菜心中SDS-PAGE向负极泳动的富含苯丙氨酸的蛋白的发现

在提取乙醇酸氧化酶同工酶的过程中, 发现了一种在SDS变性下向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白.在3次重复实验中, 均可以从SDS-PAGE后的负极缓冲液中获得这种蛋白, 其碱性与酸性氨基酸残基的比例分别高达1.46、1.28和0.89,而苯丙氨酸含量分别高达为60.00%、65.62%和62.30%.其余氨基酸残基的含量则和普通蛋白的相近似.由于该富含苯丙氨酸的碱性蛋白是水溶性的, 碱性氨基酸残基应主要分布在蛋白的表面,而苯丙氨酸则组成一个强疏水内核.     

淋巴因子的研究——Ⅰ.正常人淋巴因子的分离及鉴定

本文作者对正常人外周血淋巴细胞的大量分离和激活条件以及淋巴因子的分离提纯进行了研究,并获得一定量的淋巴因子(不含正常血清蛋白成分或外源凝集素)。通过琼脂糖电泳、连续浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦和交联葡聚糖凝胶过滤证明淋巴因子是一组在泳动速度、分子量、等电点等方面都极不均一的蛋白质。用淋巴因子制备的多价抗血清进行线状免疫电泳证明:正常人少量全血经PHA或CbnA激活6～24小时,在去血球的上层液中,在pH8.6向正极和向负极泳动的某些淋巴因子生成量均较对照组明显增多,这种差别有可能在一定程度上反映T淋巴细胞的功能。     

淋巴因子的研究——Ⅰ.正常人淋巴因子的分离及鉴定

本文作者对正常人外周血淋巴细胞的大量分离和激活条件以及淋巴因子的分离提纯进行了研究,并获得一定量的淋巴因子(不含正常血清蛋白成分或外源凝集素)。通过琼脂糖电泳、连续浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦和交联葡聚糖凝胶过滤证明淋巴因子是一组在泳动速度、分子量、等电点等方面都极不均一的蛋白质。用淋巴因子制备的多价抗血清进行线状免疫电泳证明:正常人少量全血经PHA 或ConA 激活6～24小时,在去血球的上层液中,在pH8.6向正极和向负极泳动的某些淋巴因子生成量均较对照组明显增多,这种差别有可能在一定程度上反映T 淋巴细胞的功能。     

在包头地区汉族中检出的一种快泳血红蛋白——血红蛋白包头(Hb Paotow)

1.在包头市约1,000名汉族中,发现一例快泳异常血红蛋白。2.家族调查结果表明,这种血红蛋白为遗传变异产物。3.分子杂交结果证明其为β链异常。4.这种血红蛋白在碱性pH下的电泳速度,是位于HbA与HbH之间。5.进行酸性琼脂电泳时,它泳向阴极,速度近似HbF。6.这种血红蛋白的紫外区吸收光谱,与HbA及HbF都不一样。7.鉴于它与已知血红蛋白都不相同,故命名为血红蛋白包头(Hb Paotow)以示区别,     

在包头地区汉族中检出的一种快泳血红蛋白——血红蛋白包头(Hb Paotow)

1.在包头市约1,000名汉族中,发现一例快泳异常血红蛋白。2.家族调查结果表明,这种血红蛋白为遗传变异产物。3.分子杂交结果证明其为p链异常。4.这种血红蛋白在碱性pH下的电泳速度,是位于HbA与HbH之间。5.进行酸性琼脂电泳时,它泳向阴极,速度近似HbF。6.这种血红蛋白的紫外区吸收光谱,与HbA及HbF都不一样。7.鉴于它与已知血红蛋白都不相同,故命名为血红蛋白包头(Hb Paotow)以示区别。     

细菌L型和一些肠道杆菌的电动力学研究

用电泳法研究了细菌Ｌ型及其亲代细菌型和一些肠道杆菌的电动力学特征。伤寒杆菌Ｌ型和葡萄球菌Ｃｏｗａｎ株Ｌ型的等电点与其亲代细菌型不同;普通大肠杆菌、普通变形杆菌的等电点与革兰氏阳性菌相似;白喉杆菌Ｌ型和葡萄球菌Ｗｏｏｄ株Ｌ型的等电点与其亲代细菌型无显著差异。电泳可使结晶紫染色的细菌脱去结晶紫,亦可使染色后经乙醇处理的普通大肠杆菌和伤寒杆菌脱色并在电场作用下泳动,但不能使染色后经乙醇处理的葡萄球菌脱色或泳动,痢疾杆菌、伤寒杆菌和肠道致病性大肠杆菌的等电点不同于普通大肠杆菌和普通变形杆菌;在一定ｐＨ范围内,电泳     

超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶在凝胶板上同时显色的方法

本文报道一种能使乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶在同一块电泳凝胶板上经同一种染色液一次处理达到同时显色的方法。显色结果,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,两者一目了然。而且前者泳动慢,后者泳动快,两种区带互不重迭,不发生干扰,结果可靠。此法不需光照,显色效率高,有利于同一样品同时进行此两种同工酶的电泳分析,达到一举两得的效果。     

淋巴因子和干扰素

由大肠杆菌得到了N一末端含Cys--Tyr一Cys的纯的重组体人干扰素-y(r IFN一y).这种重组蛋白在SDS一PAGE上出现两条泳动速度很相近的电泳     

菠菜和水稻细胞色素b-559的分离纯化及其光谱性质研究

采用一种快速简捷的方法从菠菜(Spinacia oleracea L.)和水稻(Oryza sativa L.)中分离纯化了光系统Ⅱ反应中心内的细胞色素b-559,并且研究了其低温可见光区荧光光谱、室温紫外区荧光光谱、吸收光谱以及电泳特性.该方法的主要特点:1.以放氧核心复合物为起始材料以避免其他细胞色素的干扰;2.选用DEAE-Sephacel为层析介质,用等度洗脱除去杂蛋白和叶绿素;3.用同一介质不同条件去除过量的去垢剂.从两种植物中分离纯化的Cyt b-559具有相似的吸收光谱,在非变性电泳中有相同的泳动特征.用修订的适用于分析小蛋白的Tricine-SDS-PAGE证明,从两种植物中分离得到的Cyt b-559都是由两个多肽亚基组成,它们的表观分子量分别为9 kD和4 kD.低温荧光光谱的结果表明,Crt b-559的荧光激发峰位为413nm和439 nm,荧光发射峰位在563 nm和668 nm,首次证明Cyt b-559可以发出荧光并将电子传递给叶绿素.首次通过Cyt b-559的紫外荧光光谱证明Trp残基位于该蛋白的疏水跨膜区内.     

微凝胶电泳法检测照射后单个凋落胸腺细胞的 DNA 变化

胸腺细胞受照后发生凋落——一种与坏死不同的主动性细胞死亡.为了检测单个凋落细胞的 DNA 变化,我们建立了微凝胶电泳法.受照的大鼠胸腺细胞培养后用本法进行电泳,结果可见细胞被分为二群,一群细胞的 DNA 几乎没有泳动,另一群细胞的 DNA 则泳动成大小相似的水滴或慧星形状.DNA 泳动细胞的比例与细胞死亡的比例一致.实验说明凋落细胞的 DNA 分解十分迅速,一旦开始就很快达到一定程度.     

粉锈宁在菜心离体快速繁殖中的应用

应用植物生长延缓剂粉锈宁于菜心离你快速繁殖,试验结果表明,低浓度（1—5μmol／L）的粉锈宁可以明显提高菜心茎尖继代培养时芽的繁殖系数．同时发现低浓度粉锈宁可降低试管苗的玻璃化程度,促进叶片数增加,改善试管苗生长状况,有利于壮苗培育．适当提高粉锈宁浓度还具有促进试管苗生根的作用．粉锈宁可作为一种优良的植物生长调节剂用于菜心离体快速繁殖。     

快速碱化因子基因BcRALF在菜心中的克隆及序列分析

快速碱化因子是近年来新发现的一种植物多肽类信号分子,广泛存在于高等植物中。通过已得到的普通白菜的快速碱化因子基因BcMF14（GenBank序列登录号EF523516）的核苷酸序列,在其编码框两侧设计引物,从菜心中克隆出该类信号分子基因,命名为BcRALF（登陆号：GU086228）。序列同源比对表明该基因与花椰菜、拟南芥等的快速碱化因子基因有很高的相似性,证明BcRALF属于快速碱化因子家族。蛋白质特征预测以及蛋白序列结构分析发现BcRALF蛋白包含有多个生物活性位点,符合其作为多肽类信号分子类蛋白的特征。     

不结球白菜BcMPK4基因的分离及表达

为了进一步探讨植物MAPKs(mitogen-activated protein kinases)在植物防卫中的作用,该研究从不结球白菜抗病品种‘苏州青’中克隆到一个抗核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)相关基因,命名为BcMPK4(DDBJ登录号AB557751)。该基因核苷酸序列全长1 334bp,编码373个氨基酸,与已克隆的MPK4基因有不同程度的相似性。系统进化树分析表明,该基因在不同物种之间具有保守性。基因组DNA杂交表明,BcMPK4可能属于一个较小的多基因家族,属组成型表达。实时定量PCR检测表明,核盘菌能够诱导不结球白菜BcMPK4基因的转录表达;BcMPK4基因在不结球白菜叶片中的表达特征说明它可能参与寄主对核盘菌的抗性。     

白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证

BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜 (Brassica campestris ssp. chinensis var. communis, syn. B. rapa ssp. chinensis var. communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据BcMF4基因的cDNA序列设计两对特异引物, 从普通白菜花蕾cDNA中扩增出两个片断后连接至双元载体pBI12l中, 得到了RNAi (RNA interference) 植物表达栽体pBI-B4R, 并导入了农杆菌LBA4404菌株中; 通过组织培养途径转化菜心(B. campestris ssp. chinensis var. parachinensis), 72.2%的菜心转基因植株中45.8%的花粉为缩小而空瘪的畸形, 而且这些植株的花粉离体萌发率降低至23.7%; Northern杂交显示, 转基因植株的花粉畸形, 是由于BcMF4基因片段的插入使BcMF4基因的表达受到了抑制。结果表明, 采用RNAi技术下调了BcMF4基因的表达, 导致了菜心转基因植株部分花粉的不育, 证明BcMF4基因在普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育中起着重要作用。     

细胞质雄性不育白菜败育过程中激素和多胺含量的变化

通过对胞质雄性不育白菜败育过程中叶片和花药组织中IAA、ZRs、GAs、ABA和Put、Spd、Spm含量及IAA／ZRs比值的变化研究,发现IAA、GA、多胺尤其是Spd含量的小足,ZRs、ABA的盈积以及IAA／ZRs比值的失衡导致了白菜雄性不育系小孢子的败育。     

Effects of Cd,Pb, Zn,Cu-Resistant Endophytic Enterobactersp. CBSB1 and RhodotorulaSp. CBSB79 on the Growth and Phytoextraction of Brassica Plants in Multimetal Contaminated Soils

To survey the effects of endophytic Enterobacter sp. CBSB1 and Rhodotorula sp. CBSB79 resistant to Cd²⁺, Pb²⁺, Zn²⁺, and Cu²⁺ on the growth and phytoextraction of Brassica, the endophytes were isolated by surface- sterilized methods and characterized. The CBSB1 significantly increased 44.2% of the dry weight of Brassica napus in the multimetal contaminated soil (P < 0.05) and showed no effect or declined the dry weight of B. alboglabra, B. campestris ssp. chinensis var. cummunis, B. campestris ssp. chinensis var. utilis cv. Youqing12, B. campestris ssp. chinensis var. utilis cv. Lvbao701 plants. The dry weights of B. napus, B. campestris ssp. chinensis var. utilis, and B. alboglabra showed a significant increase when the CBSB79 was inoculated (P < 0.05). In general, inoculation with bacteria and yeast did not greatly alter the metal concentration in plant tissues. Compared to Enterobacter sp. CBSB1, the yeast Rhodotorula sp CBSB79 showed higher potentials to improve extraction efficacy of Cd, Pb, Zn, and Cu by Brassica seedlings in the field.     

雄性不育相关基因msLTP的反义RNA验证

根据普通白菜雄性不育相关的脂质转移蛋白基因(msLTP)的cDNA序列设计引物,从普通白菜花蕾的cDNA中扩增出312bp的片段,然后将该片段连接至双元载体pBI12l中,得到反义RNA植物表达载体并导入农杆菌LBA4404菌株中,通过农杆菌介导法转化菜心;利用PCR和Southern blot分析检测得到了25株转基因植株,转基因植株的花粉部分畸形或空瘪,花粉离体萌发率为38.56%,较未转化植株的萌发率(76.32%)降低了37.76个百分点.研究表明,反义RNA技术使msLTP基因沉默而导致了菜心转基因植株的部分花粉发育不良,说明msLTP基因在普通白菜和菜心等花粉发育中具有重要作用.     

传粉导致的转基因白菜与其近缘种属材料间的基因流动

从形态、染色体及分子水平上证实,转基因不结球白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．utilis Tsen et Lee)中编码除草剂Basta抗性的bar基因能在田间条件下,经自然传粉,以较高频率侵入芜菁(B．campestris ssp．rapifera)、结球白菜(B．campestris／sssp．pek／nens／s)和不结球白菜(B．campestrs ssp．ch／nens／s)的基因组中,也能少量侵入同属异种的甘蓝型油菜(B.napus)基因组中;在温室人工辅助授粉条件下,除在上述种中的基因漂移率提高外,bar基因尚能以一定频率侵入同属的黑芥(B．nigra)、埃塞俄比亚芥(B．car／nata)、芥菜(B．juncea)基因组中,但始终未能得到转基因白菜与结球甘蓝(B．oleracea)、萝卜(尺．sativus)的杂种。转基因白菜与十字花科的7种常见杂草经温室人工辅助授粉,也均未得到抗性杂种。     

白菜高效再生系统的建立及其不定芽发生的组织学观察（简报）

白菜(Brassica campestris Lssp．chinensis Makino)起源于欧洲的野生芸薹,有许多变种和类型,是我国尤其是长江流域及南方各省普遍栽培的重要蔬菜种类之一,在农业生产中占有重要的地位。由于白菜的植株再生频率同其他芸薹属作物相比较低,因此,影响了基因工程技术在白菜品种改良上的应用。虽     

少花龙葵种子萌发特性及其果汁对小白菜种子萌发的影响

对少花龙葵的成熟果实采用3种采种方式,于室内测定水分、温度、光照条件对不同采种方式所得种子的发芽影响,并就少花龙葵的果汁对小白菜种子萌发的影响进行分析.结果表明:(1)少花龙葵种子于25℃恒温下浸种8 h后吸水达到饱和,其适宜发芽温度为20℃～25℃,萌发受黑暗抑制;(2)3种采种方式中以捣烂果实后种子不从果实取出并不清洗而直接晾干的采留种方式最佳;(3)少花龙葵果汁原液和其5～10倍稀释液抑制广东小白菜种子发芽,20～50倍稀释液则促进其萌发,表明少花龙葵果汁具有化感效应.