水稻叶片在自然衰老过程中1，5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的降解(英文)

１,５二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（Ｒｕｂｉｓｃｏ）是光合碳同化的关键酶,研究其降解机理对合理调控水稻生长后期光合衰退具有重要意义。前人用人为诱导植物衰老的方法,研究了Ｒｕｂｉｓｃｏ的降解机理,认为该酶降解之前,必需发生亚基间的交联聚合和向类囊体膜转移,这样在结构和空间上有利于水解酶的作用。我们用自然衰老叶片进行研究的结果表明：Ｒｕｂｉｓｃｏ在降解过程中其比活基本保持恒定,意味着未发生酶的失活,也就是说酶结构未发生根本性改变,由此也可初步判断酶未发生亚基间的交联聚合（已证明亚基交联可导致酶失活）。接着用ＳＤＳＰＡＧＥ和蛋白印迹技术证实了上述观点：Ｒｕｂｉｓｃｏ降解之前只有极少量的大亚基聚合体,随后同未聚合大亚基一起很快降解。此外,研究结果进一步表明酶分子在降解之前有少量与叶绿体膜结合,但降解过程中并未见膜结合蛋白增加。根据上述结果我们认为,亚基间交联聚合和向膜转移并非水稻叶片自然衰老时Ｒｕｂｉｓｃｏ降解的必要条件。     

Rubisco活化酶的研究进展

Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶是最近发现的一种该编码的叶绿体蛋白,它在叶绿体内具有激活光合碳同化限速酶Ｒｕｂｉｓｃｏ的功能,该酶能在生理水平ＲｕＢＰ,ＣＯ２浓度（１０μｍｏｌ／Ｌ）下使Ｒｕｂｉｓｃｏ达到最大的活化程度,Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶的研究揭示了长期以来未能解决的Ｒｕｂｉｓｃｏ在体内活化的机理,Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶能解除磷酸糖对Ｒｕｂｉｓｃｏ活性的抑制作用,它的活化活性需要有ＡＴＰ的存在,同时它有ＡＴＰ     

影响水稻光合日变化的酶和相关因素的分析

水稻叶片的最大光合速率出现在上午１０：００时,Ｒｕｂｉｓｃｏ初始活力也在此时达到最大,然后逐渐降低,下午１４：００时略上升后又下降．Ｒｕｂｉｓｃｏ初始活力与光合速率之间极显著相关,相关系数为 ０．９４７４．运用相关性分析、回归分析、通径分析,对晴（有时有云）天气水稻叶片的光合速度、光合关键酶及有关因素的日变化进行综合评估,结果发现中午光合下降主要来自气孔限制,同时Ｒｕｂｉｓｃｏ活性也下降;Ｒｕｂｉｓｃｏ活性是影响光合日变化的又一重要生化因子．体内Ｒｕｂｉｓｃｏ活性受Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶的调节．     

水稻转绿型白化突变系W25转绿过程中Rubisco,Rubisco活化酶 …

水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）转录型白化突变系Ｗ２５在转绿过程中叶绿素、可溶性蛋白质和Ｒｕｂｉｓｃｏ含量的动态变化过程表明,白化突变体内叶绿素、可溶性蛋白质和Ｒｕｂｉｓｃｏ含量极低,随着转录过程各组分含是迅速提高,转绿至第３０天,超过野生种２１７７ｓ;Ｒｕｂｉｓｃｏ初台活力与Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶含量呈极显著正相关。Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶基因表达的研究结果表明,突变体的Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶表达     

光和糖对水稻Rubisco活化酶基因表达的影响

水稻黄化苗在光照２ｈ内其Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶的ｍＲＮＡ物收白量明显增加,然后维持在相对 水平。光对水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶的基因表达的诱导作用主要在转录水平上。Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶主要在绿叶中表达,这与Ｒｕｂｉｓｃｏ基因表达的器官特异性完全一致。用等渗葡萄糖喂养成熟的水稻叶片１ｈ,促使水稻Ｒｏｕｂｉｓｃｏｄｄ 、ｉｈ ｇｏｇ ａｄ ｔ Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶可ｍＲＮＡ含量下降同样蔗糖对Ｒ７ｕｂｉｓｃ     

野生大豆rbcS基因的克隆及结构分析

核酮糖１,５二磷酸羧化酶（Ｒｕｂｉｓｃｏ,Ｅ．Ｃ．４．１．１．３９）是光合碳代谢中的关键酶,也是植物中研究最为广泛深入的一种酶。高等植物的Ｒｕｂｉｓｃｏ大、小亚基分别由叶绿体和核基因组编码。迄今已有几十种光合生物的Ｒｕｂｉｓｃｏ大、小亚基的基因（ｒｂｃＬ、ｒｂｃＳ）结构得到阐明［１］。在高等植物中ｒｂｃＳ基因由多基因家族编码,结构较为复杂,但它同时又是一种相对保守的基因,且同一物种内各ｒｂｃＳ基因成员是协同进化的,因此ｒｂｃＳ基因适合于植物分子进化及系统分类的研究［２］。我国是栽培大豆（Ｇｌｙｃ…     

水稻和烟草核酮糖1，5－二磷酸羧化酶／加氧酶大小亚基之间的分子杂交

利用固定化Ｒｕｂｉｓｃｏ大小亚基解离重组技术,进行水稻和烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ大小亚基之间的分子杂交,实验表明,无论同源或异源的小亚基重组到固定化的大亚基上去后,其羧化酶活性没有明显的变化,但对加氧酶活性却有明显的影响。当水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ的大亚基同烟草小亚基杂交重组后,其加氧酶活性同固定化水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ相比有明显的增高,因而其羧化／氧化比值下降,并且接近于对照的固定化烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ。反之,当烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ的大亚基与水稻小亚基杂交重组后,其加氧酶活性同固定化烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ相比有明显降低,因而其羧化／氧化比值升高,并接近于对照的固定化水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ。由此推测,高等植物Ｒｕｂｉｓｃｏ的小亚基对酶的羧化／氧化比值有一定的影响。     

Rubisco活化机制

Ｒｕｂｉｓｃｏ活化机制廖祥儒,朱新产（西北农业大学,陕西杨陵７１２１００）关键词Ｒｕｂｉｓｃｏ,ＣＯ_２,活化酶,ＣＡＩＰ１,５－二磷酸核酮糖羧化酶／氧合酶（Ｒｕｂｉｓｃｏ）是目前仅知的５种具有双功能催化活性的酶之一。它既能催化１,５－二磷酸核酮糖（?..     

烟草Rubisco活化酶的纯化及其特性

利用３５％饱和硫酸 分部、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｃｅｌ和ＦＰＬＣ＝－ＭｏｎｏＱ柱层析等步骤从烟草叶片Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶,并制备了其性抗体。此法不仅快速,而且比活力高。以往认为菠菜和拟南芥Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶由两种亚基组成。通过快速制备的粗提液分析,发现烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ活化酶同一各４２ＫＤ的亚基组成。即使在有多种收白酶抑制的情况下,此亚基仍很易降３９ＫＤ的亚基。ＡＴＰ不仅对酶的活性所必需,而且也有利     

芦苇叶中Rubisco对干旱生境的响应

从分布于甘肃省河西走廓的沼泽芦苇和沙丘芦苇叶中提纯的Ｒｕｂｉｓｃｏ,大、小、小亚基分子量无明显变化,但沙丘芦苇与沼泽芦苇与沼泽芦苇相比较,Ｒｕｂｉｓｃｏ的氨基酸组成中,亲水性氨基酸相对含量增加,疏水性氨基酸相对含量减少,酶分子的疏水性降低,且酶分子中可被ＰＣＭＢ滴定的ＳＨ基数仅为沼泽芦苇的５０％。这说明,芦苇在长期适应沙丘干旱生境过程中,其Ｒｕｂｉｓｃｏ无论在结构与功能上,均发生有适应性的改变。     

水稻和烟草核酮糖1,5—二磷酸羧化酶／加氧酶大小亚基之间的分子杂交

利用固定化Ｒｕｂｉｓｃｏ大小亚基解离重组技术,进行水稻和烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ大小亚基之间的分子杂交,实验表明,无论同源或异源的小亚基重组到固定化的大亚基上去后,其羧化酶活性没有明显的变化,但对加氧酶活性却有明显的影响。当水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ的大亚基同烟草小亚基杂交重组后,其加氧酶活性同固定化水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ相比有明显的增高,因而其羧化／氧化比值下降,并且接近于对照的固定化烟草Ｒｕｂｉｓｃｏ。反之,当     

莱茵衣藻突变体与野生型RUBISCO酶动力学参数的比较研究

以莱茵衣藻的Ｒｕｂｉｓｃｏ突变体６９－１２Ｑ＾＋,６８－４ＰＰ＾＋和野生型２１３７＾＋为材料,分析比较了Ｒｕｂｉｓｃｏ粗酶在不同温度,不同ｐＨ条件下的初始活性,２５℃时的总活性,酶的最适温度,最适ｐＨ和粗酶的活化百分数,用Ｋｏｓｔｏｖ和ＭｃＦａｄｄｅｎ的作图法测定了３个品系Ｒｕｂｉｓｃｏ纯化酶在２５℃时的ＣＯ２／Ｏ２特征因子Ω值结果６９－１２Ｑ＾＋的Ω＝１３;６８－４ＰＰ＾＋的为５４;２１３７＾＋     

草酸对氧化胁迫下水稻叶片中核酮糖—1,5—二磷酸羧化酶／加氧 …

以杂交稻（汕优６３）为试验材料,在木村Ｂ营养液中培养至三叶期,用草酸５ｍｍｏｌ／Ｌ预处理水稻２ｄ,再处以氧化胁迫（用０．１ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的活性氧诱发剂甲基紫精处理）。结果表明：ＭＶ诱发的氧化胁迫下,Ｒｕｂｉｓｃｏ及其它可溶性蛋白快速降解。草酸预处理可明显缓解Ｒｕｂｉｓｃｏ及其它可溶性蛋白的降解,降解速率分别降低１／３和１／２左右,植株经草酸处理后其叶片中几种抗氧化酶如ＡｓＡ－ＰＯＤ、ＳＯＤ、ＣＡ     

Rubisco副合基因的构建及其在E.coli中的表达

将编码番茄核酮糖－１,５－二磷酸羧化酶／加氧酶小亚基转运肽的一段ＤＮＡ序列与菠菜Ｒｕｂｉｓｃｏ大亚基的编码区连接,构建了一个Ｒｕｂｉｓｃｏ融合基因。限制性内切酶图谱和ＤＮＡ序列分析证明副合部位的核苷酸序列符合构建前的三联密码子框架。将Ｒｕｂｉｓｃｏ融合基因转入Ｅ．ｃｏｌｉ,用ＩＰＴＧ进行诱导表达。利用蛋白质印迹技术检测到诱导产物的存在。     

Rubisco的装配一种研究监护分子（molecular chaperone）作用的模型系统

Ｒｕｂｉｓｃｏ的装配──一种研究监护分子（ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｐｅｒｏｎｅ）作用的模型系统李立人（中国科学院上海植物生理研究所,上海２０００３２）关键词Ｒｕｂｉｓｃｏ,装配１．引言核酮糖１,５－二磷酸羧化酶／加氧酶（简称Ｒｕｂｉｓｃｏ,Ｅ．Ｃ．４...     

低温锻炼对水稻幼苗叶片中Rubisco的影响

低温锻炼能提高水稻幼苗的抗冷力,低温锻炼虽不能明显提高Ｒｕｂｉｓｃｏ活性,却提高了冷却条件下Ｒｕｂｉｓｃｏ的稳定性和增强了胁迫后正常生长条件下其活性的恢复能力。分别用火箭免疫电泳分析Ｒｕｂｉｓｃｏ蛋白和ＳＤ－ＳＰＡＧＥ分析大,小亚基量表明：低温锻炼未提高Ｒｕｂｎｉｓｃｏ蛋白的合成能力,但增加了大,小亚基的合成量。     

水稻叶片中过氧化氢与核酮糖—1,5—二磷酸羧化酶／加氧酶降解 …

甲基紫精（ＭＶ）处理水稻植株能快速诱导核酮糖－１,５－二磷酸羧化酶／加氧酶（Ｒｒｂｉｓｃｏ,ＥＣ４．１．１．３９）及其它可溶性蛋白的降解。ＭＶ浓度越高,降解速率越高。ＭＶ能诱发叶片内源Ｈ２Ｏ２迅速积累。光合电子传递抑制剂ＤＣＭＵ（１５０μｍｏｌ／Ｌ）能显著抑制ＭＶ（１００μｍｏｌ／Ｌ）诱导的Ｒｕｂｉｓｃｏ及其它可溶性蛋白的降解;活性氧清除剂抗坏血酸（５ｍｍｏｌ／Ｌ）、甘露醇（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）、苯     

水稻光合速率、气孔导度和Rubisco活力的日变化

在晴天有时有云天,水稻剑叶的最大光合速率出现在午前９：００左右。中午前后,无论光合量子通量（ＰＰＦ）等于或略低于９：００前后,净光合率（Ｐｎ）及Ｐｎ／ＰＰＦ比值均较低。ＲＯｂｉ８ＣＯ＆化活力有明显的日变化,无论以单位面积计算或以该酶蛋白为基数计算,其总活力和初始活力均呈日出前最低,中午最高,傍晚又下降的单峰曲线。中午Ｐｎ下降期间,Ｐｎ与Ｃｉ有极显著正相关,与ＲＯｂｉｓＣＯ初始活力无相关;而早晚,瞬时人工光照下Ｐｎ与Ｒｕｉｓｃｏ初始活力呈直线正相关,与Ｃｉ呈直线负相关。这表明中午光合下降来自气孔限制,而晚低光合主要由低Ｒｕｂｉｓｃｏ初始活力所致。     

水稻Rubisco小亚基前体cDNA的克隆及其产物向豌豆叶绿体的运输

用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆了完整的水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ小亚基前体ｃＤＮＡ基因,经耦联的体外转录和翻译系统合成了带同位素标记的小亚基前体蛋白,然后与新制备的豌豆完整叶绿体共保温,进行蛋白质的跨膜运输研究显示：异源的水稻Ｒｕｂｉｓｃｏ小亚基前体能穿膜运输入豌豆叶绿体。     

Rubisco的研究进展

Ｒｕｂｉｓｃｏ的研究进展李凤玲（山东省莱阳农学院基础部２６５２００）吴光耀（北京大学生命科学院１００８７１）核酮糖－１,５－二磷酸羧化酶／加氧酶（Ｒｉｂｕｌｏｓｅ１,５－ｂｉｓｐｈｏｐｈａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ－ｏｘｙｇｅｎａｓｅ,缩写为Ｒｕｂｉ...