合成聚β-羟基丁酸(PHB)鞘细菌的分离、鉴定与筛选

通过富集培养和划线分离等手段从活性污泥中分离筛选到一株合成PHB鞘细菌FQ4 0 ,其生物学特征为 :杆菌 ,大小 (0 .6～ 1.5 ) μm× (1.5～ 5 .5 ) μm ;革兰氏染色阴性 ;具衣鞘 ,丝状体很长 ,偶见假分枝 ;亚端生鞭毛 ;胞内具PHB颗粒 ;菌落为光滑型和丝状型两种。经鉴定该菌株为鞘细菌类球衣菌属中的浮游球衣菌 (Sphaerotilusnatans)。对其合成PHB研究表明 :细胞内可积累大量的PHB颗粒 ,含量可达细胞干重的 30 .5 %。     

高温湿热酸法破壁提取法夫酵母胞内虾青素

法夫酵母是一种能积累虾青素的红酵母, 对其进行破壁是当前虾青素工业化提取生产的瓶颈工艺。研究在高温湿热条件下,低浓度盐酸对法夫酵母破壁而提取其胞内虾青素的工艺。探讨了不同破壁温度、盐酸浓度、液料比与破壁处理时间等因素对法夫酵母破壁后虾青素及类胡萝卜素提取率的影响, 确定了高温湿热酸法破壁提取虾青素的最佳条件为: 饱和蒸汽压力 0.1 MPa (121°C), 盐酸浓度0.5 mol/L, 液料比 (V/W)30 mL/g, 破壁时间2 min。在最佳条件下进行中试放大实验, 可得到虾青素与类胡萝卜素的提取率分别为: (84.8±3.2)%, (93.3±2)%。经优化后的新破壁工艺安全高效, 不会有毒性残留, 具有良好的工业应用前景。     

绣球菌多糖提取方法的比较研究

对绣球菌多糖提取方法做了初步研究,通过热浸、超声、剪切、高压等单一或复合处理方法,摸索出提取的最佳方法：剪切高压法,提取条件为高速剪切乳化机内10 000r/min剪切10min,高压30min后,其提取率达到5.106%。     

利用原生质体技术选育聚β—羟基丁酸高产菌株的研究

从六份城市生活污水样品中,分离筛选出一菌株,具如下主要特征：杆菌,0．85～1．2×2．0～5．0μm;革兰氏染色阴性;具衣鞘,细胞包在鞘里,丝状体很长,但无分枝;亚端生鞭毛;胞内具PHB颗粒和异染颗粒;液化明胶微弱;菌落为光滑型和丝状两种。经鉴定该菌株为浮游球衣细菌（Sphaerotilusnatans）。该菌在28℃条件下生长良好,细菌细胞大,PHB颗粒很大,有的可以充满整个细胞。经培养的菌种于培养液中在室温下保存近一年,方法简便效果好。     

利用原生质体技术选育聚β-羟基丁酸高产菌株的研究*

从六份城市生活污水样品中,分离筛选出一菌株,具如下主要特征：杆菌,0．85～1．2×2．0～5．0μm;革兰氏染色阴性;具衣鞘,细胞包在鞘里,丝状体很长,但无分枝;亚端生鞭毛;胞内具PHB颗粒和异染颗粒;液化明胶微弱;菌落为光滑型和丝状两种。经鉴定该菌株为浮游球衣细菌（Sphaerotilusnatans）。该菌在28℃条件下生长良好,细菌细胞大,PHB颗粒很大,有的可以充满整个细胞。经培养的菌种于培养液中在室温下保存近一年,方法简便效果好。     

银杏外种皮生物活性物质联合提取工艺研究

分别以石油醚、80%乙醇、水为溶剂,依次对银杏外种皮中的银杏酸、黄酮以及多糖进行了联合提取研究。结果表明:常温条件下银杏外种皮经高速剪切破壁,石油醚提取银杏酸40 min,2次累计提取率可达98.5%,银杏酸含量可达54.6%,经硅胶柱纯化后纯度可达到97.5%;残渣用80%乙醇提取黄酮60 min,固液比1∶15,1次提取率可达94.6%,其中总黄酮含量为7.5%,经水沉、大孔树脂纯化,黄酮苷含量为24.4%;最后以水为溶剂,90℃下回流提取剩余残渣120 min,固液比为1∶10,多糖2次累计提取率可达72.7%,含量为24.3%,除去蛋白纯化后纯度可达64%。     

利用基因工程菌VG1(pTU14)产聚β-羟基丁酸酯的研究

本文对透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)和λ噬菌体裂解基因 (S RRz)在不同宿主大肠杆菌中的外源表达及其在聚β 羟基丁酸酯 (PHB)生产中的应用进行了研究。实验结果表明 ,同时携带vgb、S RRz和 phbCAB三种基因的产PHB基因工程菌VG1 ( pTU1 4) ,经过 82h的摇瓶补料分批培养 ,菌体浓度可以高达 2 5 9g/L ,PHB百分含量则可在 52h时达到 95%以上 ;此外 ,该菌株不仅可以实现摇瓶高密度发酵培养和PHB产品的大量积累 ,还可以同时实现菌体细胞的可诱导裂解破壁 ,因此是一株具有潜在工业应用价值的多功能PHB生产菌株。     

利用原生质体技术选育聚β—羟基丁酸高产菌株的研究初报

从城市生活污水中分离筛选到1株浮游球衣细菌（Sphaerotilus natans)。以浮游球细菌G-8菌为出发菌株,采用甘氨酸-溶菌酶-EDTA方法,研究了各种因素对原生质体形成和再生的影响。在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,G-8菌原生质体形成率和再生率分别达96.8%和29.8%。该菌株能在自然pH(pH6-7)和29℃条件下良好生长,细胞可大量积累聚β-羟基丁酸（PHB）,从对数期到稳定期,该菌积累的PHB量可达68g/L。     

胶红酵母虾青素纯品提取及分离纯化方法优化

以胶红酵母ZTHY2作为提取虾青素的出发菌株,通过对其破壁方法、浸提溶剂、皂化方法及提取条件的优化,筛选出胶红酵母虾青素纯品的提取方法。用酸热法、冻融超声波裂解法与二甲基亚砜无水乙醇法等法处理干菌体细胞,用KOH结合甲醇A、甲醇B与乙醇法分别对虾青素粗提液进行皂化处理,分别使用六种展开剂,通过薄层层析鉴定游离的虾青素,用200~300目硅胶对游离的虾青素进行柱层析,获得其纯品,最后用高效液相色谱仪测定虾青素纯品的含量。实验结果表明:胶红酵母ZTHY2干菌体细胞的最佳破壁方法是酸热法,浸提溶剂为乙酸乙酯+乙醇(2∶1)溶液,皂化液为20 g/L KOH的乙醇溶液,皂化条件是40℃、30 min;最佳展开剂和淋洗剂是正己烷+丙酮(5∶2)溶液;高效液相色谱仪测定的游离虾青素比率为35%,提取率为96. 8%。     

从球衣细菌中分离提取PHB的研究

球衣细菌发酵56h,PHB含量可占菌体干重的26％,而且营养要求简单,具有潜在的应用价值。本文在球衣细菌的纯培养,生理生化特性、最适生长条件和PHB的提取方面做了初步的研究。