棉铃虫的谷胱甘肽S—转移酶(GSTs)：杀虫药剂和植物次生性物质的诱导与GSTs对杀虫药剂的代谢

棉铃虫Helicoverpa armigera(Hubner)中肠谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)对甲基对硫磷和灭多威的代谢能力明显高于对马来酸二乙酯(DEM)和两个混剂。LD₅剂量的对硫磷和灭多威对棉铃虫3龄幼虫GSTs的活性均没有诱导增加的影响,用LD₅₀的选择剂量仅对硫磷组GSTs活性增加15%。用含0.01%的芸香苷、2-十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经1～4代后,GSTs活性提高4～18倍。3种植物次生性物质诱导组对灭多威和溴氰菊酯的敏感度均没有明显的变化,而槲皮素组对甲基对硫磷的敏感度则降低近一半,芸香苷和2-十三烷酮组对甲基对硫磷的敏感度略有降低。这种对甲基对硫磷敏感度的变化可能与上述GSTs活性的变化有关。     

植物次生物质诱导作用对杀虫药剂毒力影响研究

通过培养基混药法测定了芸香甙、槲皮素和2—十三烷酮三种植物次生物质的诱导作力的影响。芸香甙的诱导作用提高了棉铃虫对甲基对硫磷和灭多威的耐药性,而对溴氰菊酯毒力的影响则随诱导时间的不同而异;槲皮素的诱导作用提高了棉铃虫F₂代对灭多威的毒力,槲皮素的诱导作用对溴氰菊酯的毒力无影响;2—十三烷酮的诱导作用提高了棉铃虫对溴氰菊酯的耐药性,提高F₁代对灭多威的敏感度,而对甲基对硫磷的毒力影响不大。     

邯郸地区棉铃虫抗药性的一些生物化学特性(英文)

对河北邯郸地区的抗性棉铃虫(Helicovrpa armigera H(?)bner)种群不同发育阶段乙酰胆碱酯酶(AChE)对灭多威和对氧磷的敏感磷的敏感度结果表明:4-5龄幼虫的AChE在棉铃虫整个发育期中敏感度是最低的,成虫期的AChE最敏感,蛹期AChE平均敏感度低于幼虫期。用甲基对硫磷和灭多威以LD_5的诱导剂量和LD_(50)的选择剂量处理棉铃虫幼虫后,AChE对底物的亲和力和对抑制剂的敏感度发生了明显的变化,水解β-乙酸萘酯的羧酸酯酶对底物的亲和力明显提高,而水解α-乙酸萘酯的羧酸酯酶对底物的亲和力在处理后24小时无明显改变。谷胱甘肽-S-转移酶活性,低剂量诱导组最高降低至78％和43％,而高剂量选择组提高15％,诱导组和选择组对底物的亲和力均明显降低,处理的剂量和处理后时间明显地影响棉铃虫磷酸酯酶的活性及其对底物的亲和力。     

杀虫药剂和植物次生性物质对棉铃虫羧酸酯酶的诱导作用

棉铃虫Helzcoverpa armigera中肠羧酸酯酶(CarEs)比活力随幼虫发育阶段呈有规律的变化。5日龄以前CarEs比活力增长比较缓慢,5日龄以后Cares比活力快速增长,8日龄开始CarEs比活力下降,直到预蛹期,CarEs比活力又开始上升。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离到的9条同功酶带中,E2、E4、E5、E6、E7和E9对β-乙酸萘酯(β-NA)的水解活性高于对a—乙酸萘酯(a-NA),E1、E3、和E8对上述两种底物的水解活性正好相反,对a-NA活性高于对β-NA。低剂量的对硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、增效磷(SVl)、灭多威和溴氰菊酯对棉铃虫中肠CarEs比活力和对底物的亲和力具有明显的影响。药剂处理后48 h,Cares的比活力明显降低,对底物的亲和力则与药剂的种类有关。马拉硫磷处理后48h,在观察到的6条主要同功酶带中,E3的活性明显降低,其次是E6、E2和E1;而E5的活性则明显升高,斟的活性也有所升高。用含0.01%的芸香苷、2-十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经2代或7代后,CarEs比活力均明显升高。     

单宁酸对棉铃虫谷胱甘肽S转移酶的影响

通过培养基混药法,研究了植物次生物质单宁酸对棉铃虫Helicoverpa armigera（Hübner）谷胱甘肽S-转移酶活性的影响。谷胱甘肽S-转移酶活性随棉铃虫发育期的进程而变化,在卵期最低,5龄、6龄幼虫和成虫期最高。用含0.005%单宁酸的饲料饲喂棉铃虫后,5龄和6龄幼虫的谷胱甘肽S-转移酶活性明显降低,分别为对照的59%和67%。单宁酸低剂量、短时间处理棉铃虫幼虫,可诱导中肠和脂肪体中的谷胱甘肽S-转移酶的活性增加,高剂量或低剂量长时间处理没有诱导增加作用,甚至还有抑制作用。单宁酸连续处理4代,对棉铃虫6龄幼虫中肠谷胱甘肽S 转移酶均有抑制作用,对脂肪体谷胱甘肽S-转移酶活性无明显影响或有抑制作用。单宁酸处理的第4代幼虫对溴氰菊酯的敏感度有增加的趋势,对甲基对硫磷的敏感度没有明显改变。     

抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫毒力的影响及对乙酰胆碱酯酶的诱导作用

辛硫磷、马拉硫磷和灭多威3种抗胆碱酯酶剂亚致死剂量（LD10）预处理棉铃虫Helicoverpa armigera 3龄幼虫24 h后,对辛硫磷、马拉硫磷、灭多威、溴氰菊酯和高效氯氰菊酯5种杀虫药剂的毒力影响有明显差异。酶动力学研究表明：在48 h内,辛硫磷亚致死剂量对棉铃虫乙酰胆碱酯酶比活力有一定的抑制作用,24 h仅为对照组的0.56倍;马拉硫磷、灭多威则可以诱导乙酰胆碱酯酶的比活力增加,诱导最大值时间分别为3 h和12 h。通过对米氏常数（K_m）值分析表明,辛硫磷诱导48 h内对乙酰胆碱酯酶与底物亲和力的影响不大,马拉硫磷、灭多威诱导48 h内乙酰胆碱酯酶对底物亲和力有所下降,其中灭多威诱导组最为明显。3种药剂亚致死剂量处理24 h后,通过蔗糖密度梯度离心表明5%蔗糖梯度层乙酰胆碱酯酶分布百分数明显高于对照组,而20%蔗糖梯度层却明显低于对照组,说明亚致死剂量处理可能引起乙酰胆碱酯酶分子型及不同分子型分布比例的变化。     

植物次生代谢物对甜菜夜蛾生长发育及解毒酶的影响

【目的】明确植物次生代谢物对甜菜夜蛾Spodoptera exigua生长发育及解毒酶的影响,探索利用植物次生物质防控甜菜夜蛾的潜在途径。【方法】本研究选用3种含量（0.01%、0.1%和1.0%）的槲皮素、山奈酚和香豆素,分别与人工饲料混合均匀后饲养甜菜夜蛾3龄初幼虫,观察植物次生代谢物对幼虫生长发育的影响;并测定幼虫取食添加0.1%的槲皮素、山奈酚和香豆素的人工饲料24、48和72 h后,幼虫羧酸酯酶（Caboxylesterase,CarE）、谷胱甘肽-S-转移酶（Glutathione-S-transferase,GSTs）和P450解毒酶活性。【结果】添加不同次生物质的人工饲料显著影响甜菜夜蛾幼虫生长和解毒酶活性。与对照组相比,3种次生代谢物均显著提高了幼虫死亡率。幼虫取食添加1%槲皮素的人工饲料后,蛹重显著降低,发育历期明显延长。而取食添加0.1%山奈酚的人工饲料后,可诱导幼虫CarE活性显著增强,0.1%槲皮素和0.1%香豆素对幼虫CarE活性均有显著抑制作用。添加槲皮素对幼虫GSTs活性无显著性影响,添加0.1%山奈酚和0.1%香豆素可诱导幼虫GSTs活性显著升高。0.1%槲皮素和0.1%香豆素可促进幼虫P450活性增强但未达到显著水平,但0.1%山奈酚处理48h后,幼虫P450活性显著降低。【结论】植物次生代谢物种类与含量对甜菜夜蛾生长发育及解毒酶活性存在不同程度的影响。     

对防治棉铃虫常用药剂的应用研究

目前棉铃虫的防治仍以化学防治为主,如何选择好对口药剂并科学使用,是控制棉铃虫的关键。为了对防治棉铃虫常用药剂的药效有较全面了解,以便更合理地使用,我们进行了以下试验,现将结果报道如下。工材料和方法1．1材料供试药剂20％灭多威（济宁化工实验厂）;50％甲胺磷（安徽宁国农药化工厂）;20％杀灭菊酯（上海中西药厂）;35％硫丹（德国赫斯特公司）;40％久效磷（青岛农药厂）;5O％甲基对硫磷（宁阳农药厂）;50％辛硫磷（临沂农药厂）;75％拉维因（法国罗纳普朗克公司）;40％丙溴磷（招远第一化工厂）;50％水胺硫磷（青岛第…     

棉铃虫抗药性监测方法——浸叶法敏感毒力基线的建立及其应用

通过室内饲养的2个棉铃虫敏感品系,用浸叶法建立了11种常用药剂 (氯氰菊酯、溴氰菊酯、功夫菊酯、氰戊菊酯、久效磷、辛硫磷、甲基对硫磷、毒死蜱、灭多威、硫双灭多威、硫丹) 的敏感毒力基线,确定了它们的LC₅₀值和区分剂量。并用浸叶法监测了江苏、山东、河南、安徽4省棉田2代棉铃虫对氯氰菊酯、久效磷、灭多威和辛硫磷的抗性,结果表明用区分剂量监测抗性个体频率既快速简便,又适宜于进行早期抗性检测,因此这4种药剂的区分剂量可以推广应用于棉铃虫田间抗药性监测。     

植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾谷胱甘肽S-转移酶的抑制作用

本论文采用分光光度计法研究了植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾Closteraanastomosis(L.)谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的体外抑制作用。结果表明各植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾GSTs活性的体外抑制作用存在差异。当植物次生物质和杀虫剂终浓度为8.34×10-5mol/L时,槲皮素和单宁酸对分月扇舟蛾GSTs活性抑制作用最强,分别为64.41%和58.61%;三唑磷、毒死蜱、辛硫磷、氟铃脲、氟虫腈和哒螨灵都有较强的抑制作用,对GSTs活性抑制率超过20%;氧化乐果、水胺硫磷、丙溴磷、马拉硫磷、灭多威、联苯菊酯、高效氯氰菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡虫啉和啶虫脒对分月扇舟蛾GSTs有中等抑制作用;其他杀虫剂对分月扇舟蛾GSTs有较弱(或没有)抑制作用。此外,在一定的浓度范围内,槲皮素、单宁酸和辛硫磷对分月扇舟蛾GSTs活性的抑制作用存在明显的剂量效应关系。槲皮素、单宁酸和辛硫磷对分月扇舟蛾GSTs的抑制中浓度分别为2.19×10-5,2.62×10-5,1.49×10-4mol/L。因此,此研究明确了槲皮素和单宁酸作为防治分月扇舟蛾的新型防治剂或增效剂具有很好的潜力。     

棉铃虫对氰戊菊酯等杀虫剂抗性的选育及其生化机理

从用药水平低的棉田采集棉铃虫Helicover pa armigera(Hubner),在室内恒温条件下以人工饲料饲养,用氰戊菊酯等4种杀虫剂和1种混合剂经点滴法分别逐代处理棉铃虫幼虫,以选育其抗药性。用氰戊菊酯选择15代,抗性达311倍;而用灭多威、甲基对硫磷和辛硫磷分别选择13代、14代及13代,抗性仅分别达10.8倍、3.5倍及5.2倍,抗性发展较慢;甲基对硫磷与辛硫磷的混合剂选择12代,抗性也只有4.8倍。氰戊菊酯和溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯间存在明显的交互抗性。用生测法测定酶抑制剂和生化法测定酶活性的结果表明,棉铃虫对氰戊菊酯的抗性主要与幼虫体内多功能氧化酶和羧酸酯酶的活性提高有关。     

BIOCHEMICAL ASPECTS OF INSECTICIDE RESISTANCE IN COTTON BOLLWORM FROM HANDAN OF HEBEI PROVINCE*

Abstract The cotton bollworms, Helicoverpa armigera Hübner, collected from Handan of Hebei Province, have evolved high resistance to pyrethroid, organophosphate and carbamate insecticides, The sensitivity of acetylcholinesterase (AChEs) to paraoxon and methomyl varied with the development stages of the cotton bollworm. After the treatments with LD₅ and LD₅₀ of parathion and methomyl to the cotton bollworms, the affinity of AChE to acetylthiocholine (ATCh) and acetyl-β-bmethyl-thio choline (MeTCh) increased significantly except the treatment of parathion using LD₅₀ dosage while the sensitivity of AChEs to paraoxon significantly decreased. The sensitivity of AChEs to methomyl strongly increased in the treatment of parathion using LD₅₀ dosages while strongly decreased in other treatments. The affinity of carboxylesterase to β-naphthyl acetate (β-NA) was higher in groups of treatment with insecticides than in group of control. The glutathione-s-transferase (GST) activity significantly decreased in the induced groups using LD₅ dosages, while increased in the selection groups using LD₅₀ dosages. The effects of parathion and methomyl on the phosphatases of cotton bollworm were related to the dosages of application and the time after treatment and the effect on the alkaline phosphatase was stronger than on acid phosphatase.     

THE EFFECT OF BODY WEIGHT ON THE RESISTANCE TO INSECTICIDES OF THE LAST-INSTAR LARVA OF DIATARAXIA OLERACEA L., THE TOMATO MOTH

At a constant temperature of 24° C. the final larval instar of Diataraxia oleracea lasts about 10 days, during which its resistance to DDT and γ-BHC as contact insecticides progressively increases up to the 5th or 6th day. It then suddenly decreases, this coinciding with cessation of feeding and the beginning of prepupal formation.
Between the 2nd and the 6th days the gross body weight of the last-instar larva increases from about 0.27 to 0.65g. Under the conditions of the experiments, the LD50 of parathion, as a stomach poison, was linearly related to body weight; on the same basis TEPP was slightly less, and lead arsenate, slightly more, toxic to the larger than to the smaller larvae. However, DDT as a stomach or contact insecticide, and γ-BHC as a stomach poison were notably less toxic to the larger larvae. For example, the increase in LD50 for an increase in larval body weight of × 2 was about × 11 for DDT as a stomach poison and about × 12 as a contact insecticide.
The order of effectiveness of the above insecticides as stomach poisons for the last-instar larva of D. oleracea was parathion > DDT > γ-BHC > TEPP = lead arsenate. Zinc fluoarsenate and rotenone were relatively non-toxic. Larvae of D. oleracea were repelled by food leaf treated with an extract of natural pyrethrins.     

营养和幼期密度对棉铃虫飞翔能力的影响

采自棉花、玉米、花生、绿豆和芝麻5种作物上的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hubner),其飞翔能力依次为：棉花和玉米>花生>绿豆和芝麻。对室内利用人工饲料、棉铃、棉蕾和棉叶饲养的棉铃虫吊飞表明,取食人工饲料和棉铃的个体的飞翔能力数倍于取食棉叶者。成虫体重越大,飞翔能力越强。获得补充营养个体的飞翔距离是无补充营养者的2倍左右。本试验还研究了食物质量对棉铃虫卵巢发育的影响,结果显示成虫期的补充营养明显影响幼期营养较差个体的卵巢发育进程。对不同幼虫密度下发育个体的吊飞则表明成虫的飞翔能力和幼期密度关系不大。鉴于较差的营养条件和较高的幼期密度并不导致成虫飞翔能力的增加,本文认为,棉铃虫的远距离运动是成虫对羽化阶段不良环境的行为反应。     

铃虫对氰戊菊酯抗性和敏感品系的选育

用氰戊菊酯对来自阳谷的棉铃虫（ＹＧ）Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ（Ｈｕｂｎｅｒ）进行抗性品系的筛选。在１５代期间经过９代的室内选育,获得抗性品系（Ｆｅｎ－Ｒ）,抗性倍数高达２４６３倍,筛选后Ｆ１,代ＬＤ５０值（２４．１４１２ｇ／头）比筛选前Ｆ１代ＬＤ５０值（０．２０２０　ｇ／头）提高了１１９．５倍。对来自偃师的棉铃虫（ＹＳ）进行了连续两代单对筛选,得到敏感品系（Ｆｅｎ－Ｓ）,敏感品系的ＬＤ５０值为０．０１１６ｇ／头,接近１９８３年东台敏感品系的ＬＤ５０值（０．００９８ｇ／头）。Ｆｅｎ－Ｒ抗性品系筛选前后分别测定了七种杀虫剂的剂量－死亡回归线,发现Ｆｅｎ－Ｒ抗性品系对溴氰菊酯［ＬＤ５０（Ｆｅｎ－Ｒ）ＬＤ５０（ＹＧ）＝５．２Ｘ］和氯氰菊酯（２．５Ｘ）具有一定程度的交互抗性;而对功夫菊酯（０．６６Ｘ）,氯菊酯（０．８７Ｘ）、灭多威（０．７４Ｘ）及久效磷（１．５Ｘ）没有交互抗性。氰戊菊酯加Ｐｂ的增效试验结果表明棉铃虫对氰戊菊酯的抗性主要是由于多功能氧化酶的代谢作用。毒理学资料还暗示抗性为多因子（基因）的。     

酶标板法监测棉蚜乙酰胆碱酯酶对杀虫剂的不敏感性

用酶标板法测定了不同浓度有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂在反应不同时间内对棉蚜Aphis gossypii乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制作用。结果表明有机磷杀虫剂甲基1605,辛硫磷,久效磷,氧乐果和乙酰甲胺磷对棉蚜AChE均无明显的抑制作用。当用0.01 mol/L灭多威与酶及底物反应1 h对北京棉蚜(敏感)种群AChE的抑制率可达82.4%,与反应2 h 89.4%仅差7%。因此以0.01 mol/L灭多威反应1 h测定棉蚜AChE对它的敏感性是合理的。通过测定北京地区寄主为鼠李和棉花以及山东高密寄主为棉花的棉蚜种群中个体AChE活性的分布和灭多威对其抑制的分布,表明3个棉蚜种群中AChE个体频率的分布差异不大,而灭多威对三个种群个体AChE的抑制率小于30%的个体分别为2.4%、16%和29%。抑制率大于70%的个体分别为72%、33%和1%,与生物测定结果一致。因此,用酶标板法测定棉蚜个体AChE对氨基甲酸酯的不敏感性频率可作为棉蚜对氨基甲酸酯抗性的监测技术,为棉蚜化学防治提供依据。