鱼类同工酶图谱分析中值得注意的若干情况

鱼类同工酶图谱分析中值得注意的若干情况张子平，王艺磊，张海萌（国家海洋局第三海洋研究所厦门３６１００５）（厦门水产学院）关键词鱼类，同工酶，图谱分析随着鱼类同工酶研究水平的提高，以及采用这一方法所研究的问题之不断深入拓展，象过去那样仅简单地根据电泳图...     

鱼眼晶体酯酶同工酶电泳分析

关于鱼类同工酶,国内外已有研究。近年来对鱼眼同工酶的研究更引起人们的重视。藤尾,芳久以LDH同工酶为指标研究鱼类遗传基因进化时,指出鰤鱼及秋刀鱼的眼睛具有特异的E_4同工酶。朱兰菲等测定了20种鲤科鱼的心脏、脑、肌肉及晶状体LDH同工酶,证明晶状体的酶带清晰、稳定,能代表各种鱼的LDH表型。 酯酶是一种广谱底物的水解酶.其催化反应是,以萘乙酸酯为底物的同工酶属于羧基酯酶类,一般为单链或二聚体蛋白质。由于酯酶同工酶是直接的基因产物,故可作为遗传、生化指标。有关鱼晶状体酯酶同工酶的研究,目前国内尚少报道,本试验所进行的鱼晶状体聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,旨在探讨不同科属鱼类晶状体酯酶同工酶有无差异,为鱼类分类生物化学指标提供参考。     

鱼类乳酸脱氢酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

本文对用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分离鱼类乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶的技术进行了研究。结果表明：该方法优于淀粉凝胶电泳及琼脂糖凝胶电泳分析鱼类ＬＤＨ同工酶,具有较高的分辩率。     

金鱼同工酶的发生遗传学研究——Ⅲ.金鱼同工酶基因座位的加倍与多倍性

以鲫鱼和金鱼为材料,用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶体系作为基因标志,从检测同工酶的多重组合形式来研究基因的加倍与演化。对彩鲫与金鱼G6PD和LDH同工酶的分析结果表明,它们均具有与四倍体鱼类相应的谱带。因而说明了金鱼的G6PD和LDH同工酶基因座位的加倍与染色体的多倍性有关,为金鱼是四倍体的假说提供了证据。而对MDH同工酶的分析却得到了与二倍体鱼类相同的谱带数。这可能与加倍基因发生突变而不表达有关。     

吉富罗非鱼不同组织中4种同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了吉富罗非鱼肌肉、肠、肝、胰、胃不同组织中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、蛋白酶同工酶组成。结果表明:吉富罗非鱼的这4种同工酶均有明显的组织特异性。EST在肌肉组织中表达量较低,EST-1在肠中表达较高,胰、肝组织中均由6种EST同工酶谱带组成;LDH-5在肌肉组织中含量较高;SOD在肝、肌肉组织中表达较高;肠、肝蛋白酶活性较高,由5种同工酶谱带组成,胰蛋白酶含有一种同工酶。该研究为杂交鱼类的酶工程、生化遗传研究提供理论基础,进一步促进吉富罗非鱼这一优良养殖品种的开发和利用。     

寡齿新银鱼同工酶及其与幼态持续的关系

采用聚丙烯酰胺垂直板状连续电泳方法,对幼态持续(neoteny)的寡齿新银鱼(Neosalanx oligodontis Chen)13种同工酶的18个位点进行研究,并进行乳酸脱氢酶热变性实验。结果表明ADH、GOT、α-GPDH、LDH、MDH、ME、POX和SOD表现出一定的幼态持续的特征,其中LDH由A、B两个位点编码,C位点不表达,是因为个体发育早期C基因尚未表达时发生幼态持续的结果。ES和IDH无幼态持续特征。α-AMY、FUM和CAT因数据不足,未进行分析。寡齿新银鱼同工酶基因表达中幼态特征的表现为研究鱼类幼态持续的产生机制和遗传基础提供线索。     

团头鲂的胚胎及成体组织中八种同工酶系统的研究

用垂直的淀粉凝胶电泳方法分析了胚胎发育阶段(0—105小时)和成体6种组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PD)、醇脱氢酶(ADH)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、酯酶(EST)和碱性磷酸酶(AKP)等8种同工酶系统的酶带。共约有23个基因座位在其胚胎发育期和成体组织中表达。所分析的大多数同工酶在团头鲂个体发生过程中表达的情况大致可分为3种类型：①胚胎发育期间持续存在的同工酶类,它们在成体组织中无特异性分布;②到胚胎发育后期才开始表达的同工酶类,它们往往和特定的组织或器官的形态发生或机能分化紧密相关,并在成体组织中呈特异性分布;③在成体组织中都没有被发现而只在胚胎发育期所特有的同工酶。团头鲂的MDH同工酶类之间以及它们和G6PD同工酶活性变化之间存在着相关性,二者可能存在共同的调控机制。与许多其他鱼类不同,团头鲂的GDH同工酶在整个胚胎发育过程中都有活性,但在其成体组织中无特异性分布。基因调控系统的时空精确性是保证团头鲂胚胎发育正常代谢活动的必要条件。     

泥鳅与大鳞副泥鳅正反交子代遗传变异的RAPD分析

我国利用远缘杂交方法在鱼类杂交优势利用上已经取得了不少成果[1 ] 。不仅如此 ,不少学者还通过胚胎发育形态学、染色体组型、同工酶等生化表型的研究对远缘杂交中的核质关系、基因表达、不亲和性原理进行了广泛探索[2— 5] 。本文在泥鳅 (ＭｉｓｇｕｒｎｕｓａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓＣａｎｔａ)与大鳞副泥鳅 (Ｐａｒａｍｉｓ ｇｕｒｎｕｓｄａｂｒｙａｎｕｓＳａｕｖａｇｅ)正反交子代染色体组型、胚胎发育形态变异以及部分同工酶谱分析等前期工作基础上 ,运用随机引物扩增多态ＤＮＡ(ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍ…     

稀土元素对鲤鱼肝胰脏多种酶及MDA含量的影响

目的：探究稀土元素对鱼类肝胰脏抗氧化性及淀粉酶的长期影响。方法：将鲤鱼暴露于0.01、0.1、2、5mg/L的La^3＋溶液中120d,研究分析了La^3＋对鲤鱼肝胰脏POD和SOD活性,MDA含量及SOD和AMY同工酶的影响。结果：表明0.01、0.1、2、5mg/LLa^3＋组与对照组相比,镧对肝胰脏中MDA含量影响不显著,对SOD和POD的活性却表现出了显著抑制（p〈0.05或p〈0.01）。同工酶电泳实验结果表明：鲤鱼肝胰脏SOD酶带,对照组有3条,但处理组各有1条,且酶带亮度弱于对照;0.01、0.1mg/L组La^3＋导致AMY酶带亮度较对照组明显增强,且新增1条酶带。但2、5mg/L组,镧对AMY同工酶影响并不显著。结论：La^3＋能使肝胰脏SOD、POD活性减弱,能使SOD、AMY同工酶酶谱发生显著变化。     

鲿科八种鱼类同工酶和骨骼特征分析及系统演化的探讨(鲇形目:鲿科)

本文对鲿科Bagridae共4属8种鱼类进行了骨骼系统的研究,并对8种鱼的同工酶谱型进行了分析比较。应用分支系统学原理初步推导出鲿后两者之间。演化趋势表现为身体渐扁,逐渐平展,口渐阔,尾鳍从圆形到叉状进化。对鲿科8种鱼的鳍、肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼的晶状体和脑等7种组织4种同工酶（LDHMDHESADH）的谱型分析表明,8种鱼之间的亲缘关系与形态学特征分析结果相吻合,说明了生化分类和经典分类的一致性。