模拟消化环境对益生菌制剂的影响

目的 :研究胃液及肠液的变化对益生菌制剂中活菌数量的影响 ,向服用者建议合理而有效的服用方式。方法 :采用四种益生菌制剂 ,溶于不同 p H值的人工胃液和人工肠液中 ,不同的时间后进行活菌计数。结果 :四种益生菌制剂在高 p H值胃液 ,短时间作用后的存活菌数均显著高于其他组中的存活菌数 (P<0 .0 5 )。在人工肠液中经过不同时间的作用后 ,在较短时间点检测到的存活菌数明显高于在较长时间点检测到的存活菌数 (P<0 .0 5 )。结论 :建议服用者在进餐的过程中 ,服用益生菌制剂。     

伯顿毕赤酵母菌在酸性及胆盐环境的抗逆性研究

目的探究伯顿毕赤酵母菌在酸性及胆盐环境下的益生特性,为研制益生菌制剂提供理论依据。方法采用稀释平板计数法,在pH 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0和胆盐浓度0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的PDA液体培养基以及人工胃液作用0、2、4h,人工肠液作用0、2、4、6、8、10h环境下,分别测定伯顿毕赤酵母菌的活菌数。结果耐酸实验中,各酸性实验组活菌数与对照组比较均下降明显(P0.01),酸度越高,活菌数越少;耐胆盐实验中,胆盐浓度越高,活菌含量越少,其中0.2%、0.3%和0.4%的胆盐浓度与对照组比较活菌数下降明显(P0.01);人工胃液实验中,经过pH 1.5人工胃液处理4h,菌株存活率达42.78%,而经过pH 2.5和3.5的人工胃液处理4h,存活率分别为138.17%和182.90%;人工肠液实验中,随着处理时间的延长,活菌数也增加,且不同时间段的活菌数差异有统计学意义(P0.05)。结论伯顿毕赤酵母菌能够在极高的酸性和较高的胆盐环境以及人工胃肠液环境中存活和定植,符合制备益生菌制剂的条件。     

栀子豉汤所含优势益生菌群的研究

目的考察不同煎煮方法及人工胃液、肠液对栀子豉汤所含优势菌群的影响,基于芽胞杆菌的整肠作用探讨栀子豉汤的作用机制。方法采用先煎栀子再煎淡豆豉(方法一)及两药同时煎煮(方法二)得到不同的栀子豉汤溶液,在营养琼脂培养基上培养及菌落计数,通过Biolog自动微生物鉴定系统对分离菌株进行鉴定,并考察人工胃液、肠液对栀子豉汤所含优势菌群数量的影响。结果方法一制备的栀子豉汤所含优势菌数量更多,为(2.55±0.02)×10~5 CFU/mL,以枯草芽胞杆菌为主;栀子豉汤经人工胃液、人工肠液作用后,优势菌又大量繁殖。结论栀子豉汤可能通过其所含益生芽胞杆菌的整肠作用而发挥药效。     

辣根过氧化物酶同功酶C3基因在毕赤酵母中的表达

目的：克隆与表达辣根过氧化物酶同功酶C3（HRPC3）基因。方法：用PCR方法从辣根的总DNA中,扩增得到一种辣根过氧化物酶同功酶C3基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,再将目的基因正确插入到巴斯德毕赤酶母表达载体pPIC9K中,含有目的基因的重组pPIC9K质粒在毕赤酶母中进行表达与分析。结果：应用毕赤酶母作为受体菌,成功表达了HRPC3基因,其活性为56IU/L。结论：毕赤酶母直接表达出了具有生物活性的辣根过氧化物酶同功酶C3。     

模拟人体胃肠道环境筛选益生乳杆菌

【目的】筛选具有益生特性的乳杆菌作为保健型酸奶的候选菌株。【方法】从健康人肠道和奶豆腐中分离筛选出耐受人工胃液的乳杆菌,对其进行体外益生特性(人工胃肠液耐受性、胆盐耐受性、抑菌活性及胆固醇降解能力)研究。【结果】从在乳杆菌分离培养基上有溶钙圈的41株菌株中筛选出5株耐酸、耐人工胃液较强的菌株,经16S rR NA基因测序鉴定,其中3株为乳杆菌,分别命名为植物乳杆菌Lp MT-3、植物乳杆菌Lp MT-5和唾液乳杆菌LsA F-7。在人工胃液中3株菌的耐受力均强于商品化的对照菌株LGG(鼠李糖乳杆菌GG);转入肠液4 h后直至26 h,Lp MT-5存活率基本稳定在45%左右,仅次于LGG。胆盐浓度为0.10%时,3株乳杆菌的耐胆盐能力均强于LGG;胆盐浓度为0.20%时,Lp MT-3和LsA F-7仍能存活。3株乳杆菌均具有抑菌活性,对粪肠球菌的抑制最明显,其次是金黄色葡萄球菌,对大肠杆菌、沙门氏菌的抑制作用较差。3株乳杆菌对胆固醇的清除效力依次为Lp MT-3LpM T-5Ls AF-7;清除率依次为Ls AF-7Lp MT-3LpM T-5。【结论】筛选出3株适应人体胃肠液环境、耐胆盐、抑菌及降胆固醇活力强的乳杆菌,可作为进一步开发新的益生菌产品和保健型酸奶的菌株。     

耐酸鼠李糖乳杆菌的驯化筛选研究

目的通过驯化以及筛选,得到能够耐酸的鼠李糖乳杆菌菌株。方法将鼠李糖乳杆菌三级发酵菌液接入人工胃液中驯化,获得耐酸菌株。经连续6次驯化筛选,以及人工肠液耐受性实验。结果鼠李糖乳杆菌GD0029在人工胃液中的存活率可达42.93%,比驯化前提高了2.7倍,其对人工肠液也具有较好的耐受性。结论筛选得到的鼠李糖乳杆菌菌株具有很高的应用价值。     

中性辣根过氧化物酶制法新进展

中性辣根过氧化物酶制法新进展季钟煜,费锦鑫（上海普洛麦格生物产品有限公司,上海２００２３３）关键词中性辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是生物检测中用得非常多的工具酶,其应用和经济价值都很大。因此,制备ＨＲＰ的技术和方法也是相关行业的一个重要研究...     

辣根过氧化物酶产品的测定

辣根过氧化物酶产品的测定季钟煜,陈佩颖（上海普洛麦格生物产品有限公司,上海２００２３３）关键词辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）,邻苯三酚辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是从辣根植物块根中提取制造的。它的实用价值很高,在临床检验上用作为酶指示剂和酶标记,藉以检验体液和...     

几株饲用益生菌对体外模拟胃肠道环境的抗逆性评估

目的研究几株益生菌胃肠道环境下的抗逆能力。方法体外模拟正常猪的胃肠道环境,配制人工肠液和人工胃液,将实验室几株饲用益生菌在人工胃液和人工肠液中分别作用4、6 h,每2 h测一次活菌量。结果实验菌株对模拟胃液的耐受性都较强;除乳酸菌A外,其他菌株对模拟肠液的耐受性也较强。结论除乳酸菌A外的几株实验菌种作为饲用益生菌在抵御猪胃肠道的不良环境方面有很大优势。     

两种荧光探针标记鹿茸提取物的稳定性和生物活性比较研究

比较两种荧光探针异硫氰酸荧光素FITC和Cy5标记鹿茸提取物PAEs的最佳方法。用FITC和Cy5分别标记PAEs得到标记物FITC-PAEs和Cy5-PAEs;用SDS-PAGE凝胶电泳检测并比较两种荧光染料标记蛋白分子量的差异;用酶标仪检测在特定波长处OD值计算其标记率;用PC12细胞验证两种荧光染料的生物安全性;将荧光标记物分别与人工胃液和人工肠液共孵育,观察它们在其中的稳定性。结果表明,两种荧光染料标记PAEs蛋白分子量并无明显差异,但FITC-PAEs荧光强度稍强。通过计算标记率表明两种荧光染料均可充分标记PAEs,但Cy5价格昂贵。相比于FITC-PAEs,Cy5-PAEs在人工胃液和人工肠液中稳定性较差。因此,我们选择标记率高,在人工胃液和人工肠液中较为稳定且对机体无毒副作用,价格合理的FITC荧光染料标记PAEs并用于后续实验研究。这为建立蛋白类中药大分子的活性示踪方法,开发口服蛋白类药物奠定基础。     

Determination of stoichiometry of radioiodination of proteins

A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid.