苏芸金芽孢杆菌的一个新亚种

由北京近郊温泉地区油松林间土壤中,分离到一株产生伴孢内含物的芽孢杆菌TW 20。该菌株具有苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的典型特征,但无鞭毛抗原(H),伴孢内含物与孢子常常不分开,位于孢子囊一端由数个不同形状的晶体组成．其生化反应特性及酯酶型与已知23个血清型30个亚种的标准菌株均不相同。对油松毛虫(Dendrolimus tabulaef-ormis)、午毒蛾(Lymautria dispar)、黄褐天幕毛虫(Malacosoma neustria testcea)、光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)幼虫没有明显的致病性。根据上述特性,菌株TW20属于一个新的酯酶型亚种,定名为苏芸金芽孢杆菌温泉亚种——Bacillus thuringiensis subsp. Wequanen-sis。     

不同饲毒法测定Bt8010毒力效价研究

以棉铃虫初孵幼虫为供试虫,用合成饲料和天然饲料两种饲毒法,CS3ab-1991（毒力效价Ha 15000IU/mg)为标准品对Bt 8010粉剂进行毒力测定,饲毒后的供试虫在30℃恒温下培育72小时,合成饲料饲毒法测定的CS3ab-1991 LC50=108.6±10.8μg/ml,Bt8010 LC50=197.1±15.6μg/ml,毒力效价8273.1±715.8Ha IU/mg,天然饲料饲毒法测定的CS3ab-1991 LC50=406.3±47.5μg/ml,Bt8010 LC50=705.0±86.8μg/ml,毒力效价8633.2±871.8Ha IU/mg。     

土壤来源的五个苏云金芽孢杆菌新亚种的鉴定

从中国土壤中分离的大量苏云金芽孢杆菌菌株中鉴定出H42、H43、H56、H60及H62等5种新H血清型,并进行了形态、培养特征、生化反应、晶体蛋白质成分及毒力特性等项检测鉴定,鉴定了5个苏云金芽孢杆菌新亚种： Bacillus thuringiensis subsp. jinghongiensis (H42), B.thuringiensis subsp. guiyangiensis (H43),B.thuringiensis subsp. rongseni(H56),B.thuringiensis subsp. pingluonsis(H60)及B.thuringiensis subsp. zhaodongensis(H62) 。毒力生物测定证明5个新亚种的代表菌株对棉铃虫(Heliothis armigera)\,小菜蛾(Plutella xylostella)\,柳蓝叶甲(Plagiodera versicolora)幼虫均无毒力。H42、H43、H56、H60对埃及伊蚊(Aedes aegypti)\,斑须按蚊(Anopheles stephensi)及尖音库蚊(Culex pipiens)亦均无毒;H62对埃及伊蚊无毒,但对尖音库蚊与斑须按蚊有低毒。     

苏芸金杆菌的一个新变种——云南变种

113菌株是从罹病致死的斜纹夜娥(prodenia litura Fabrieius)幼虫体上分离出来的产晶体芽孢杆菌,其形态、生理、生化及血清学反应与现在已知的苏芸金杆菌的各个对比菌株有别,是一个新变种,定名为苏芸金杆菌云南变种(Bacillus thuringiensis Var·yunnanensis)。     

苏芸金杆菌的质粒检测及载晶体蛋白合成基因的质粒在不同菌株间的传递

分析了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)7个变种19个野生菌株及无晶体(sp+cr-)和无芽孢(sp-cr+)突变株的质粒图型,证实了苏芸金杆菌的质粒组成既有变种的特异性,亦有菌株的特异性。载有晶体蛋白质合成基因的质粒,B. thuringiensis var．Kurstaki HD-191 菌株可能为42和50Mdal,B．Thuringiensis var. aizawai HD-282菌株为47Mdal, B．Thuringiensis var．Israelensis IPS-82菌株为57Mdal的质粒,而B．Thuringiensis var. wuhanensis 140 菌株的此种基因则可能不在质粒上而在染色体中。HD-191载晶体蛋白合成基因的质粒以很高频率被传递给其无晶体突变株HD-1并在后者细胞中表达。B. thuringiensis var. israelensisIPS-82菌株和 B．Thuringiensis var. kurstaki 无晶体突变株HD—1之间载晶体蛋白合成基因质粒的传递未能成功,提示可能存在着不相容性的障碍。     

赤松毛虫的一种新的质型多角体病毒

在山东省沂南县的赤松毛虫(Dendrolimus spectabilis Butler)中发生了多角体病毒病的自然流行。经流行病学研究,其病征有萎缩和液化两种不同类型,以前者为主。在林间喷洒死虫浸出液作为微生物杀虫剂,可使赤松毛虫流行病反复发生,长时间有效地控制赤松毛虫为害。山东省已应用飞机喷洒这种杀虫剂,在大面积防治试验中取得显著效果。     

通过原生质体融合产生的苏云金杆菌的新菌株

用苏云金杆菌以色列变种Bacillus thuuringiensis subsp.israelensis和苏云金杆菌库斯塔基变种Bacillus thuringuensis subsp.kurstaki HD-1进行了PEG诱导的原生质体融合实验,探讨了影响原生质体形的几个条件。用抗性标记对融合子进行了选择,在198株融合子中,有17株稳定传代10次以上。它们具有两个亲本菌株所具有的一些特性。在融合子中,BTI比HD-1稳定。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究比较了稳定融合子的晶体毒素成分,观察到了代表HD—l毒素蛋白和BTI毒素蛋白的带。杀虫试验结果表明,融合形成的杂种菌株具有毒杀文字孑孓和鳞翅目幼虫的能力。     

小菜蛾高效Bt菌株的分离、生化特性及基因型鉴定

从哈尔滨田间采集死亡小菜蛾Plutella xylostella（L.）幼虫,从中分离出10株苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis。对小菜蛾幼虫室内生物测定结果表明,各菌株对小菜蛾幼虫的死亡率均在85%以上,其中DBW902毒力最强,48h的LC50为13.99mg/L。菌株cry/cyt基因检测表明,所有菌株均含有cry1A或cry2A基因,这与其高毒力的特性基本吻合。生化检测与分析表明,菌株DBW904、DBW93、DBW962与已报道的苏云金芽孢杆菌山东亚种B.thuringiensis subsp.shandongiensis的生化特性一致,但是其它菌株的生理生化特性与已报道菌株有区别。     

用原生质体融合技术提高α-淀粉酶稳定性

工业生产上一般都采用物理和化学诱变的方法选育优良菌株,Foder和Schaeffer将种内细菌原生质体融合成功之后,用原生质融合方法育种的报道较多,所得融合子也逐渐应用于工业生产.本研究用产α-淀粉酶活力高的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)生产菌株和活力低、耐热性好的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行原生质融合,选育出耐热高产的α-淀粉酶产生菌.1 材料和方法1.1 菌种Bacillus amyloliquefaciens BF 7658,北京房山交道酶制剂厂生产菌株;Bacillus licheniformis ATCC9789,中国科学院微生物所保藏.     

乳酸乳酸球菌AL2产生的乳链菌肽的提纯和性质

用NaCl饱和的乳酸乳酸球菌(Lactococcus lactis subsp. Lactis)AL2发酵液经正丙醇提取和CM-Sephadex C-25柱层析,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的乳链菌肽组分,比活力从24427IU/mg提高到39865IU/mg,活力回收为41.7％。Α—胰凝乳蛋白酶可使乳链菌肽丧失活性;在低pH条件下,乳链菌肽对热较稳定;对许多革兰氏阳性菌有强烈抑制作用,而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌没有作用。     

中国苏云金杆菌工作的主要成就

<正> 苏云金杆菌是目前国际上生产量最大并成功地用于防治农、林、贮粮害虫和一些卫生害虫的微生物杀虫剂。我国早在50年代末、60年代初就已开始研制、应用工作,经历了30多年曲折的发展过程。为了更有效地控制害虫危害,保持生态平衡和减少环境污染,苏云金杆菌先后被国家列入“863”计划,“七五”、“八五”重点科技攻关项目和部、省级的重点课题,近年还列为国家“火炬计划”和“技改”计划及全国推广项目。近10多年来它的研究、生产、应用都获得较大的进展,主要有以下几个方面:     

THE INSECTICIDAL ACTIVITY OF SUBSTANCES RELATED TO THE PYRETHRINS

The toxicity as contact insecticides of the esters of (±)-3-methyl-2-allyl-cycfopent-3-en-4-ol-i-one with the natural (+ )-trans and with synthetic (±) -cis-trans-chrysaii- themum monocarboxylic acids has been compared with that of the natural pyrethrins. The comparison was carried out on five species of test-insects.
It was found that the figure for both the absolute and the relative toxicities of these compounds varied with the species used as test-subject.
The factors involved in this variation are discussed. The extremes of variation of relative toxicity for the compounds with the natural acid were from about one-eighth as toxic as the pyrethrum standard when the aphid Macrosiphum solanifolii was used as test subject to nearly four times as toxic as the standard with the larvae of the moth Plutella maculipennis. The fully synthetic material varied from about one-sixteenth as toxic as the standard to Macrosiphum solanifolii to nearly twice as toxic to the larvae of Plutella maculipennis. The compound with the natural acid was approximately twice as toxic as the fully synthetic material to three of the insect species, but the fully synthetic material was considerably more than half as toxic as the partially synthetic to the fourth test-species. It is pointed out that while it is widely recognized that large differences in relative toxicity may occur when the effect of chemicals of widely different structure and mechanism of action are compared on a number of different test-species, the fact that these differences may also occur with related chemicals with, presumably, a similar mechanism of action, has not been clearly stated.
Even when the differences in relative toxicity are taken into account, the two synthetic pyrethrin-like esters still show high insecticidal activity.
It seems reasonable to suppose from the results that economic commercial synthesis of pyrethrin-like insecticides is not impossible.     

替代宿主增殖松毛虫质型多角体病毒的比较研究

银纹夜蛾幼虫(Argyrogramma agnata)对松毛虫CPV(DpCPV)十分敏感,本文对两种不同的宿主增殖松毛虫CPV作了比较,电镜证实用替代宿主增殖的DpCPV与原毒株多角体(CPB)和病毒粒子的形态完全一致。3%PAGE分析二者的RNA图谱基本一致,有大小相同的2.98×10     

白僵菌在松毛虫体上宿存侵染的电镜扫描观察

通过扫描电子显微镜,观察了几种人工的或自然的环境下白僵菌在马尾松毛虫体上的宿存与侵染过程,描述了分生孢子的萌发和菌丝形成中的形态变化,讨论了致病效果与环境的关系,对林间应用提出了建议。结果表明：在２５℃和９５％的温湿度条件下,分生孢子萌发较快,萌发率和侵入率较高;白僵病的发生需要８５％以上的相对湿度,这是自然环境中防治效果的制约因子;在松毛虫每年发生２～３代的我国林区,冬季放菌做法不宜提倡,６月份放菌更为适宜。     

斑点叉尾鲖源杀鲑气单胞菌无色亚种分离鉴定及药敏特性

研究从患溃疡症斑点叉尾鲙中分离到一株致病性菌株ry01, 生理生化鉴定和16S rDNA基因序列分析表明ry01株为鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp. achromogenes)。人工感染该菌后发病鱼表现为与自然发病类似症状, 且从组织中再分离的细菌特性与原感染菌相同。腹腔注射后该菌株对斑点叉尾鲙的半数致死量为4.17×106 CFU/mL。菌株ry01对强力霉素及左氧氟沙星等高度敏感, 为斑点叉尾鲙该病防控提供了理论依据。     

松树受害后一些化学物质含量的变化及其对马尾松毛虫种群参数的影响

通过探讨松树受害后松针的一些化学物质变化与马尾松毛虫Dendrolimus punctatus 种群参数的相互作用关系。结果表明：松针被马尾松毛虫为害后,针叶的氨基酸含量减少、单宁和总酚含量增加;马尾松毛虫取食被害松针后,体内的2种解毒酶(过氧化氢酶、羧酸酯酶)活性增加,其种群参数表现出发育历期延长、体重减轻、死亡率增加、生殖力下降的变 化。     

球孢白僵菌胞外蛋白酶及其与毒力关系的研究

用明胶琼脂平板法和双层纸碟法均可简便快速地测定球孢白僵菌的胞外蛋白酶产生水平,其产酶量与其对马尾松毛虫的毒力呈明显的线性关系。     

松毛虫的杂交遗传试验

本文报道了马尾松毛虫Dendrolimus punctatus Walker和油松毛虫Dendrolimus tabwlaeformis Tsai et Liu杂交遗传试验的部分结果.研究表明,不论从食性、形态特征、混合配对和单个配对试验的结果来看,油松毛虫和马尾松毛虫应为同一物种.其形态学特征,尤其是外生殖器解剖构造的差异,并未反映出种的特性和种间的生殖隔离.油松毛虫与马尾松毛虫杂交,无论正交或反交,都能产生有生育力的F₁代,F₁代自交产生F₂代,F₂代自交产生F₃代.但考虑到油松毛虫在我国的分布与油松的分布大体相一致,它与马尾松毛虫在形态学和生态学等方面多少存在着一些差异,因此可认为它是马尾松毛虫的一个亚种,可称为Dendrallmua punctatus tabulaeformis(Tsai et Liu).     

苏云金芽孢杆菌的一个新亚种(Btsubsp.sinensis)

198 9年自云南昆明市石林的红棕壤中分离到数株苏云金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎ ｓｉｓ,Ｂｔ)菌株[1] ,对其中的一株ＹＫ30 0 4进行了生物学特性、杀虫特性研究及分类鉴定。1　材料与方法1.1　供鉴定的Ｂｔ菌株由云南昆明市石林的红棕壤中分离的苏云金芽孢杆菌ＹＫ30 0 4菌株。1.2　标准Ｂｔ菌株血清型Ｈ1 Ｈ4 1、Ｈ4 4 Ｈ55及Ｈ57 Ｈ69标准Ｂｔ菌株由法国巴斯德研究院ＤｒＬｅｃａｄｅｔ提供 ,其余为本实验室保存。1.3　生物测定用昆虫小菜蛾 (Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ) 3龄幼虫 ;斜纹夜盗蛾 (Ｐｒ…     

球形芽孢杆菌C3-41二元毒素基因在苏云金芽孢杆菌以色列亚种中的克隆和表达

球形芽孢杆菌C3-41是我国分离的一株对蚊幼虫有毒杀作用的高毒力菌株,对库蚊、按蚊幼虫的毒性高于2362菌株,Southern杂交证明C\-3\|41总DNA中35Kb HindIII片段上带有419和514kD二元毒素基因,该片段由3479个核苷酸组成,核苷酸序列同2362菌株的二元毒素基因序列完全相同。含二元毒素基因的重组质粒pCW\|1和pCW\|2能在大肠杆菌中表达产生二元毒蛋白,但表达量低,重组子杀蚊毒性低。无晶体型苏云金芽孢杆菌以色列亚种重组子在其芽孢形成中能产生以晶体形式存在的二元毒素蛋白,其全发酵液和纯化晶体蛋白的杀蚊活性与C\-3\|41相近。