当归多糖的分离化及其部分性质的研究

中药当归经热水提取、乙醇分级沉淀、乙醇分级沉淀、ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐａｄｅｘＧ－１５０柱层析,得Ａｓ－Ⅲｂ两个多糖级份。Ａｓ－Ⅲａ和ＡｓⅢｂ经醋纤维薄膜电泳、玻璃纤维纸电泳和凝胶柱层析分析,证明都是均二的,经琼脂糖凝胶柱层析测得Ａｓ－Ⅲａ和ＡｓⅢｂ的分子量分别为８５ＫＤ和４９ＫＤ左右。组成分析表明Ａｓ－Ⅲａ由葡萄糖组成,Ａｓ－Ⅲｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,三者比为１０：１０：４。     

箬叶多糖及其化学修饰物、亚硒酸钠和GSH对Cu~(2+)诱导的LDL氧化修饰的保护作用

研究了箬叶多糖ＦⅢ－ａ及其化学修饰物、亚硒酸钠和ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白氧化修饰的保护作用．其结果表明箬叶多糖、硫酸酯多糖、硒酸酯多糖可显著抑制脂质过氧化产物（ＴＢＡＲＳ）及荧光物质的生成,彼此之间无明显差异．但对ＶＥ的消耗有着不同的保护作用,其顺序是ＦⅢ－ａ＞Ｓ－ＦⅢ－ａ＞Ｓｅ－ＦⅢ－ａ,并且具有明显的量效关系．硒或ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的ＬＤＬ氧化修饰无明显的抑制,但联合使用在０．１２５ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ及１２．５μｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．０２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ的浓度下能强烈地抑制ＴＢＡＲＳ的生成,甚至比正常的ＬＤＬ还要低．但是对ＶＥ的消耗只有较弱的保护作用,硒酸酯多糖与此相似．Ｎａ２ＳｅＯ３在０．１２５ｍｍｏｌ／Ｌ时可以明显抑制荧光物质的生成．     

当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究

中药当归经热水提取、乙醇分级沉淀、ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５０柱层析,得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ两个多糖级份。ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ经醋酸纤维薄膜电泳、玻璃纤维纸电泳和凝胶柱层析分析,证明都是均一的,经琼脂糖凝胶柱层析测得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ的分子量分别为８５ＫＤ和４９ＫＤ左右。组成分析表明ＡｓⅢａ由葡萄糖组成,ＡｓⅢｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,三者比为１０∶１０∶４。     

镰孢属几种植物病原真菌分子核型的研究*

利用脉冲电场凝胶电泳（ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,ＰＦＧＥ）,研究了４株串珠镰孢（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）、１株尖镰孢（F．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、１株茄镰孢（Ｆ．ｓｏｌａｎｉ）和１株Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．的分子核型以及不同地域和寄主来源的串珠镰孢种内菌株间的分子核型差异。以凝胶包埋法（不破除分生孢子细胞壁）制备供试菌株电泳样本,采用３组条件组合进行电泳,分离出供试串珠镰孢完整染色体ＤＮＡ１０～１３条,分子量分布范围０．７Ｍｂ～６．９Ｍｂ,基因组大小为４２．２６Ｍｂ～４７．７５Ｍｂ;尖镰孢８条,分子量分布范围１．２Ｍｂ～６．７Ｍｂ,基因组大小为３２．２５Ｍｂ;茄镰孢６条,分子量分布范围２．４Ｍｂ～６．３Ｍｂ,基因组大小为２５．２Ｍｂ;Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．９条,分子量分布范围０．８Ｍｂ～６．８Ｍｂ,基因组大小为３６．４５Ｍｂ。结果表明,供试４种镰孢菌染色体数目、ＤＮＡ分子量及基因组大小都有较大不同,分子核型差异较大。不同来源的串珠镰孢种内菌株间分子核型亦有明显差异。     

镰孢属几种植物病原真菌分子核型的研究

利用脉冲电场凝胶电泳（ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,ＰＦＧＥ）,研究了４株串珠镰孢（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）、１株尖镰孢（F．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、１株茄镰孢（Ｆ．ｓｏｌａｎｉ）和１株Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．的分子核型以及不同地域和寄主来源的串珠镰孢种内菌株间的分子核型差异。以凝胶包埋法（不破除分生孢子细胞壁）制备供试菌株电泳样本,采用３组条件组合进行电泳,分离出供试串珠镰孢完整染色体ＤＮＡ１０～１３条,分子量分布范围０．７Ｍｂ～６．９Ｍｂ,基因组大小为４２．２６Ｍｂ～４７．７５Ｍｂ;尖镰孢８条,分子量分布范围１．２Ｍｂ～６．７Ｍｂ,基因组大小为３２．２５Ｍｂ;茄镰孢６条,分子量分布范围２．４Ｍｂ～６．３Ｍｂ,基因组大小为２５．２Ｍｂ;Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．９条,分子量分布范围０．８Ｍｂ～６．８Ｍｂ,基因组大小为３６．４５Ｍｂ。结果表明,供试４种镰孢菌染色体数目、ＤＮＡ分子量及基因组大小都有较大不同,分子核型差异较大。不同来源的串珠镰孢种内菌株间分子核型亦有明显差异。     

黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质

由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶,依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ,７６ｋＤａ,２４ｋＤａ和２３ｋＤａ,Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃,ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ,Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％,而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖,其产物有所不同。     

促进紫草色素合成的米曲霉诱导子的纯化和活性鉴定

米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）诱导子来源于该真菌的菌丝体部分。诱导子粗提物通过ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕ－ｌｏｓｅ、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ、Ｂｉｏ－Ｇｅｌｐ－４、７３２ 柱层析,得到既不吸附于阴离子交换纤维素又不吸附于阳离子交换树脂、分子量约为１２００～２２００ Ｄ、糖含量为粗提物６．７％ 的组分ＦⅠｂ２－Ｈ,与粗提物相比它的诱导子相对活性提高了１２０ 倍。诱导子粗提物中还含有低浓度不影响滇紫草（Ｏｎｏｓｍ ａ ｐａｎｉｃｕｌａｔｕｍ ）细胞合成紫草色素、而高浓度抑制紫草色素合成的核酸类组分ＦⅡ,核苷酸、氨基酸类组分ＦⅠｂ２－Ｎａ 及强烈抑制紫草色素合成的多糖类组分ＦⅠａ。ＦⅠａ可诱导细胞合成对照中没有的一种黄色素,是另一类代谢产物的诱导子     

重组人a2b型干扰素的纯化与鉴定

采用单克隆抗体亲和层析一步纯化法对大肠杆菌表达的重组人ａ２ｂ型干扰素进行了纯化,然后利用凝胶过滤高压液相层析、ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｎ端２５个氨基酸的序列测定等方法对纯化产品进行了鉴定。表明一步纯化的ＩＦＮ－ａ２ｂ达到９５％以上的统一计划,其比活性为２．５４×１０×８ｕ／ｍｇ．但重组ＩＦＮ－ａ２ｂ产品Ｎ端不均一,含有约３０％的去Ｍｅｔ分子和约７０％的带Ｍｅｔ分子。从蛋白质序列的水平上证实,本     

巨噬细胞源成纤维细胞生长因子的分离纯化

为探讨二氧化硅在大鼠肺内引发的一系列纤维增生反应,试图寻找一种关键的细胞增生因子,采用高压液相色谱技术,包括凝胶过滤柱层析、离子交换柱层析以及反相Ｃ４高压液相色谱柱层析,获得一种新的巨噬细胞源成纤维细胞生长因子（ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅ－ｄｅｒｉｖｅｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ,ＡＭＤＧＦ）,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明它已达到均一的纯度,其分子量为５８０００,ｐＩ为４．７．该因子的分子量与ＭΦ在体外接受石英粉尘刺激分泌的因子的分子量明显不同．Ｎ端序列测定结果显示它与已知蛋白序列的同源性小于５０％,其刺激成纤维细胞增殖的最适浓度范围为２．０～６．０μｇ／ｍｌ,推测ＡＭＤＧＦ是矽肺纤维化病变发生、发展过程中调节成纤维细胞增殖的重要因子之一     

黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究

黑曲霉Ａ３（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ Ａ３）的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为ｘⅠ、ｘⅡ和ｘⅢ。经７％凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测ｘⅠ、ｘⅡ和ｘⅢ。的等电点分别为６．８、５．５和６．１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得亚基分子量（Ｄａ）分别为ｘⅠ,４２０００;ｘⅡ,２００００;ｘⅢ,３１０００。三个酶组份的最适反应温度分别为ｘⅠ,４０℃;ｘⅡ     

镉在旱柳中亚细胞分布及存在的化学形态

以2个旱柳无性系幼苗为材料,通过营养液培养并结合差速离心与化学试剂提取法,分析了不同浓度Cd2+胁迫下旱柳叶和根中Cd的亚细胞分布及其存在的化学形态.结果显示,(1)随着培养介质Cd2+浓度升高,旱柳无性系幼苗叶和根中各亚细胞组分Cd含量随之增加.叶片的Cd主要富集于细胞壁、叶绿体和可溶性部分,它们的含量分别占65%～69%、14%～22%、6.8%～7.7%,仅少量Cd发现于膜部分;而根中Cd主要积累于细胞壁和可溶性部分,其中含量分别占59%～66%和14%～25%,Cd在根亚细胞组分中积累量依次为细胞壁>可溶性部分>质体>膜部分.(2)旱柳体内Cd以不同的化学形态存在,大部分为HCl(FHCl)、NaCl(FNaCl)、醋酸(HAC,FHAC)提取态,极少部分为乙醇(EtOH,FEtOH)和水提取态(Fwater),叶和根中5种Cd提取态含量依次为FHCl>FNaCl>FHAC>Fwater>FEtOH,而叶和根中HCl和NaCl提取态Cd占有比例大于30%以上.研究表明,旱柳无性系中Cd主要与蛋白质和有机酸螯合或以金属磷酸盐沉淀的形态存在,其根、叶的细胞壁和液泡在Cd忍耐与解毒中起到重要作用.     

Studies on the Chemical Constituents of Rourea microphylla (Hook. et Arn) Planch.

Eleven compounds were isolated from the twigs and leaves of Rourea microphylla (Hook. et Arn) Planch. They were identified as quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside (Ⅰ), hyperin (Ⅱ), quercetin (Ⅲ), astilbin (Ⅳ), β-sitosterol (Ⅴ), β-sitosteryl-β-D-glucopyranoside (Ⅵ), physcion (Ⅶ), erythroglaucin (Ⅷ), stearic acid (Ⅸ), palmitic acid (Ⅹ) and n-nonacosanane (Ⅺ) respectively, by means of UV, IR, NMR, MS spectra analyses and through chemical methods. The compounds Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅵ, Ⅶ, Ⅷ, Ⅸ, Ⅹ and Ⅺ were first reportedin the Rourea genus.     

满山香种子中化学成分研究

为研究满山香种子的化学成分,采用满山香种子经75%乙醇提取、溶剂萃取、硅胶柱层析、SephadexLH-20柱层析和硅胶制备薄层层析等方法,分离得5个单体化合物,分别鉴定为:杨梅素(myricetin,Ⅰ)、对苯二酚(1,4-dihydroxybenzene,Ⅱ)、香草酸(vanillicacid,Ⅲ)、β-胡萝卜苷(dauosterol,Ⅳ)和银杏双黄酮(ginkge-tin,Ⅴ)。以上化合物均为首次从该植物中分得。     

舟山眼镜蛇毒抗肿瘤有效组分分离及其抑瘤作用研究初探

目的从舟山眼镜蛇(Naja atraCantor)蛇毒(snake venom,SV)中分离得蛇毒组分,探讨SV及其分离组分的LD50和抑制肿瘤的作用。方法采用凝胶柱层析方法从蛇毒中分离得到了前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ等7种组分。采用急性毒性实验、MTT法,研究SV及其7种SV分离组分的LD50和抑制肿瘤的作用。结果 SV经Sephadex G-50层析,可分离为前Ⅰ、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ5个组分,根据峰面积大小排列:ⅢⅡⅠⅣ前Ⅰ。5个组分再经Sephadex G-25柱层析,可获得7个脱盐组分:前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ。通过急性毒性实验,明确Ⅳ的毒性最大,其次为Ⅲ2及Ⅲ1,三者的LD50值均低于SV;而Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2的毒性均小于SV,前Ⅰ1几乎无毒。SV组分Ⅲ2和Ⅳ的抑瘤作用最强,在高浓度(20μg/ml)时对实验中的2种人肿瘤细胞的抑制率均达到60%以上。结论从SV中分离得到了前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2以及Ⅳ7种组分;组分Ⅳ毒性最强,依次为Ⅲ2Ⅲ1SVⅡ2Ⅱ1Ⅰ1前Ⅰ1;SV及其7种分离组分对2种人肿瘤细胞株(SGC-7901、A549)的生长抑制有一定的特异性,而不同的SV分离组分对同一肿瘤细胞抑制作用亦有差异。     

皱皮木瓜多糖的分离、纯化及抗氧化活性研究

为了研究木瓜多糖的提取、分离、纯化与抗氧化活性,采用水提醇沉法提取皱皮木瓜中的多糖,得多糖Ⅰ;利用Sevag法除去多糖中的蛋白质后得多糖Ⅱ;以30%H_2O_2脱除色素后再次醇沉得到精制多糖Ⅲ;透析除去小分子后利用AB-8大孔树脂进行分离以水、30%、50%、70%和95%乙醇洗脱,其中水洗脱部分多糖为Ⅳ。用苯酚-硫酸法测定多糖含量。多糖Ⅰ得率为9.83%,多糖含量(纯度,下同)为64.45%;脱蛋白后多糖Ⅱ中多糖含量为78.23%;经脱色后多糖Ⅲ含量达88.39%;大孔树脂水洗脱部分多糖Ⅳ含量为89.74%。以DPPH(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率和Fe~(3+)还原力方法测定木瓜多糖的抗氧化活性,木瓜多糖均体现出一定的抗氧化作用,呈浓度依赖性增强,其中多糖Ⅰ、Ⅱ表现出更好的作用。     

Studies on the Constltuents of the Flavonoids from the Leaves of Typha angustifolia L.

Six flavonoids were isolated from the leaves of Typha angustifolia L. On the basis of spectroscopic (IR, UV, MS, 1HNMR and 13CNMR) analysis, they were identified as quercetin-3,3'-dimethyl ether (TF-Ⅰ), isorhamnetin (TF-Ⅱ), quercetin (TF-Ⅲ), quercetin-3,3' dimethyl ether-4'-O-β-D-glucoside (TF-Ⅳ), isorhamnetin-3-O-β-galactoside (TF-Ⅴ), and isorhamnetin-3-O-neohesperidoside (TF-Ⅵ). Compounds TF-Ⅰ and TF-Ⅴ were found in the genus of Typha for the first time.     

秦岭典型林分土壤活性有机碳及碳储量垂直分布特征

采用野外调查结合室内分析的方法,2013年8月分析了秦岭典型林分锐齿栎(马头滩林区,Ⅰ)、油松(Ⅱ)、华山松(Ⅲ)、松栎混交林(Ⅳ)、云杉(Ⅴ)、锐齿栎(辛家山林区,Ⅵ)土壤剖面上活性有机碳及碳储量的分布规律.结果表明: 研究区各林分土壤的有机碳、微生物生物量碳、水溶性碳、易氧化态碳含量均随着土层深度的增加而不断减小;在整个土壤剖面(0～60 cm)上,云杉和松栎混交林的土壤有机碳和水溶性碳含量明显高于其余林分,不同林分的土壤有机碳和水溶性碳含量的平均值大小均为Ⅴ＞Ⅳ＞Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ＞Ⅵ;各林分不同土层的微生物生物量碳在71.25～710.05 mg·kg^-1,不同林分的土壤微生物生物量碳大小依次为Ⅰ＞Ⅴ＞Ⅳ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅵ;整个土壤剖面上,松栎混交林的土壤易氧化态碳含量降幅最大,不同林分土壤易氧化态碳含量的平均值大小为Ⅳ＞Ⅴ＞Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ＞Ⅵ.3种活性有机碳占有机碳的比例在不同林分类型中没有表现出一致的规律性.各林分0～60 cm土层的有机碳储量大小为Ⅴ＞Ⅰ＞Ⅳ＞Ⅲ＞Ⅵ＞Ⅱ.各林分的土壤微生物生物量碳、水溶性碳、易氧化态碳两两之间均表现为极显著相关,各林分的土壤微生物生物量碳、水溶性碳、易氧化态碳与土壤有机碳、全氮之间的相关性均表现为显著或极显著水平,与碳氮比、pH、土壤水分、土壤容重的相关关系不显著.     

Two New Taxane Diterpenoids from Taxus yunnanensis

Five compounds were isolated from the bark of Taxus yunnanensis Cheng et L. K. Fu. Based on spectral IR, MS, 1H-NMR, 13C-NMR and physico-chemical constant analysis, they were identified as 7-epi-taxol B ( Ⅰ ), 1, 13-diacetoxy-10-deacetyl baccatin Ⅲ (Ⅱ ), taxol C-7-xylose (Ⅲ), taxol (Ⅳ), 3-epi-ursolic acid (Ⅴ). Compounds Ⅰ and Ⅱ were newly identified.     

Two New Buxus Alkaloids from Buxus Microphylla Sieb. et Zucc.

Five compounds were isolated from Buxus microphylla Sieb. et Zucc. Based on the physico-chemical constants and spectral analysis (IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR), they were identified as cycloprotobuxinamine ( Ⅰ ), buxmicrophylline A ( Ⅱ ), buxtauine M ( Ⅲ ), isoscopoletin (Ⅳ) and epi-lupeol ( Ⅴ ). ( Ⅰ ) and ( Ⅱ ) were new compounds. The structure of buxmicrophylline ( Ⅱ ) was confirmed by X-ray crystallographic analysis.