各种革兰氏阳性菌脂磷壁酸特异单克隆抗体的特性

<正>脂磷壁酸(LTAs)存在于许多革兰氏阳性菌的细胞膜上。它是一类由甘油磷酸(PGP)和糖脂组成的聚合体,PGP是LTA的骨架结构,它是各种革兰氏阳性菌共同抗原决定簇。测定某一细菌中交叉反应抗原,依赖于能同异嗜性(heterohile)PGP起反应的抗血清之有效性。     

细菌细胞壁的教学方案

在微生物生理学教学中,细菌细胞壁一节应该放在比较重要的地位,讲授3学时。这是因为细胞壁有着奇特的结构与多种的功能,是解释许多细菌学问题的理论基础。本课题的重点应该是:阐明革兰氏阳性菌与阴性菌细胞壁     

Alexa-555 WGA和FM4-64在活细菌定位中的比较应用

为了准确定位亚细胞形态,本试验比较应用Alexa-555 WGA和FM4-64两种染料,为研究者合理选择染料提供线索。以大肠杆菌(Escherichia coli)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)为对象,使用Hoechst 33342标记拟核,FM4-64标记细胞膜,Alexa-555 WGA标记细胞壁,Perkin Elmer Ultra VIEW Vo X荧光共聚焦显微镜观察成像。FM4-64染料适合于革兰氏阴性菌细胞膜染色,Alexa-555 WGA染料对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌细胞壁染色效果均较好。Alexa-555 WGA能用于不同类型细菌细胞壁的定位。本研究首次将Alexa-555 WGA染料应用于原核生物,可为细菌的亚细胞定位研究提供借鉴。     

一种亲脂性壁酸二肽衍生物和去壁酸二肽相似物的免疫刺激剂活性

<正>壁酸二肽(MDP)代表着福氏完全佐剂中完整分枝菌引起效应必需的最小活性结构。MDP及其一些佐剂活性衍生物能增强小鼠对感染的非特异抵抗力。一般认为,与细菌细胞壁有关的合成和天然醣肽的壁酸部分在免疫刺激活性中起重要作用。有些日本作者已描述一系列6,O—酰基—MDP衍生物,特别是用天然的棒状霉菌酸、如卡霉     

肺炎链球菌磷壁酸胆碱成分介导细菌的侵袭

分析肺炎链球菌细胞壁胆碱成分在其侵袭宿主细胞的过程中的作用。通过肺炎链球菌对人脐静脉内皮细胞的侵袭实验 ,观察血小板活化因子受体 (PAF R)拮抗剂BN 5 2 0 2 1对肺炎链球菌侵袭率的变化 ,以及乙醇胺取代细胞壁胆碱后肺炎链球菌侵袭率的变化。研究发现受体拮抗剂BN 5 2 0 2 1处理活化血管内皮细胞后 ,肺炎链球菌的侵袭率显著降低 (P <0 0 1 ) ,乙醇胺取代肺炎链球菌细胞壁成份中的胆碱同样降低了细菌对活化内皮细胞的侵袭 (P<0 0 1 )。实验表明肺炎链球菌可能是通过脂磷壁酸和磷壁酸的胆碱成分与内皮细胞表面的血小板活化因子受体结合来介导侵袭作用的     

中药砂仁类资源植物药理活性的比较

本文对6种砂仁类中药水煎液及挥发油进行了抑菌作用和对小鼠小肠运动影响的比较研究。结果表明春砂仁、壳砂仁和建砂仁的水煎液对革兰氏阳性菌（G+）有抑制作用;川砂仁挥发油、建砂仁水煎液对革兰氏阴性菌（G-）有抑制作用;红壳砂仁挥发油及水煎液对革兰氏阳性菌（G+）与革兰氏阴性菌（G-）均有抑制作用,而绿壳砂均无抑制作用。砂仁类的水煎液对促进肠管运动有明显作用,而挥发油即使在稀释100倍的情况下对肠管运动仍起抑制作用。     

贯叶连翘总提取物对致病细菌的抗菌作用

用平板抑菌法检测了贯叶连翘总提取物对细菌的抗菌谱范围,用最低抑菌浓度(MIC)检测法、最低杀菌浓度(MBC)检测法检测了其抗菌作用的强弱。结果表明提取物对供试革兰氏阳性菌菌株均有较强的抑菌和杀菌作用,对极少数革兰氏阴性菌菌株有较弱的抑菌作用,无杀菌作用。该结果提示提取物抗菌作用可能与细菌细胞壁的结构与组成相关。     

血清降钙素原水平对血流感染患者病原菌的诊断价值

探讨血清降钙素原(PCT)水平对不同病原菌血流感染的诊断价值。选取2015年7月~2016年7月我院收治的血培养阳性的血流感染患者77例,其中革兰氏阳性菌感染41例(53.25%),革兰氏阴性菌感染36例(46.75%)。检测患者的PCT水平,绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC)。革兰氏阳性菌组的血清PCT水平明显低于革兰氏阴性菌组,(0.62±0.17)ng/m L vs(12.87±3.43)ng/m L,差异具有统计学意义(t=2.193,p0.05);血清PCT区分革兰氏阳性和阴性菌的诊断价值较高(ACU=0.759),最佳阈值为4.45 ng/L。当血清PCT水平4.45 ng/L时诊断革兰氏阴性菌感染的敏感度、特异度和准确度分别为80.34%、86.91%、88.14%,阳性预测值92.1%,阴性预测值84.9%。在革兰氏阴性菌中,大肠埃希菌组的血清PCT水平明显高于鲍氏不动杆菌组,鲍氏不动杆菌组明显高于肺炎克雷伯菌组,差异具有统计学意义(p0.05);在革兰氏阳性菌中,金黄色葡萄球菌组的血清PCT水平明显高于肠球菌属组,肠球菌属组明显高于酿脓链球菌组,差异具有统计学意义(p0.05)。不同病原菌血流感染患者的血清PCT水平存在差异,血清PCT水平对早期区分革兰氏阳性菌和阴性菌感染具有较高的诊断价值。     

金黄色葡萄球菌壁磷壁酸致病与免疫的分子机制研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)壁磷壁酸(wall teichoic acids, WTAs)是多元醇经由磷酸二酯键共价连接组成的细胞壁表面阴离子糖类聚合物,参与调节细胞壁的稳态并介导细菌毒力。金黄色葡萄球菌WTAs与宿主细胞表面特定的受体结合,可诱导天然免疫和获得性免疫应答。此外,金黄色葡萄球菌WTAs还参与调控毒力基因的表达,有助于细菌的定殖感染,在基因工程靶标治疗和噬菌体药物治疗方面具有广泛的应用前景。本文对金黄色葡萄球菌WTAs的合成进行了概述,综述了WTAs对宿主免疫应答的调控作用,以及在细菌对宿主侵袭与定殖中的致病机制,并归纳WTAs的耐药分子机制和作为药物治疗靶标的研究现状。这些研究为揭示WTAs的致病与免疫分子机制提供研究思路,为预防和治疗金黄色葡萄球菌的感染提供新的策略。     

快速区别革兰氏阳性和阴性细菌的简易方法

革兰氏染色阳性反应和阴性反应是细菌分离和鉴定的最重要、最基本的方法之一。但是使用革兰氏染色时经常发现某些革兰氏阳性菌会褪色;某些革兰氏阴性菌会由于菌龄或培养基的不同而染色反应不准确。     

Naphtho-[2,3-b]pyrandiones类抗生素SP-1的发酵、理化性质及活性研究

从产生菌Z-2002的发酵产物中,纯化得到抗生素SP-1,属于有广泛生物活性但少见的3,4-dihydro-2H-Naphtho-[2,3-b]pyran-5,10-quinones类化合物,该化合物与已知抗生素( )-Cryptosporin一致。SP-1对23种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌进行了体外抑菌活性评价,抗菌谱表明:SP-1对G 菌有一定的抑制活性,对临床分离的耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)、表葡菌(MRSE)呈中等程度的抑制,MIC为8μg/mL,对革兰氏阴性菌的抗菌活性较弱。     

300例肿瘤患者痰培养及药敏结果的分析

本文通过对３００例肿瘤患者痰培养及药敏的实验结果进行分析,说明在肿瘤患者中呼吸道感染不仅见于革兰氏阳性菌,而且还常见于革兰氏阴性菌及真菌。其中革兰氏阳性菌主要是金黄色葡萄球菌（３８株）,肠球菌（３７株）,化脓性链球菌（９株）,革兰氏阴性菌主要是肺炎克雷伯氏菌（３９株）,铜绿假单胞菌（２７株）等,从药敏实验结果观察到革兰氏阳性菌对万古霉素较敏感,而对其它抗生素均有不同程度的耐药性,革兰氏阴性菌对另四代头孢菌素,头孢哌酮,头孢噻腭及对氧哌嗪青霉素的耐药率低于２０％。     

基于成分敲除/敲入研究广藿香油抗菌主要药效物质

为研究广藿香油抗菌主要药效物质,遵循成分敲除/敲入研究模式,以百秋李醇与广藿香酮为目标成分,用广藿香油制备百秋李醇与广藿香酮不同含量比例的样品;采用琼脂平板二倍稀释法,分别测定各样品对6种革兰氏阳性菌种及5种革兰氏阴性菌种的最低抑菌浓度(MIC);采用SAS 9.2软件对所得数据进行一元方差分析,并采用SNK法(q检验)联合析因设计进行两两比较分析。实验结果表明广藿香油抗菌效果显著优于敲除目标成分后的阴性样品,但阴性样品仍具有一定的抗菌效果;广藿香油与阳性对照样品(单体百秋李醇∶广藿香酮=2∶1)、百秋李醇单体、广藿香酮单体之间,其整体抗菌效果基本相当;但百秋李醇对革兰氏阳性菌的抑制作用均优于广藿香酮,广藿香酮对革兰氏阴性菌的抑制作用均优于百秋李醇;且两目标成分不同比例配伍的广藿香油对不同菌种的抗菌效果略有差异。由此可见,百秋李醇与广藿香酮为广藿香油的主要抗菌活性物质,百秋李醇、广藿香酮对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌抑制作用有所差异,且两者比例差异对广藿香油抗菌作用有一定的影响,随着广藿香酮比例的增加,对革兰氏阳性菌抗菌活性有下降趋势,对革兰氏阴性菌的抗菌活性有增加趋势。     

内陆土壤冷适应细菌的筛选分类与细胞膜脂肪酸的适冷机制

嗜冷菌及耐冷菌是冷适应酶及生物活性物质的重要资源。本研究从内陆土壤筛得33株冷适应细菌,包括6株革兰氏阳性菌与27株革兰氏阴性菌。通过细胞膜脂肪酸分析表明,革兰氏阳性菌的膜脂肪酸主要为分支脂肪酸,推测分支结构是阳性菌膜脂的主要适冷机制。革兰氏阴性菌呈现了不饱和、分支、短链等多样的膜脂适冷调节方式。根据脂肪酸组分的多样性,选择并鉴定了17株嗜冷及耐冷菌分布在11个属中,细胞膜脂肪酸组成的变化规律与细菌16SrRNA的进化分布高度一致。研究还表明同为不饱和脂肪酸为主的革兰氏阴性菌呈现了不同的适冷机理。相关研究不仅阐述了冷适应细菌的细胞膜脂肪酸的适应机制,而且为相关适冷酶源的开发利用提供了宝贵的资源。     

海南捕鸟蛛毒素及体液的抗菌活性研究

采用杯碟法研究了海南虎纹捕鸟蛛粗毒和体液对革兰氏阴性菌、阳性菌、霉菌和酵母的抑菌效果。结果表明,粗毒和体液均能抑制革兰氏阳性菌、阴性菌和霉菌的生长,但对酵母无抑制效果,并且粗毒和体液有一定的协同抗菌作用。     

高寒草甸连续围封与施肥对土壤微生物群落结构的影响

以放牧为对照,应用PLFA法分析研究了放牧、连续6年围封及围封内连续6年施肥后高寒草甸土壤微生物群落结构的变化.结果表明:围封和围封内施肥对不同土层各菌群和微生物总量均有显著影响,其对0 ～ 10 cm土层微生物的影响大于10～20 cm土层,不同土层的PLFA种类发生显著变化.围封和围封内施肥处理不同土层的革兰氏阴性菌(G-)含量均低于放牧;放牧0 ～10 cm土层中细菌、真菌、革兰氏阳性菌(G+)、微生物总量大干围封和围封内施肥处理,但其放线菌生物量均低于围封和围封内施肥处理;在10～20 cm土层中,各样地土壤中的G+无显著差异,围封土壤中的细菌、真菌、放线菌、微生物总量显著高于放牧,而围封内施肥后各菌群生物量及微生物总量明显下降.围封和围封内施肥不同土层的细菌/真菌均高于放牧;一般饱和脂肪酸/单烯不饱和脂肪酸(SAT/MONO)和革兰氏阳性菌/革兰氏阴性菌(G+/G－),围封处理均低于放牧,围封内施肥处理均高于放牧.连续围封和围封内施肥后降低了土壤微生物活性和土壤生态系统的稳定性.     

细菌的超微结构

细菌是原核细胞,通常认为它无细胞的复杂分化。用电子显微镜观察,已报道的细菌超微结构有细胞壁、胞浆膜、鞭毛、纤毛、荚膜、核糖核蛋白颗粒、中膜小体、核区、芽胞等。可是最近我们通过电子显微镜在细菌细胞中还观察到一些真核细胞才有的细胞器,如微管、微丝、板层样结构等,现分述如下: 1.细胞壁是一个围绕菌体的致密结构,与保持细菌的固有形态及通透性有关。用电子显微镜观察发现,不同类型的细菌其细胞壁有明显差别。革兰氏阳性菌的细胞壁层次不清,厚150A左右。革兰氏阴性菌的细胞壁通常由2—3个电子致密层组成,厚100A左右。而我们在牛型布鲁氏菌A_4菌株、鼠伤寒沙门氏菌TA100株、酵米面黄杆菌Co33株观察到细胞壁有3—4个电子致密层组成。(图6)(本文图均见封三)     

Naphtho-[2,3-b ]pyrandiones类抗生素SP-1的发酵﹑理化性质及活性研究

从产生菌Z-2002的发酵产物中,纯化得到抗生素SP-1,属于有广泛生物活性但少见的3,4-dihydro-2H-Naphtho-[2,3-b]pyran-5,10-quinones类化合物,该化合物与已知抗生素（＋）-Cryptosporin一致.SP-1对23种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌进行了体外抑菌活性评价,抗菌谱表明：SP-1对G＋菌有一定的抑制活性,对临床分离的耐甲氧西林的金葡菌（MRSA）、表葡菌（MRSE）呈中等程度的抑制,MIC为8μg/mL,对革兰氏阴性菌的抗菌活性较弱.     

高密度脂蛋白对部分微生物感染影响的研究新进展

高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)是主要的血脂成分之一,具有抗动脉粥样硬化、抗炎症反应等多种功能。近年来,HDL对微生物感染的影响得到广泛关注和研究。研究发现,微生物感染能够导致炎症反应,引起甘油三脂、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白升高,高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)降低。细菌感染时,HDL与HDL相关脂蛋白结合并中和革兰氏阴性菌的脂多糖和革兰氏阳性菌的磷壁酸,抑制炎症反应发生。寄生虫感染过程中,apo L-1通过溶酶体溶胀作用杀死寄生虫。本文主要综述HDL对微生物感染的影响,以期为抑制微生物感染引起的炎症反应提供新思路,为治疗败血症、微生物感染引起的疾病提供新方法。     

小叶锦鸡儿固沙林土壤G+与G-细菌碳代谢功能多样性

为探讨科尔沁沙地流动沙丘上建立小叶锦鸡儿固沙植被后,土壤微生物群落中革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌代谢功能的变化规律,采用Biolog-GN2和GP2微平板检测法,研究了9、16、26年生人工群落以及流动沙丘和天然小叶锦鸡儿群落土壤革兰氏阴性和革兰氏阳性菌碳源代谢的多样性变化特征。结果表明,流动沙丘建立小叶锦鸡儿固沙植被后,土壤革兰氏阴性菌多样性表现为持续缓慢增加的趋势,0～26年生群落Shannon指数由3.85逐渐增加到4.17,均匀度指数由0.85增加到0.94;而革兰氏阳性菌则表现为先显著降低,后逐渐增加的趋势。随着固沙群落年龄的增长,土壤微生物代谢糖类、羧酸类、双亲化合物类、聚合物类、胺/酰胺类和氨基酸类等碳源种类逐渐增加。26年生小叶锦鸡儿人工群落土壤革兰氏阴性和革兰氏阳性菌的碳源代谢模式已逐渐接近天然群落。