,4 Ｄ 9.0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ;( 2 )ＭＳ 2 ,4 Ｄ 5 .0。分化培养基 ( 3)ＭＳ 6 Ｂ     

农杆菌介导的高羊茅高效遗传转化和转基因植株再生

用带有质粒pDBA121(含hpt基因和bar基因)的农杆菌EHA 105转化高羊茅(Festucaarundinacea Schreb.)胚性悬浮细胞,建立了可重复的、高效的农杆菌介导的高羊茅遗传转化系统.商业用的除草剂Basta直接用于转化细胞的筛选.基因型、受体材料的类型、培养基成分和筛选剂影响农杆菌介导的转化频率.悬浮细胞的农杆菌转化效率为每克悬浮细胞再生2.85～10.9株转基因植株,大大高于基因枪法的高羊茅转化效率(2～5株).经PCR分析和Southern杂交检测表明,bar基因已整合进入高羊茅基因组,转基因植株Basta喷洒试验表明bar基因已成功地实现高水平的表达.此转化系统的建立为高效地将外源有用基因导入高羊茅并高效稳定地表达奠定了基础.     

草坪草-高羊茅遗传育种研究进展

随着我国草坪业的快速发展 ,草坪草遗传育种工作越来越受到人们的关注。简要介绍了高羊茅的育种历史和现状 ,并对高羊茅植株再生体系的建立及遗传转化方面的研究进展进行了综述。此外 ,还提出了我国高羊茅育种的几点建议。     

高羊茅转基因研究进展

高羊茅为很重要的多年生冷季型草坪草,生物技术在其品种改良中具有很大的应用潜力。本文对高羊茅植株再生体系的建立及遗传转化方面的研究进展进行了综述。同时,对高羊茅转基因研究中存在的问题和前景作了讨论。     

蓝羊茅的组织培养与植株再生

1 植物名称 蓝羊茅（Festuca ovina vat．glauca Hack.）。     

月季的植株再生及遗传转化研究进展

本文对近20年月季植株再生和转基因研究进展进行了较为系统的回顾和总结.月季通过器官和体细胞胚发生途径都能再生植株,但遗传转化主要是利用体细胞胚发生途径.通过农杆菌介导法和基因枪法,外源基因如报告基因、抗病基因和改变花色的基因等已转化成功.文章还对今后月季转基因研究的方向进行了讨论.     

月季的植株再生及遗传转化研究进展

本文对近20年月季植株再生和转基因研究进展进行了较为系统的回顾和总结。月季通过器官和体细胞胚发生途径都能再生植株,但遗传转化主要是利用体细胞胚发生途径。通过农杆菌介导法和基因枪法,外源基因如报告基因、抗病基因和改变花色的基因等已转化成功。文章还对今后月季转基因研究的方向进行了讨论。     

高羊茅植株再生体系的研究与建立

利用幼苗下胚轴建立了高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb.)植株再生体系。当高羊茅种子以次氯酸钠为主要消毒剂时,其最适的浓度和时间分别为次氯酸钠50%(V/V)处理20min,种子发芽率为80%,污染率为0%。研究发现用高羊茅下胚轴诱导愈伤组织时,下胚轴的不同的切法对愈伤组织诱导有影响,从一端切的下胚轴诱导愈伤率74.7%高于从两端切55.8%。以下胚轴为外植体,2,4D的浓度为9mg·L1时,愈伤组织诱导率最高。高羊茅愈伤组织的分化再生率可达80.7%。     

Comparative analysis of transgenic tall fescue (<Emphasis Type="Italic">Festuca arundinacea</Emphasis> Schreb.) plants obtained by <Emphasis Type="Italic">Agrobacterium</Emphasis>-mediated transformation and particle bombardment

Agrobacterium-mediated transformation and particle bombardment are the two most widely used methods for genetically modifying grasses. Here, these two systems are compared for transformation efficiency, transgene integration and transgene expression when used to transform tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.). The bar gene was used as a selectable marker and selection during tissue culture was performed using 2 mg/l bialaphos in both callus induction and regeneration media. Average transformation efficiency across the four callus lines used in the experiments was 10.5% for Agrobacterium-mediated transformation and 11.5% for particle bombardment. Similar transgene integration patterns and co-integration frequencies of bar and uidA were observed in both gene transfer systems. However, while GUS activity was detected in leaves of 53% of the Agrobacterium transformed lines, only 20% of the bombarded lines showed GUS activity. Thus, Agrobacterium-mediated transformation appears to be the preferred method for producing transgenic tall fescue plants.     

猕猴桃的组织培养和遗传转化研究进展

综述了国内外猕猴桃组织培养和遗传转化研究进展,内容包括花药培养、胚培养、胚乳培养、子叶、叶、茎段等器官培养、原生质体培养以及遗传转化等,并对生物技术在猕猴桃研究中存在的问题以及今后在猕猴桃中的应用前景进行了讨论。     

香石竹植株再生及基因工程研究进展

本文对香石竹的再生体系、遗传转化体系及其分子育种现状作了较为系统的总结。香石竹的再生体系多以器官直接再生不定芽为主,而通过愈伤组织和体细胞胚途径再生报道较少。用农杆菌介导法和基因枪法均可建立香石竹遗传转化体系,但近年来的研究显示农杆菌介导法应用普遍且比较稳定。近年来以延长香石竹瓶插寿命为目标的分子育种研究已取得较大进展,对其色、香和形等其他重要性状的分子育种也已经起步,而有关香石竹抗性的分子育种有待进一步开拓。     

玉米花药培养和单倍体育种的研究新进展

利用花药培养获得单倍体,从而加速育种进程,是一顶新兴的生物技术,目前在玉米育种中广泛应用,本文综合近几年来国内外玉米的花药培养、单位体育种以及基因工程等方面的研究进展,重点对影响玉米花药培养效率的诸多因素进行了详细论述,并讨论了利用单7保体植株进行基因转导的潜力。     

地被菊的再生与转化系统的建立

文章初步建立了地被菊品种‘早小春’组织培养植株再生系统和农杆菌介导的稳定转化系统。幼蕾管状花瓣诱导培养获得再生植株的最适培养基为MS+2.0mg·L-1ZT+0.5mg·L-12,4-D,愈伤组织诱导率可达95%以上,不定芽的分化率达到87%以上。以再生植株叶片为外植体进行遗传转化实验的结果表明:用MS液体培养基稀释的农杆菌液效果最佳,以感染8min左右,共培养3d为宜。同时附加40mg·L-1卡那霉素和500mg·L-1头孢霉素是地被菊转化的最佳条件。     

The Effect of Endophytic Fungi on Nematode Populations in Summer-dormant and Summer-active Tall Fescue

Summer-active (continental) and summer-dormant (Mediterranean) tall fescue morphotypes are each adapted to different environmental conditions. Endophyte presence provides plant parasitic nematode resistance, but not with all endophyte strains and cultivar combinations. This study sought to compare effects of four nematode genera on continental and Mediterranean cultivars infected with common toxic or novel endophyte strains. A 6-mon greenhouse study was conducted with continental cultivars, Kentucky 31 (common toxic) and Texoma MaxQ II (novel endophyte) and the Mediterranean cultivar Flecha MaxQ (novel endophyte). Endophyte-free plants of each cultivar were controls. Each cultivar × endophyte combination was randomly assigned to a control, low or high inoculation rate of a mixed nematode culture containing stunt nematodes (Tylenchorhynchus spp.), ring nematodes (Criconemella spp.), spiral nematodes (Helicotylenchus spp.), and lesion nematodes (Pratylenchus spp.). Endophyte infection had no effect on nematode population densities. The cultivar × endophyte interaction was significant. Population densities of stunt nematode, spiral nematode, and ring nematodes were higher for Flecha MaxQ than other cultivar × endophyte combinations. Novel endophyte infection enhances suitability of Flecha MaxQ as a nematode host.     

基因枪转化获得的转基因水稻中外源基因整合与表达规律研究

通过基因枪法将cecropin B和bar基因共转化水稻,获得多个水稻优良品系的转化材料,对转基因的结构和表达的系统分析,发现外源基因的整合模式多种多样,有简单也有复杂,其中插入位点数的变化范围为1－7个,拷贝数的变化范围为1－10个,转基因拷贝数的多少与其表达和沉默不存在必然的联系,相同整合模式的转基因事件中基因的表达存在较大的差异,选择标记基因bar比非选择标记基因cecropin B的表达框的完整性和转录概率要高,但是发现大部分表达框完整的bar基因发生基因沉默,而在终止子发生序列丢失的cecropin B基因的表达则明显提高。     

不同外植体来源和培养条件对拟似棉植株再生的影响

对拟似棉的不同器官(叶、叶柄、茎)在离体培养中的反应以及影响植株分化的各种因素(继代培养时间、激素、光、温度)进行了研究。结果表明:茎段作为外植体效果最佳,并且愈伤组织的诱导能力与茎段切口的面积成正比。外植体的方向性,也就是指茎表皮靠着培养基,切口面暴露于空气中为愈伤组织诱导的重要条件。愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2mg/l IAA+1mg/l KT,最佳培养条件是强光(10,000勒克斯)、高温(29±1℃)。在MS+0.1mg/l NAA+3mg/l 2ip+0.5g/l LH分化培养基上,在4,000—5,000勒克斯的光强,28℃条件下,愈伤组织分化成小苗的频率可达20％。