不同采收期宁夏枸杞叶中总黄酮含量的比较

宁夏枸杞（Lycium barbarum L．）的果实为常用的传统中药,其有效成分主要为黄酮类化合物。研究发现,黄酮类成分具有止咳、平喘、祛痰之功效,并能扩张冠状动脉及降低血胆固醇,有增强心脏收缩、减少心脏搏动数及明显的抗氧化等作用。有研究表明,枸杞干叶中黄酮含量高于枸杞干果。因而,作者对不同采收时期青海产宁夏枸杞叶中总黄酮含量进行了测定和比较,以期为扩大黄酮类成分的药源及确定枸杞叶的最佳采收期提供一定的参考依据。     

“荧光猪崽”又添两头

宁夏科技攻关计划项目“宁夏特色天然药物的深度研究及开发”，日前通过了宁夏科技厅组织的专家验收，该研究从枸杞中获得了具有抗癌功效的物质。该研究将国际天然药物研究开发领域的先进技术和理念用于宁夏特色中药枸杞的深度研究开发，通过有效活性成分和药理活性的筛选，从枸杞中发现了具有药理活性的芦丁和绿原酸，     

宁夏不同地域枸杞多糖和总糖含量与土壤环境因子关系的研究

通过对宁夏4个主要枸杞产区土壤理化冈子及枸杞果实主要成分枸杞多糖和总糖含垃进行分析,研究不同土壤理化因子对枸杞有效成分枸杞多糖和总糖含量的影响。结果表明：宁夏4个主产区枸杞多糖累积与肥力因子间尤显著相关性,而总糖含量与肥力因子间呈负相关,其中与速效氮呈显著负相关,与速效磷呈极显著负相关。宁复枸杞果实内多糖和总糖含量与土壤盐分呈正相关。宁夏4个主要产区枸杞多糖含量差异不显著,但枸杞总糖含量差异显著,其中新产区惠农和同心总糖含量比老产区中宁、园林场含量高。     

基于转录组测序的宁夏枸杞不同品种果实活性成分合成差异表达基因分析

为探究不同品种宁夏枸杞果实活性成分生物合成相关基因的表达水平,筛选关键差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),揭示宁夏枸杞品种间活性成分含量差异的分子机制,本研究采用Illumina NovaSeq 6000高通量测序技术,对宁夏枸杞‘宁杞1号’和‘宁杞7号’青果期、转色期及成熟期果实进行转录组测序,比较2个品种果实不同发育期相关基因表达谱的变化。结果显示:转录组测序共获得811818178条clean reads,有121.76 Gb有效数据。‘宁杞1号’和‘宁杞7号’在青果期、转色期和成熟期差异表达基因分别有2827、2552和2311个;分别有2153、2050和1825个差异基因在基因本体论(gene ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析和同源蛋白簇(clusters of orthologous groups of proteins,KOG)分析等6个数据库中被成功注释。青果期、转色期和成熟期果实的差异表达基因,在GO数据库分别有1307、865和624个被富集到生物学过程、细胞组分及分子功能3个部分中;KEGG通路富集结果均集中在代谢途径、次生代谢物生物合成和植物-病原互作过程;在KOG数据库,3个发育期分别注释了1775、1751和1541个差异表达基因。对注释的基因进行PubMed数据库检索,在青果期、转色期和成熟期分别筛选到与枸杞活性成分合成相关的差异表达基因18、26和24个,这些基因主要参与类胡萝卜素、类黄酮、萜类、生物碱和维生素等代谢途径。选取7个差异表达基因进行RT-qPCR验证,结果与转录组测序数据表达趋势一致。本研究从转录水平为不同品种宁夏枸杞活性成分含量差异提供了初步证据,为进一步挖掘枸杞活性成分生物合成的关键基因及解析其表达调控机制提供了研究基础。     

青海产三种特色果实多糖及其活性比较

用水提醇沉法提取了青海产宁夏枸杞、黑枸杞、西伯利亚白刺三种特色果实的水溶性总多糖,利用理化方法测定并比较了三种多糖的理化性质及其抗氧化活性和对腹腔巨噬细胞NO分泌功能的影响。三种植物多糖分子量范围为130000~2350000;单糖组成都含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖,但半乳糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖的相对含量差异明显;三者的糖醛酸含量及蛋白质含量也有明显差异。活性测定结果表明,西伯利亚白刺多糖具有明显的DPPH清除能力,其IC50值达到0.19 mg/m L,表现出较强的抗氧化活性,而黑枸杞与宁夏枸杞多糖的活性较弱;三种多糖均可显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的NO分泌水平,显示一定的免疫增强活性。     

不同果色枸杞果实糖积累特征及其与蔗糖代谢酶活性的关系

以‘宁杞1号’（红色）、‘宁夏黄果’（黄色）和‘黑果’（黑色）3份不同果色枸杞为试材,测定枸杞果实发育过程中糖含量与蔗糖代谢酶活性的变化,并分析糖含量与蔗糖代谢酶活性的相关性,以探讨不同果色枸杞糖积累差异的生理基础,为进一步阐明枸杞品质形成及调控机理提供理论依据。结果显示：（1）气相色谱（GC）法检测结果为 ‘宁杞1号’果实含8种糖,‘宁夏黄果’含7种糖,‘黑果’仅检测到4种糖;且成熟期枸杞果实均以果糖、葡萄糖和蔗糖为主。（2）在枸杞果实发育过程中,各材料果实的果糖和葡萄糖含量呈现逐渐升高趋势,果实发育的后期升高幅度高于初期;而各材料蔗糖和赤藓糖含量却呈现出不同的变化趋势,不同发育时期材料间差异各异。（3）不同果色枸杞蔗糖代谢酶活性在枸杞果实发育过程中差异较大,其中酸性转化酶（AI）在果实发育的初期活性较低,材料间差别小,但在果实发育的后期活性高,材料间差异较大;从枸杞果实发育色变期到成熟期,供试材料AI和蔗糖合成酶（SS）活性高于中性转化酶（NI）和磷酸蔗糖合成酶（SPS）;在整个果实发育过程中‘黑果’保持着较低果糖含量和蔗糖代谢酶活性。（4）3种果色枸杞果糖含量均与AI活性达到显著相关关系,红色与黑色枸杞己糖（果糖和葡萄糖）含量与NI达到显著相关关系。研究表明,不同果色枸杞果实中的糖种类与含量、蔗糖代谢酶活性差异较大,AI活性升高有利于枸杞果糖的积累,转化酶在枸杞果实己糖积累过程中发挥着重要的作用。     

盐胁迫下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达分析北大核心CSCD

为探究盐胁迫条件下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达规律,以不同浓度NaCl(0,100,200,300 mmol/L)处理的水培宁夏枸杞幼苗为研究材料,利用高通量测序技术和qRT-PCR对盐胁迫下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达进行分析,同时对该途径中关键酶活性及产物含量进行测定。结果表明,(1)宁夏枸杞在不同浓度NaCl处理下共有58个苯丙烷代谢相关基因差异表达,且随着盐胁迫程度的增加大部分基因表达水平上调或不变;(2)随着NaCl浓度的增加,宁夏枸杞叶片抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性均下降,而酚类物质、类黄酮和木质素的含量在100 mmol/L NaCl处理下均显著积累。研究发现,宁夏枸杞可能通过调控苯丙烷代谢相关基因上调表达,增加酚类物质、类黄酮和木质素的合成,来清除过多活性氧和提升细胞壁强度以适应盐胁迫;宁夏枸杞可耐受的NaCl浓度在100~200 mmol/L之间。     

宁夏枸杞(Lycium barbarum)花器官形态多样性与品系间识别研究

该研究以42份宁夏枸杞(Lycium barbarum)为材料,对其中5个品系来自3个不同采集日期样品的花部性状进行了观察,同时对宁夏枸杞42个品系的16项花器官形态学指标进行了测定,并采用组间单因素方差分析法、主成分分析法和聚类分析法对宁夏枸杞种内的花部形态差异进行了研究。结果表明:宁夏枸杞花器官性状差异较大且多样性丰富,组间单因素方差分析表明宁夏枸杞花部性状在不同时间内采集无显著差异,即宁夏枸杞的花器官形态具有一定稳定性,因此可选用花器官形态作为区分宁夏枸杞种内不同品系的鉴别指标;主成分分析表明有关花瓣外缘色泽、花瓣正-背面脉络、花瓣形状、花瓣背部色泽、花喉色泽、雌雄蕊位置6个花部性状的累积贡献率达到84.791%,在宁夏枸杞品系的分类中起到了主要作用;聚类分析表明在欧式距离为7.5处可将枸杞的42个品系分成五类,能够将宁夏枸杞进行区分。该研究筛选出了能反映宁夏枸杞花器官形态差异的6个主要指标,并将42份宁夏枸杞分为五类,初步建立了宁夏枸杞种内品系间的形态学鉴别方法,可为宁夏枸杞的形态学研究及品系鉴定等提供依据。     

不同产地气象因子对宁夏枸杞果实糖分积累的影响

以‘宁杞1号’枸杞为材料,采用高效液相色谱技术,测定不同产地(宁夏银川、甘肃白银和青海德令哈)不同发育时期宁夏枸杞果实中的糖分(果糖、葡萄糖、蔗糖和淀粉)含量,同时对不同产地果实发育期间的气象因子进行监测,探讨主要气象因子对枸杞果实糖分积累的影响。结果表明:(1)在宁夏枸杞果实发育期内,不同产区平均温度和昼夜温差均为银川白银德令哈的变化趋势,平均光照强度为银川白银德令哈。(2)3个产区‘宁杞1号’枸杞的果实发育过程中均以积累己糖(葡萄糖和果糖)为主,蔗糖和淀粉含量很少;成熟果实中己糖含量为德令哈银川白银。(3)影响‘宁杞1号’枸杞果实己糖积累的气象因子在银川产区主要是平均温度、白天均温和平均温差,在白银产区主要是平均温差,白天温度和平均光强也有一定影响,而在德令哈产区主要是平均温差、平均光强和白天均温。研究认为,宁夏枸杞果实发育期间银川产区较高的平均温度和昼夜温差与德令哈产区较强的平均光强和较长的光照时数均有利于枸杞果实己糖积累,而白银产区较大的相对湿度和较弱的光强均成为枸杞果实糖分积累的主要限制因子。     

NaCl胁迫下宁夏枸杞光合作用相关基因差异表达分析

宁夏枸杞是著名的耐盐药用植物,该研究通过室内水培试验,利用高通量测序技术和qRT-PCR技术检测了不同浓度NaCl胁迫(0、100、200、300 mmol/L)下宁夏枸杞叶片光合作用相关基因差异表达,并分析了其叶绿素含量、净光合速率、Rubisco活性的变化,以揭示宁夏枸杞在盐胁迫条件下光合机构及光合作用相关基因差异表达规律,为深入解析宁夏枸杞响应盐胁迫的光合机理奠定基础。结果表明：(1)用100、200、300 mmol/L NaCl胁迫处理7 d时宁夏枸杞分别有14、26、55个光合作用相关基因差异表达,且随着NaCl胁迫程度的增加下调表达基因多于上调表达基因。(2)qRT-PCR结果显示,宁夏枸杞的3个光合作用相关基因ATPε、CLH2、Lhcb3的相对表达量均随着NaCl胁迫程度的加深总体呈显著下降的趋势,qRT-PCR验证结果与RNA-seq测序结果基本一致。(3)随着NaCl胁迫程度的增加,宁夏枸杞叶片中的叶绿素a和叶绿素b含量以及净光合速率和Rubisco活性均呈显著下降的趋势,而类胡萝卜素含量变化不显著。研究认为,宁夏枸杞能通过诱导光合作用相关基因的差异表达来调控叶片...     

枸杞根际土壤真菌群落多样性的高通量测序

【目的】为了解不同枸杞产区枸杞根际真菌多样性的差异,从枸杞根际土壤真菌群落的角度试图解释宁夏枸杞优良品质与其土壤微生物菌群的联系。【方法】采用Mi Seq高通量测序方法,分别将我国4个不同地区枸杞根际土壤样品进行ITS区的高通量测序,并分析了物种组成和丰度、Alpha多样性、Beta多样性和菌群结构,测定不同产区枸杞主要有效成分,同时对枸杞品质和其土壤理化因子及枸杞根际真菌种群多样性的相关性做了分析。【结果】多糖含量和甜菜碱含量均是中宁枸杞高于兴仁和精河,格尔木含量最低;宁夏兴仁、宁夏中宁、新疆精河3个地区菌群结构类似,子囊菌门和结合菌门占总菌群的80%左右,而青海格尔木除了子囊菌门占58%外,壶菌门和新丽鞭毛菌门远远高于其他3个地区,比例占总菌群的近25%;4个地区枸杞根际土壤真菌菌群结构相似性依次为宁夏兴仁、新疆精河、宁夏中宁、青海格尔木。【结论】枸杞根际土壤样品真菌物种组成丰富,不同地区枸杞根际土壤真菌种群结构有一定差异;枸杞主要有效成分含量与枸杞根际土壤真菌种群结构具有一定相关性。     

枸杞果实ATP酶超微细胞化学定位研究

运用常规ATP酶超微细胞化学定位技术,对宁夏枸杞果实发育不同阶段的韧皮部和果肉库薄壁细胞ATP酶分布进行了观察研究.结果显示,在果实发育过程中SE/CC复合体与周围韧皮薄壁细胞间存在共质体隔离,韧皮薄壁细胞及果肉库薄壁细胞的胞间连丝较少,但是与果肉库薄壁细胞相邻的韧皮薄壁细胞的胞间连丝较多.囊泡和膜泡在筛管、韧皮薄壁细胞和库薄壁细胞中很丰富,并且质膜、囊泡膜、液泡膜上ATP酶沉淀物在韧皮部各细胞分布较少,在果肉库薄壁细胞分布较多,特别是在果实第二次快速生长期,果肉库薄壁细胞膜系统、细胞壁和胞间隙的ATP酶活性剧烈增强.此外,果肉库薄壁细胞的质膜ATP酶具极性分布特点.由此得出,枸杞果实韧皮部卸载是一种需要能量驱动的过程,其卸载途径主要以质外体途径为主,在从韧皮部向果肉库薄壁细胞卸出时可能为共质体和质外体途径共存.膜泡运输是枸杞果实同化物卸出和转运的重要方式,而韧皮薄壁细胞在同化物卸出和转运过程中承担了主要转运角色;果肉库薄壁细胞进行主动和定向卸载、积累同化物的能力很强.     

Use of Anti-aging Herbal Medicine, <Emphasis Type="Italic">Lycium barbarum</Emphasis>, Against Aging-associated Diseases. What Do We Know So Far?

Lycium barbarum (Gouqizi, Fructus Lycii, Wolfberry) is well known for nourishing the liver, and in turn, improving the eyesight. However, many people have forgotten its anti-aging properties. Valuable components of L. barbarum are not limited to its colored components containing zeaxanthin and carotene, but include the polysaccharides and small molecules such as betaine, cerebroside, beta-sitosterol, p-coumaric, and various vitamins. Despite the fact that L. barbarum has been used for centuries, its beneficial effects to our bodies have not been comprehensively studied with modern technology to unravel its therapeutic effects at the biochemical level. Recently, our laboratory has demonstrated its neuroprotective effects to counter neuronal loss in neurodegenerative diseases. Polysaccharides extracted from L. barbarum can protect neurons against beta-amyloid peptide toxicity in neuronal cell cultures, and retinal ganglion cells in an experimental model of glaucoma. We have even isolated the active component of polysaccharide which can attenuate stress kinases and pro-apoptotic signaling pathways. We have accumulated scientific evidence for its anti-aging effects that should be highlighted for modern preventive medicine. This review is to provide background information and a new direction of study for the anti-aging properties of L. barbarum. We hope that new findings for L. barbarum will pave a new avenue for the use of Chinese medicine in modern evidence-based medicine.     

Hypoglycemic and hypolipidemic effects and antioxidant activity of fruit extracts from Lycium barbarum

The hypoglycemic and hypolipidemic effects of Lycium barbarum fruit water decoction, crude polysaccharide extracts (crude LBP), and purified polysaccharide fractions (LBP-X) in alloxan-induced diabetic or hyperlipidemic rabbits were investigated through designed sequential trials and by measuring blood glucose and serum lipid parameters. Total antioxidant capacity was also assessed using trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay. It was found that the three Lycium barbarum fruit extracts/fractions could significantly reduce blood glucose levels and serum total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) concentrations and at same time markedly increase high density lipoprotein cholesterol (HDL-c) levels after 10 days treatment in tested rabbits, indicating that there were substantial hypoglycemic and hypolipidemic effects. Hypoglycemic effect of LBP-X was more significant than those of water decoction and crude LBP, but its hypolipidemic effect seemed to be weaker. Total antioxidant capacity assay showed that all three Lycium barbarum extracts/fractions possessed antioxidant activity. However, water and methanolc fruit extracts and crude polysaccharide extracts exhibited stronger antioxidant activity than purified polysaccharide fractions because crude extracts were identified to be rich in antioxidants (e.g., carotenoids, riboflavin, ascorbic acid, thiamine, nicotinic acid). Lycium barbarum polysaccharides (glycocojugates), containing several monosaccharides and 17 amino acids, were major bioactive constituents of hypoglycemic effect. Both polysaccharides and vitamin antioxidants from Lycium barbarum fruits were possible active principles of hypolipidemic effect.     

枸杞体细胞胚发生过程中Ag~ 对痕量金属离子吸收的影响

以药用植物宁夏枸杞愈伤组织为材料,离体培养诱导体细胞胚发生。采用多重示踪剂和γ射线能谱分析法研究不同浓度AgNO_3处理的枸杞体细胞胚发生过程中对多种痕量金属元素离子的吸收。结果表明:(1)当AgNO_3的浓度小于50mg/L时,随着AgNO_3浓度的增加,多种痕量金属离子的吸收率也随之增加,而超过此浓度后,对多种痕量金属离子的吸收影响不同。Ag~ 对痕量金属离子的吸收有协同,拮抗或竞争的作用。(2)适当浓度的AgNO_3对细胞分化及体细胞胚发生有促进作用。当AgNO_3的浓度小于50mg/L时,随着AgNO_3浓度的增加,体细胞胚的发生频率随之增加。Ag~ 对枸杞体细胞胚发生表现促进作用,当AgNO_3的浓度为50mg/L时,可大大提高愈伤组织中体细胞胚发生,是对照(不加AgNO_3)组的3倍左右。而超过此浓度后,Ag~ 对枸杞体细胞胚发生表现毒害作用,体细胞胚的发生受到明显抑制。     

热带林下人工种植阳春砂仁的生长与果实产量动态

调查了西双版纳不同海拔热带沟谷雨林和次生林下的阳春砂仁生长和果实产量动态.结果表明,西双版纳热带林下阳春砂仁自身年龄增长、林下光照不足和旱季水分胁迫影响阳春砂仁果实产量.随种植期增加,阳春砂仁果实产量和成熟植株密度降低.当林下光照水平在全日照的35%以下时,阳春砂仁果实产量随林下日照水平变化呈线性增加(P<0.05).沟谷下方阳春砂仁果实产量显著高于上方(P<0.05).海拔600～1000m,由于阳春砂仁的主花期从干热季3～4月推迟到雨季5月,果实产量显著增加.沟谷雨林和次生林下阳春砂仁果实产量差异不显著.因此,在海拔800～1000m沟谷中轮歇地次生林下有计划种植阳春砂仁,代替在沟谷雨林下种植阳春砂仁,既能解决沟谷雨林下光照和当地旱季水分不足对阳春砂仁果实产量的影响,又有利于热带沟谷雨林的保护.     

盐胁迫下枸杞叶片细胞表面糖蛋白的变化

利用细胞化学的方法,对经过不同浓度盐胁迫的枸杞细胞表面糖蛋白的动态变化进行了标记定位电镜观察。枸杞盐胁迫处理后发现,盐胁迫过程中枸杞细胞表面糖蛋白层明显增厚、致密。随着胁迫时间的延长则变薄、脱落,游离到细胞间隙中。细胞璧糖蛋白的积累是枸杞对盐胁迫反应的重要生化机制,在枸杞的耐盐生理活动中起着重要作用。     

盐胁迫下不同树龄枸杞各器官的盐离子分布

以甘肃景泰沿黄灌区栽植的枸杞(Ly cium barbarum L.)为研究对象,研究了盐胁迫下不同树龄枸杞各器官的盐离子分配.结果表明,1~2年生枸杞各器官的K 分布为幼叶>成叶>嫩茎,而3~4年生枸杞为幼果>嫩茎>幼叶>成叶;1~4年生枸杞成叶的N a 含量分别为1.273%、1.414%、0.689%和0.497%;不同年龄枸杞成叶、幼叶、嫩茎和幼果的N a /K 平均值分别为2.425%、1.397%、0.489%和0.301%;随枸杞年龄的增加,根对土壤中N a 、K 的选择吸收比值(SA)逐渐增加.枸杞选择性吸收K 、拒N a 的特性和分配较多N a 、C l-给耐盐性较强的器官(成叶)是枸杞耐盐的重要原因.