HHV—6体外感染对外周血单个核细胞IL—6,IL—8的诱生和NK活性的影响

采用生物活性法和／或酶联免疫吸附法和以及乳酸脱氢酶释放法,研究了人类疱疹病毒６型南京地方株ＣＮ８对人体周血单个核细胞的ＩＬ－６,ＩＬ－８的诱生和ＮＫ活性的影响,并与国外的ＧＳ侏作比较。结果发现,ＨＨＶ－６ＣＮ８,ＧＳ两种病毒感染均苛诱导ＰＢＭＣｓ产生ＩＬ－８,４８ｈ达到峰值。     

乙型肝炎病毒(HBV)体内外对单个核细胞白细胞介素-1和白细胞介素-2诱生活性影响的研究

本研究用PAP法、胸腺细胞增殖法、脾细胞增殖法,分别检测16例体外HBV感染的骨髓单个核细胞与16例慢性乙型肝炎患者体内感染的骨髓单个核细胞(MNCs)中的HBcAg和白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)的诱生活性(以△cpm值表示)。结果显示,体外HBV感染组与体内HBV感染组骨髓MNCs中HBcAg检出率分别为50％和43.7％。本实验结果表明,HBV在体外感染骨髓MNCs,且与体内自然感染相符,但光镜下未观察到致细胞病变效应(CPE)。体外感染组与体内感染组IL-I和IL-2活性均较对照组明显下降(P<0.01)。且细胞中HBcAg检出阳性者较阴性者下降更为明显(P<0.01)。IL-1和IL-2诱生活性降低与HBV侵染免疫细胞及其在细胞内复制有密切关系,从而提示,IL-1和IL-2降低可能影响HBV的清除而引起慢性化过程。     

不同镇痛方法对患者IL-6、IL-8、IL-10的影响

目的评价不同镇痛方法对盆腔手术患者血浆中细胞因子变化的影响,并与传统术后镇痛法进行比较,探讨术后充分镇痛对免疫功能的影响。方法根据镇痛方法不同,将60例行子宫切除患者随机分为3组：第1组患者为术后根据临床需要,临时给予哌替啶50mg肌肉注射（Ⅰ组,n=20）;第Ⅱ组患者为罗哌卡因复合芬太尼硬膜外镇痛组（Ⅱ组,n=20）;第Ⅲ组患者为芬太尼静脉镇痛组（Ⅲ组,n=20）;观察麻醉前30min、手术后30min、2h、24h、48h和72h六个时点患者血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-10（IL-10）水平的变化。结果3组患者术后血清IL-6、IL-8、IL-10水平与麻醉前值比较均升高（P〈0．01）,一般在术后24h达峰值。比较血清IL-6、IL-8、IL-10浓度变化,Ⅱ和Ⅲ组抑制这3种细胞因子释放的能力明显强于Ⅰ组（P〈0．05）,与Ⅲ组比较,Ⅱ组更为明显（P〈0．05）。结论硬膜外局麻药复合阿片受体激动药镇痛模式可更有效地降低术后炎性直激反应。     

IL-1，IL-6，IL-8 与胃癌的关系

胃癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率居各类肿瘤前列,导致的死亡人数占所有肿瘤的四分之一,而且每年有近40万新增的胃癌病人,但是其早期诊断率低于20%,胃癌已经成为危害人民健康的最严重的疾病之一。白细胞介素(interleukin,IL)作为在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,不仅在介导T、B细胞活化、增殖与分化以及炎症反应中起着重要作用,近年来,越来越多的学者发现其与肿瘤的发生及发展也有着密不可分的联系。目前为止,已经发现了29种白细胞介素,分别被命名为IL-1~IL-29,它们各自承担着相应的使命。国内外大量实验及文献表明,IL-1,IL-6,IL-8和胃癌有着密切的关系,这对于胃癌的早期诊断及治疗提出了新的思路,进而提高胃癌的早期诊断率,改善胃癌的治疗状况。本文对IL-1,IL-6,IL-8的来源、分子结构及受体方面进行简要概述,同时阐述了其生物学特性及与胃癌的关系。     

乙型肝炎患者外周血T细胞亚群、IL-6及IL-8水平的表达及临床意义

目的:探讨乙型肝炎患者外周血T细胞亚群、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)水平的表达及临床意义。方法:选取2015年1月-2017年12月期间我院收治的乙型肝炎患者240例为研究对象。其中急性乙型肝炎患者55例(急性组),慢性乙型肝炎患者185例,并根据临床症状严重程度分为慢性轻度组65例、慢性中度组61例、慢性重度组59例。将乙型肝炎患者HBV-DNA载量103copy/m L作为HBV-DNA阳性组(n=158),HBV-DNA载量≤103copy/m L作为HBV-DNA阴性组(n=82)。另选取同期于我院行健康体检的志愿者50例为对照组。比较各组研究对象CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-6、IL-8水平,比较HBV-DNA阳性组、HBV-DNA阴性组患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)以及白蛋白(ALB)水平。采用Pearson相关性分析乙型肝炎患者血清IL-6、IL-8与肝功能指标的相关性。结果:急性组、慢性轻度组、慢性中度组、慢性重度组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于对照组,CD8+、IL-6、IL-8均高于对照组(P0.05)。HBV-DNA阳性组与HBV-DNA阴性组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-6、IL-8、ALT、TB以及ALB比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示,乙型肝炎患者血清中IL-6、IL-8均与ALT、TB水平呈正相关,与ALB水平呈负相关(P0.05)。结论:乙型肝炎患者CD3+、CD4+和CD4+/CD8+显著降低,CD8+、IL-6和IL-8显著升高,且血清中IL-6、IL-8水平可反映乙型肝炎患者肝细胞损害程度及病情严重程度。     

人类疱疹病毒7型感染脐血单个核细胞产生TNF-α

用生物活性法,检测人类疱疹病毒7型Glasgow株和南京地方株YY5及HHV-6 GS株感染单个核细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果发现,HHV-7也能较强地诱生TNF-α,但达到峰值时间(3～4 d)迟于HHV-6 GS株(2 d);在感染24 h上清中,GS株产生TNF-α量明显多于YY5株、Glasgow株产生量(P＜0.05),三者与未感染单个核细胞比较都存在显著差异(P＜0.05),但Glasgow株和YY5株之间无差异(P＞0.05).结果表明,HHV-6、HHV-7都能通过刺激单个核细胞产生TNF-α而发挥免疫调节功能.     

多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞Treg、Th17和血清IL-6、IL-10与临床分期以及治疗效果的关系分析

摘要 目的：探讨多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓单个核细胞调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞（Th17）和血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）与临床分期以及治疗效果的关系。方法：选择2016年3月至2020年12月河北医科大学第一医院收治的MM患者60例为研究对象,检测并对比不同Durie-Salmon分期患者的骨髓单个核细胞Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平;患者入院后均给予常规治疗,根据疗效分为有效组和无效组,比较两组治疗前后骨髓单个核细胞Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平;分析Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10与MM患者Durie-Salmon分期、治疗效果的相关性。结果：MM患者骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平III期组高于II期组,II期组高于I期组（P＜0.05）。有效组治疗后骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17水平及血清IL-6、IL-10水平较治疗前明显降低（P＜0.05）;治疗后,骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平无效组高于有效组（P＜0.05）。骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平与MM患者Durie-Salmon分期呈正相关,与治疗效果呈负相关（P＜0.05）;骨髓单个核细胞Th17水平与MM患者的Durie-Salmon分期、治疗效果无明显的相关性（P＞0.05）。结论：骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17水平及血清IL-6、IL-10水平与MM患者肿瘤临床分期、治疗效果密切相关,检测其水平可对MM的临床治疗及预后起到一定评估作用。     

人类疱疹病毒7型感染脐血单个核细胞产生TNF—α

用生物活性法,检测人类疱疹病毒7型Glasgow株和南京地方株YY5及HHV-6GS株感染单个核细胞培养上清中肿瘤坏死因子－α（TNF-α）的水平。结果发现,HHV-7对也能较强地诱生TNF-α,但达到峰值时间（3～4d）迟于HHV-6GS株（2d）;在感染24h上请中,GS株产生TNF-α量明显多于YY5株、Glasgow株产生量（P＜0．05）,三者与未感染单个核细胞比较都存在显著差异（P＜0．05）,但Glasgow珠和YY5株之间无差异（P＞0．05）。结果表明,HHV-6、HHV-7都能通过刺激单个核细胞产生TNF-α而发挥免疫调节功能。     

经皮血管腔内成形术联合自体外周血单个核细胞治疗糖尿病足下肢血管病变的临床研究

目的:探讨经皮血管腔内成形术(PTA)联合自体外周血单个核细胞(PBMNCs)移植治疗糖尿病足下肢血管病变的临床疗效。方法:选取内蒙古医科大学第二附属医院2016年8月至2017年9月期间收治的糖尿病足下肢血管病变患者共120例,按随机数字表法分为3组:对照1组共40例,进行自体PBMNCs移植;对照2组共40例,进行PTA治疗;联合治疗组共40例,在进行PTA治疗的同时于缺血部位注入PBMNCs。观察3组的血管疏通情况,比较治疗前、治疗后1、6、12个月的跛行距离、踝肱指数(ABI),记录3组并发症发生情况。结果:联合治疗组患者的手术成功率为100.00%(40/40),高于对照1组的40.00%(16/40)、对照2组的55.00%(22/40),差异有统计学意义(P0.05)。治疗后1、6、12个月联合治疗组的跛行距离、ABI高于对照1组和对照2组(P0.05)。联合治疗组并发症总发生率为5.00%(2/40),低于对照1组的37.50%(15/40)和对照2组的25.00%(10/40),差异有统计学意义(P0.05)。结论:PTA联合自体PBMNCs移植是一种安全、有效、微创的治疗糖尿病足下肢血管病变的方法,其能够改善患者的血管疏通和病情。     

轮状病毒感染患者外周血单个核细胞的转录组学分析

轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起急性肠胃炎的主要病原体,分析RV感染患者的人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)有利于探讨人PBMC在清除RV中的作用。为此,本研究采集2019年2月-2019年6月长春儿童医院中RV感染患者和健康儿童血液,分离PBMC,通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)技术比较RV感染患者与健康儿童之间的RNA表达图谱,借助基因本体论(Gene Ontology,GO)数据库功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、Reactome通路富集分析DEGs,使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)技术进行验证。结果显示,与健康对照组相比,RV感染轻症患者PBMC中有1619个DEGs;重症患者PBMC中有2816个DEGs,主要与干扰素(Interferon,IFN)反应、中性粒细胞、溶酶体、核小体、染色质等相关。qPCR验证轻症患者干扰素刺激基因(IFN-stimulated genes,ISGs)15表达上调,白介素(Interleukin,IL)1β表达下调;重症患者IL15、ISG15表达上调,IL1β表达下调,与转录组结果相一致。本研究提示,RV感染可能激活人I型和II型IFNs反应抵御病毒感染,但也会抑制溶酶体相关基因,对细胞自噬过程产生影响。     

从病人外周血单个核细胞中检测HHV－6：分离培养和基因扩增

收集婴幼儿急疹及淋巴系统增生性疾病患者外周血单个核细胞进行体外培养,从７例婴幼儿急疹及２例淋巴系统增生性疾病患者中分离出一种病毒,此病毒能在ＰＨＡ激活的人脐血单个核细胞中传代生长,产生典型ＣＰＥ：形成气球样巨细胞。电镜下观察,感染细胞中可见直径１８０ｎｍ左右,有包膜,疱疹样病毒颗粒;血清学试验证明分离株与ＨＳＶ－１,２、ＨＣＭＶ、及ＥＢＶ无抗原交叉,而与ＨＨＶ－６ＧＳ株间存在抗原一致性;多聚酶链反应表明该分离株ＨＨＶ－６特异性ＤＮＡ阳性;综合以上结果,初步认为该分离株为ＨＨＶ－６。同时还用ｐＣＲ法对所收集的标本直接检测ＨＨＶ－６特异性ＤＮＡ。ＰＣＲ法与病毒分离法相比较,前者ＨＨＶ－６检出率为８８．８％（１６／１８）．后者为３８．９％（７／１８）。     

Cytokines Released by Human Peripheral Blood Mononuclear Cells Inhibit the Production of Early and Late Cytomegalovirus Proteins

Cytomegalovirus-infected human fibroblasts are susceptible to lysis by natural killer cells and cytotoxic T cells. The purpose of this study was to determine whether non-lytic mechanisms might also contribute to the control of cytomegalovirus infection. The appearance of cytomegalovirus proteins in infected fibroblasts was determined by flow cytometry. Infected fibroblasts incubated with peripheral blood mononuclear cells for 3 days expressed less early and late proteins than fibroblasts incubated without peripheral blood mononuclear cells. Supernatants generated by the cocultivation of peripheral blood mononuclear cells with cytomegalovirus-infected fibroblasts inhibited the production of cytomegalovirus early and late proteins. The soluble factors in supernatants which contributed to the inhibitory effect were identified as interferons α, β and γ, and tumor necrosis factors α and β. The ability of supernatants to inhibit the production of cytomegalovirus early protein was mimicked by combinations of corresponding recombinant cytokines. The inhibition of cytomegalovirus protein production by cytokines produced by peripheral blood mononuclear cells may contribute to early containment of cytomegalovirus infection.     

人胎脾细胞IL-2和IL-6的产生及其与NK细胞功能发育的关系

人类胚胎发育时期,脾细胞IL-2和IL-6的产生及其与NK细胞功能发育关系的研究结果表明,胚胎20周龄前IL-2的活性和NK活性细胞基本缺乏,但可分泌低水平的IL-6;随个体发育,IL-2、IL-6的产生和NK细胞活性均逐渐增强,三者间呈直线正相关关系(r>0.86);出生前,IL-6的产生和NK细胞活性显著低于成人组(p<0.01),而IL-2的产生巳达成人水平(p>0.05)。最后,对在胚胎发育过程中IL-2和IL-6的产生,及其与NK细胞功能发育间的关系进行了讨论。     

地衣芽孢杆菌对儿童诺如病毒性肠炎患者血清PCT、IL6、IL8水平的影响

目的探讨地衣芽孢杆菌对诺如病毒性肠炎患儿血清前降钙素(PCT)、白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)水平的影响。方法将86例诺如病毒性肠炎患儿随机分为观察组和对照组,各43例。两组患儿均予以蒙脱石散等对症治疗,观察组患儿加用地衣芽孢杆菌活菌胶囊,1粒/次,3次/d,连续治疗7 d。采用免疫荧光法测定患儿血清PCT水平,采用ELISA法测定患儿IL-6和IL-8的水平,观察两组患儿治疗前后PCT、IL-6和IL-8水平的变化。结果治疗后,观察组患儿血清PCT、IL-6和IL-8水平分别为(4.1±1.8)μg/L、(26.5±5.4)ng/L和(33.5±4.9)ng/L,对照组患儿血清PCT、IL-6和IL-8水平分别为(7.2±2.3)μg/L、(51.2±8.3)ng/L和(58.4±9.0)ng/L,与治疗前相比均显著降低,且观察组各指标水平显著优于对照组(t=6.960、16.357、15.934,均P0.001)。结论地衣芽孢杆菌活菌胶囊辅助治疗能显著降低诺如病毒性肠炎患儿血清PCT、IL-6和IL-8水平,抑制炎症反应,值得推广使用。     

伏马菌素B1对人外周血单个核细胞抗原加工相关转运子表达的影响

探讨伏马菌素B1(FB1)对体外培养的人外周血单个核细胞(hPBMC)抗原加工相关转运子(TAP-1)表达的影响。采用流式细胞定量检测(FCM)、免疫印迹(Western印迹)及半定量RT-PCR方法,研究不同浓度FB1(0,10和50μmol/L)处理后人外周血单个核细胞TAP-1在mRNA和蛋白质水平表达的影响。RT-PCR检测结果表明,10和50μmol/L FB1处理24h后,处理组细胞TAP-1mRNA明显低于对照组。在蛋白质水平,FCM定量分析表明,两个处理组细胞表面TAP1的平均荧光强度均较对照组降低,以50μmol/LFB1处理组降低显著(P<0.05)。免疫印迹结果亦表明,FB1处理组TAP-1的表达均较对照组降低。10和50μmol/LFB1可抑制体外培养的hPBMCTAP-1mRNA和蛋白质表达。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人外周血单个核细胞 HLA-I分子表达的影响

研究探讨了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞HLA-I(human leucocyte cyte antigen I)分子表达影响.采用流式细胞术(FCM)和免疫印迹方法研究了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞表面HLA-I分子表达的影响及其量效关系.FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度降低人外周血单个核细胞表面HLA-I分子的表达,DON 50ng/mL、100ng/mL、1000 ng/mL和2000 ng/mL组HLA-I类分子的平均表达量分别为6.92±0.68、6.64±0.69、5.95±0.48和5.48±0.77,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞HLA-I分子表达降低,两者呈显著负相关(r=0.737,P＜0.01).Western印迹结果显示,大剂量DON(1000ng/mL和2000ng/mL)组人外周血单个核细胞HLA-I分子表达明显减弱.研究结果表明脱氧雪腐镰刀菌烯醇可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞HLA-I分子的表达.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇抑制体外培养人外周血单个核细胞低分子量蛋白酶体-2表达

探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞参与抗原呈递的低分子量蛋白酶体-2(LMP-2)表达的影响。采用流式细胞术(FCM)和半定量RT-PCR方法从蛋白质和mRNA水平分析了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞LMP-2分子表达的影响及其量效关系。FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度抑制人外周血单个核细胞LMP-2的表达,50ng/mlDON组、100ng/mlDON组、1000ng/mlDON组和2000ng/mlDON组LMP-2平均荧光强度分别为6.99±0.72、6.21±0.55、5.34±0.56和5.03±0.43,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞LMP-2表达降低,与DON浓度呈显著负相关(r=0.824,P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,不同浓度DON处理均可抑制人外周血单个核细胞LMP-2mRNA表达。DON在蛋白质和mRNA水平可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞LMP-2的表达。     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞活性的影响

本文研究了灵芝多糖（ＧＬＰ）对人脐血ＬＡＫ（ＣＢ—ＬＡＫ）细胞活性的影响,结果发现,单独ＧＬＰ能刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖,但不能诱导ＬＡＫ活性,当与５０ｕ／ｍｌｒＩＬ—２伍用时,可增殖ＣＢ—ＬＡＫ细胞诱导活性,不同剂量ＧＬＰ（０．５—１００μｇ／ｍｌ）影响作用不同,以１０μｇ／ｍｌ浓度最好．在不同浓度ｒＩＬ—２（１０—１００ｕ／ｍｌ）诱导ＣＢ—ＬＡＫ细胞过程中加入ＧＬＰ（１０μｇ／ｍｌ）,可明显提高细胞增殖能力,减少ｒＩＬ—２用量。ＧＬＰ亦能促进效应阶段ＣＢ—ＬＡＫ细胞对Ｒａｊｉ肿瘤靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．００１）。由此看出,ＧＬＰ具有增强ＣＢ—ＬＡＫ细胞活性的作用,是一很好的生物反应调节剂（ＢＲＭ）,有必要进行深入的研究。