乳杆菌代谢物对白色念珠菌影响的体外试验研究

目的从阴道微生态平衡角度出发,观察乳杆菌(DM9811)代谢物对白色念珠菌的抑杀效果,并行组份分析,探索CV(candidal vaginitis,CV)的生态疗法.方法取CV患者阴道分泌物30例,分离培养,鉴定,保留白色念珠菌菌株.1.以提取液(以下简称提取液)Ⅰ和Ⅱ分别代替蒸馏水配制培养基SⅠ和SⅡ,将保留的白色念珠菌株传代5次后,配制菌液,接种于S、SⅠ和SⅡ中,培养后活菌计数.2.对提取液Ⅰ和Ⅱ倍比稀释,并代替蒸馏水配制多个培养基SⅠ和SⅡ,测定SⅠ和SⅡ中没有菌落生长的最低有效浓度(MIC).3.气相色谱测定提取液中挥发酸类成分并定量.4.选择提取液最低浓度加1的方法配制培养基,比较提取液和乙酸水溶液对白色念珠菌的抑制效果.结果1.白色念珠菌生长24 h后计活菌数,将SⅠ与S,SⅡ与S中活菌数相比较,非参数配对T检验P＜0.01.2.提取液Ⅰ最低有效浓度为1:4,提取液Ⅱ最低有效浓度为1:2.3.气相色谱测定提取液Ⅱ中挥发酸类主要成分为乙酸,浓度为0.235 9 S/100ml.4.提取液和乙酸对白色念珠菌的生长都有抑制作用,但提取液的抑制作用明显强于乙酸.结论乳酸杆菌DM9811代谢物对白色念珠菌有明显的抑菌和杀菌作用,可作为一种新型的生态制剂进行开发,用于治疗念珠菌阴道炎.     

复方沙棘籽油栓对阴道乳杆菌增殖影响的体外研究

目的 了解复方沙棘籽油栓对体外培养的阴道乳杆菌的作用.方法 从中国健康妇女阴道分离乳杆菌进行体外培养,在培养基中加入不同浓度的复方沙棘籽油栓,培养一定时间后,统计各组乳杆菌菌落直径.结果 在药物浓度较低的三组(0.25 mg/mL、1.0 mg/mL和4.0 mg/mL)中,菌落直径与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);而在药物浓度较高的两组(16 mg/mL、64 mg/mL)中,菌落直径明显较对照组响应时间的菌落直径大,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阴道乳杆菌在体外培养时,复方沙棘籽油栓可能对其增殖产生一定程度的促增殖作用.     

培菲康联合乳杆菌治疗老年细菌性阴道病

目的 观察口服培菲康联合阴道用乳杆菌治疗老年细菌性阴道病的疗效。方法 选取2016年1月至2017年8月我院就诊的114例老年细菌性阴道病患者,随机分为联合治疗组、乳杆菌组和对照组各38例,联合治疗组给予口服培菲康联合阴道用乳杆菌活菌胶囊,乳杆菌组给予阴道用乳杆菌活菌胶囊,对照组给予阴道用甲硝唑栓。观察三组患者治疗效果、复发情况以及阴道pH的变化。结果 联合治疗组和乳杆菌组的治疗总有效率均明显高于对照组(χ2=4.290 3、4.069 9,均P<0.05),联合治疗组治疗有效的患者3、6个月内复发率均明显低于对照组(χ2=5.526 0、6.983 7,均P<0.05),联合治疗组治疗有效的患者6个月内复发率明显低于乳杆菌组(χ2=5.499 4,P<0.05),治疗6个月后联合治疗组阴道pH值明显低于乳杆菌组和对照组(t=3.736 1、4.353 8,均P<0.05)。结论 口服培菲康联合阴道用乳杆菌治疗老年细菌性阴道病,不仅能提高近期疗效,对于长期预防也有明显的效果。     

乳酸、乙酸及pH对嗜酸乳杆菌和阴道加德纳菌的生长及交互作用影响

目的 探讨乳酸、乙酸及pH值变化对嗜酸乳杆菌和阴道加德纳菌的生长及交互作用影响,为探究细菌性阴道病患者治疗失败的可能原因提供依据。方法 （1）两菌经不同浓度乳酸、乙酸作用后,检测其细菌浓度变化。（2）两菌经不同pH的SBHIG肉汤单独及混合培养,检测其细菌浓度变化并涂片观察生长情况。结果 乳酸、乙酸浓度1.0%~5.0%时,均可抑制两菌的生长。0.1%乳酸对阴道加德纳菌生长的抑制能力较弱,但可促进嗜酸乳杆菌的生长。肉汤培养基在pH 3.5时,几乎只有嗜酸乳杆菌能生长;pH 8.5时,生长的细菌中阴道加德纳菌占绝大多数;pH 5.5和7.0时,两菌虽然共同生长,但嗜酸乳杆菌生长明显受抑制。结论 嗜酸乳杆菌与阴道加德纳菌存在交互作用,但受细菌浓度、乳酸和乙酸浓度及pH的影响。细菌性阴道病患者需多疗程疗治疗或治疗失败可能与乳杆菌累积浓度未能达到抑制阴道加德纳菌生长的要求有关。     

益生菌体外增殖因子的初步研究

目的研究单糖、pH、温度及时间对青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌体外增殖的影响。方法用甘露糖、半乳糖、山梨醇及果糖代替MRS中的葡萄糖,筛选出每种细菌的最适碳源。以此为基础,选择其最佳初始pH、培养温度、碳源添加量及培养时间。结果青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌的最适碳源分别为葡萄糖、甘露糖和半乳糖;最佳初始pH为6.0、7.0和6.0;培养温度为42、30和30℃;碳源添加量为20、15和25 g/L;培养时间都为28-48 h。结论益生菌具有不同的最适增殖条件,本文研究结果为优化益生菌的生长条件提供了基础数据。     

特康唑对常见念珠菌的体外敏感性试验

目的：研究特康唑对重度念珠菌性阴道炎常见念珠菌的体外敏感性。方法菌株分离自上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市第六人民医院、上海市第一妇婴保健院妇科门诊外阴阴道念珠菌病（ VVC）患者的阴道分泌物。所有菌株均经念珠菌显色培养基（ CHROMagar Candida）、API 20C AUX鉴定,并采用CLSIM27?A3肉汤微量稀释法对213株临床分离念珠菌作了特康唑、克霉唑、咪康唑3种抗真菌药物敏感性测定。结果213株菌株经鉴定为白念珠菌192株（90．14％）,光滑念珠菌21株（9．86％）。特康唑对192株白念珠菌的MIC范围：0．024～12．5μg／mL,MIC50：0．39μg／mL,MIC90：1．56μg／mL,GM：0．248μg／mL;特康唑对19株光滑念珠菌的MIC范围：0．024～1．56μg／mL,MIC50：0．049μg／mL,MIC90：1．56μg／mL,GM：0．107μg／mL。结论目前阴道念珠菌病的病原菌仍以白念珠菌为主,并提示特康唑与克霉唑、咪康唑3种药物对213株念珠菌均具有良好的敏感性,特康唑对白念珠菌及光滑念珠菌有较强的抑制作用并未发现有耐药现象。     

中药安菌凝胶对狐狸阴道加德纳菌病的实验研究

通过对狐狸加德纳菌病（ＧＶＦ）阴道菌群分析、阴道光镜和电镜下组织学结构观察认定,ＧＶＦ与人类细菌性道病（ＢＶ）同属菌群失调所致,并以此为动物模型,采用黄芪、苦参、蛇床子、甘草四味中药以新型高分子材料卡波姆（Ｃａｒｂｏｍｅｒ）为赋形剂制成凝胶,对其进行体外抑菌实验和不同组方的疗效比较,结果显示：Ｂ组方中药制剂（安菌凝胶）治疗后的疗效最好,关在细胞水平上中药作为微生态调节剂的机制进行了初步探讨。     

甲硝唑与乳杆菌活菌制剂对细菌性阴道病患者阴道微生物群影响的对比性研究

目的对300例细菌性阴道病（Bacterial Vaginosis,BV）患者随机使用甲硝唑（100例）、乳杆菌活菌制剂定君生（100例）及甲硝唑联合定君生（100例）,观察乳杆菌在阴道内定植情况及用药前后阴道内微生物多样性的变化,为临床治疗细菌性阴道病提供实验依据。方法分别提取300例BV患者用药前和用药后的阴道微生物总基因组DNA,以德氏乳杆菌16SrDNA特异性引物进行PCR,检测患者用药后德氏乳杆菌在阴道内的定植情况。以细菌16SrRNAV3区通用引物进行PCR,扩增产物进行变性梯度凝胶电泳（DGGE）,对所得指纹图谱进行分析,研究用药对微生态变化的影响状况。结果甲硝唑治疗组用药前后均没有德氏乳杆菌检出;定君生治疗组用药后德氏乳杆菌检出率为54％;甲硝唑联合定君生治疗组用药后德氏乳杆菌检出率为76％。甲硝唑治疗组用药后微生物多样性显著降低,微生物群结构失衡;定君生治疗组用药后微生物多样性有所降低,微生物群结构无显著差异;甲硝唑联合定君生治疗组用药后微生物多样性降低,但较前两组有所增加,微生物群结构差异无统计学意义。结论甲硝唑显著降低BV患者阴道微生物多样性,引起微生态失衡;定君生对BV患者阴道微生态的影响明显小于甲硝唑;定君生的使用有利于甲硝唑f预后阴道微生物多样性的恢复和微生态平衡的重建。     

乳杆菌制剂治疗外阴阴道念珠菌病的研究进展

外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis, VVC)又称念珠菌性阴道炎,是由念珠菌异常增殖引起的女性常见的第二大外阴阴道炎症疾病,常伴有阴道菌群失调和微环境的改变,尤其在妊娠期间,VVC的发病率升高,与不良妊娠结局的发生显著相关,对女性身心健康造成了严重的损害。传统针对VVC的治疗一直以抗真菌药物为主,但并未修复受损的阴道微生态系统,目前乳杆菌制剂被认为可通过维持正常的阴道微生物群来重建阴道微生态系统,有利于治疗女性阴道炎症疾病,因而在临床诊疗工作中,乳杆菌制剂的应用越来越多。以下就国内外乳杆菌制剂联合其他药物治疗VVC的研究进行综述,探讨乳杆菌制剂在VVC的治疗中发挥的作用。     

阴道液中唾液酸酶活性、阴道加德纳菌及其IgA水平的相关性研究

目的探讨阴道液中唾液酸酶活性、阴道加德纳菌及抗阴道加德纳菌的溶血素(anti-Gvh)IgA水平在细菌性阴道病(BV)的相关性。方法对15例健康人和60例临床诊断为BV的患者,取阴道分泌物分别进行唾液酸酶活性和anti-Gvh IgA水平测定及阴道加德纳菌(Gv)分离培养。唾液酸酶活性利用从底物-5溴-4氯-3吲哚基-α-D-N乙酰基神经氨酸(X-Neu5Ac)转化而得到的甲氧基苯酚的纳摩尔数来表示;anti-Gvh IgA通过ELISA法测定。结果BV组Gv活菌数(6.96 log CFU/g)显著高于健康对照组(2.58 log CFU/g)(P<0.01)。BV组anti-GvhIgA(238.0±220.6)显著高于健康对照组(175.0±40.16)(P<0.01)。BV组Gv分离率(86.7%)显著高于健康对照组(33.3%)(P<0.01)。45例临床诊断为BV的患者中,其中26例Gvh IgA(+),19例Gvh IgA(-);Gvh IgA(-)组阴道液中唾液酸酶活性(5.00±1.29)显著高于Gvh IgA(+)组(1.58±1.22)(P<0.01),2组的Gv的分离率和活菌数差异却没有显著性(P>0.05)。结论BV患者阴道内高活性的唾液酸酶与低水平anti-Gvh IgA和黏膜IgA破坏程度具有关联性。     

定菌生调整实验小鼠念珠菌性阴道炎的菌群失调的研究

目的 应用阴道细菌培养与光镜细胞学检查相结合的方法,研究定菌生对阴道念珠菌感染的菌群失调的调整作用。方法 以小鼠为实验对象,用盐酸林可霉素造成阴道菌群失调,并将分离的念珠菌接种到小鼠阴道内,造成小鼠阴道念珠菌感染模型,分别采用定菌生、抗真菌＋定菌生及抗真菌（制霉菌素）治疗1疗程后,取其阴道分泌物进行念珠菌及乳杆菌的菌群分析,并同时进行分泌物镜检,取阴道组织标本做病理组织学检查。结果 模型组小鼠阴道内主要细菌数量乳杆菌显著下降（P〈0．01）．出现阴道红肿、分泌物多呈块状和阴道黏膜充血等念珠菌阴道炎的典型症状,分泌物涂片镜检查到白细胞及念珠菌,而定菌生组和定菌生＋制霉菌素组治疗的小鼠,阴道黏膜与健康对照组的阴道黏膜基本相同,阴道内主要菌群——乳杆菌的数量恢复正常,阴道内念珠菌显著降低,与自然恢复组相比差异有极显著性（P〈0．01）,与制霉菌素处理比差异也有显著性,治疗效果明显好于制霉菌素。结论 定菌生能阻止念珠菌对阴道上皮的粘附作用,能调整阴道的菌群,对阴道黏膜有一定的修复功能,是治疗念珠菌性阴道炎有效的微生态调节剂。     

不同年龄组阴道炎患者阴道分泌物检查结果分析

目的对比分析不同年龄组女性阴道炎患者阴道清洁度和霉菌、滴虫、纤毛菌、线索细胞检出情况。方法对2 295例女性阴道炎患者按照年龄分组进行阴道分泌物涂片染色检查。结果 2 295例中阴道清洁度为Ⅲ～Ⅳ度占66.19%,霉菌、线索细胞、滴虫和纤毛菌的检出率分别为25.22%、15.69%、0.74%和0.48%;50岁以上年龄组阴道清洁度Ⅲ度检出率较高;20岁以下年龄组Ⅳ度检出率较高;21～30年龄组霉菌检出率较高,41～50年龄组线索细胞和滴虫检出率较高,纤毛菌检出率在各组之间差异无统计学意义。结论大连地区女性阴道炎患者防治形势不容乐观;与年龄相关的生理原因及个人行为因素导致不同年龄组患者阴道感染病因的差异性。     

5863例阴道分泌物检测结果分析

目的通过对5 863例妇科疾病患者阴道分泌物进行检查,分析引起妇科疾病的病原体感染分布状况。方法选择2010年11月至2011年5月来义乌妇保院就诊的妇科患者5 863例,对其阴道分泌物进行常规镜检和生化检测。结果在5 863例样本中,清洁度Ⅰ～Ⅱ2 756例,清洁度Ⅲ～Ⅳ3 107例,不同清洁度中病原体的检出率差异有统计学意义（P〈0.05）,且20～50岁年龄组病原体感染率明显高于其他年龄组（P〈0.05）。结论育龄期妇女阴道感染率较高,细菌性阴道病发病率比白色念珠菌性和滴虫性阴道炎均要高。因此,育龄期采取合理有效的措施,预防细菌性阴道病感染是关键。     

念珠菌性阴道炎小鼠模型的建立

目的建立念珠菌定植的阴道感染小鼠模型。方法先用林可霉素溶液(浓度为100mg/ml)冲洗小鼠阴道,再将念珠菌接种到小鼠阴道内。结果模型组小鼠阴道内主要细菌数量乳杆菌显著下降(P<0.01),出现阴道红肿、分泌物多呈块状和阴道黏膜充血等念珠菌阴道炎的典型症状。结论通过抗生素处理后,再在小鼠阴道内接种念珠菌,念珠菌能在小鼠阴道内定植,即建立了念珠菌性阴道炎的小鼠模型。     

Lactobacillus strains isolated from the vaginal microbiota of healthy women inhibit Prevotella bivia and Gardnerella vaginalis in coculture and cell culture

The purpose of this study was to investigate how human vaginal isolates of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus gasseri and Lactobacillus crispatus inhibit the vaginosis-associated pathogens Gardnerella vaginalis and Prevotella bivia. Results show that all the strains in coculture condition reduced the viability of G. vaginalis and P. bivia, but with differing degrees of efficacy. The treatment of G. vaginalis- and P. bivia-infected cultured human cervix epithelial HeLa cells with L. gasseri strain KS120.1 culture or cell-free culture supernatant (CFCS) results in the killing of the pathogens that are adhering to the cells. The mechanism of the killing activity is not attributable to low pH and the presence of lactic acid alone, but rather to the presence of hydrogen peroxide and proteolytic enzyme-resistant compound(s) present in the CFCSs. In addition, coculture of G. vaginalis or P. bivia with L. gasseri KS120.1 culture or KS120.1 bacteria results in inhibition of the adhesion of the pathogens onto HeLa cells.     

妊娠期女性常见阴道感染常规分析

【摘 要】 目的 调查妊娠期女性常见阴道感染的发病情况。方法 随机选取我院孕检妇女、妇科病普查妇女各200例,采用阴道分泌物常规镜检方法对其阴道分泌物进行常规分析。结果 200妊娠期孕检妇女中,检出清洁度Ⅰ～Ⅱ 88例（占受检人数的44%）、清洁度Ⅲ～Ⅳ 112例（占受检人数的56%）,阴道感染患者57例（占受检人数的28.5%）,其中外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）37例（占受检人数的18.5%）、细菌性阴道病（BV）18例（占受检人数的9%）、滴虫性阴道炎（TV）2例（占受检人数的1%）;200例妇科病普查妇女中,检出清洁度Ⅰ-Ⅱ 94例（占受检人数的47%）、清洁度Ⅲ-Ⅳ 106例（占受检人数的53%）、阴道感染患者59例（占受检人数的29.5%）,其中外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）34例（占受检人数的17%）、细菌性阴道病（BV）22例（占受检人数的11%）、滴虫性阴道炎（TV）3例（占受检人数的1.5%）。经卡方检验,妊娠期孕检妇女和妇科病普查妇女中VVC、BV和TV的发病率差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 大兴区妊娠期女性阴道感染以VVC为主。     

肉桂醛对根管内白色念珠菌生物膜作用的体外研究

目的研究肉桂醛对体外白色念珠菌生物膜的影响。方法采用琼脂扩散法进行肉桂醛和洗必泰对白色念珠菌敏感性的比较;MTT法评价肉桂醛对白色念珠菌生物膜及细胞黏附的影响。结果 2 048μg/mL肉桂醛与2%洗必泰抑菌环直径比较差异无统计学意义(P>0.05);4 096μg/mL肉桂醛对白色念珠菌生物膜的抑菌率达93.02%;不同浓度肉桂醛对60、90和120 min的白色念珠菌细胞粘附都具有抑制作用。结论肉桂醛对体外白色念珠菌生物膜有较明显的抑制作用。     

地塞米松影响念珠菌对抗真菌药物敏感性的实验研究

目的 探讨地塞米松在体外试验中是否影响念珠菌对抗真菌药物的敏感性,以了解糖皮质激素与抗真菌药物直接作用于念珠菌时是否存在相互作用。方法 用微量液体培养基稀释法分别测定26株白念珠菌与地塞米松（0．2mg／ml）共同孵育前、孵育24～48h及7d时氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B的最低抑菌浓度（MIC）值,并作对照。结果 白念珠菌与地塞米松孵育24～48h后、孵育后第7d氟康唑和伊曲康唑的MIC值升高,分别与孵育前的MIC值存在统计学差异,但孵育24～48h后的MIC与孵育后第7d的MIC无统计学差异;白念珠菌与地塞米松共同孵育24～48h后两性霉素B的MIC值也较孵育前升高,但第7d的MIC值与孵育前无差异。结论 地塞米松可增加三种抗真菌药物对于白念珠菌的MIC,但三种抗真菌药物间存在差异,表明地塞米松对于氟康唑和伊曲康唑体外抗白念珠菌的活性有拮抗作用,但没有时间依赖性,地塞米松对于两性霉素B的影响较氟康唑和伊曲康唑小,且影响时间较短。     

改良丁字带对妇科阴式手术后阴道微生态的影响

目的 探讨改良丁字带对比传统丁字带对妇科阴式手术后患者阴道微生态的影响。方法 选择妇科阴式手术患者186例作为研究对象,随机分为两组,观察组93例使用改良丁字带固定,对照组93例使用传统丁字带固定。对比分析两组患者术后阴道微生态,敷料污染,引流管阻塞、脱落,皮肤受损,排尿困难等的发生情况。结果 观察组阴道微生态失衡发生率为23.66%,敷料污染发生率为29.03%,引流管阻塞发生率为7.52%,皮肤受损发生率为3.23%,均明显低于对照组,差异具有统计学意义（均P<0.05）。结论 妇科阴式手术后使用改良丁字带固定能够减少手术患者阴道微生态失衡及相关并发症的发生率,提高患者生活质量。     

大黄酚体外抗白念珠菌生物膜作用的研究

目的研究大黄酚对体外白念珠菌生物膜的影响。方法采用XTT减低法评价大黄酚对白念珠菌的生物膜及黏附性的影响;镜下观察该药对白念珠菌生物膜的形态学影响;细胞毒试验检测该药的毒副作用。结果大黄酚对白念珠菌生物膜的SMIC50、SMIC80分别为125、1000μg/ml;100μg／ml及1000μg/ml含量浓度的大黄酚对自念珠菌的早期黏附及菌丝生长有抑制作用;大黄酚对人细胞毒性较弱。结论大黄酚对体外白念珠菌生物膜有较强的抑制作用。