急性盐度胁迫对军曹鱼稚鱼渗透压调节的影响

研究了环境盐度急性胁迫对军曹鱼(Rachycentron canadum)稚鱼鳃Na⁺-K⁺ATPase(NKA)活性及血清渗透压、Na⁺、K⁺和Cl^-离子调节的影响.结果表明:将稚鱼从盐度37中直接转移至盐度0、5、15、25、37（对照）和45的水体中,12 h后仅盐度0处理出现死亡(死亡率100％).各处理鳃NKA活性和血清渗透压在最初3 h内出现一定波动,随后变化平稳.试验结束时(12 h), NKA活性与盐度梯度呈“U”型分布,盐度5处理酶活性显著高于其它处理(P<0.05),盐度15处理活性最低,而各处理的血清渗透压大小(293～399 mOsmol·kg^-1)与盐度呈正相关;在3～12 h内稚鱼血清Na⁺和Cl^-浓度随盐度升高而升高,但增幅较小,血清K⁺浓度则与盐度呈负相关;12 h稚鱼的等渗点为328.2 mOsm·kg^-1,相当于盐度11.48,而Na⁺、K⁺和Cl^-等离子点分别为155.2、6.16和137.1 mmol·L^-1,分别相当于盐度10.68、20.44及8.41.军曹鱼在生理上具有广盐性鱼类的“低渗环境高NKA活性”特征,有较强及迅速的渗透压和离子调节与平衡能力.     

不同盐度下条石鲷胚胎及卵黄囊仔鱼的形态变化

为了研究盐度对条石鲷(Oplegnathus fascltus)胚胎及卵黄囊仔鱼生长发育的影响,将条石鲷的受精卵置于不同盐度的水体中, 观察盐度胁迫下条石鲷胚胎的沉浮情况、卵径、油球径、孵化率、畸形率, 以及孵化后卵黄囊仔鱼的形态变化和营养物质的消耗状况。结果表明:条石鲷受精卵在盐度25(含25)以下的水体中为沉性, 在盐度30(含30)以上的海水中全部漂浮于水表层, 在对照组盐度26的水体中大部分胚胎浮在水上层;在水温22.5 ℃～24.0 ℃的条件下, 条石鲷受精卵经24～30 h可孵化成仔鱼, 盐度对孵化时间影响不显著(P＞0.05);盐度为20～50都能孵出仔鱼, 但孵化率和畸形率因盐度不同而有显著差异;综合分析表明,条石鲷受精卵孵化的适合盐度范围为25～35,理论上的最适孵化盐度范围为28.5～30.5;受精卵卵径与孵化盐度呈反比,盐度与卵黄囊被吸收程度呈正比,与全长和体高呈反比,油球径不因盐度不同而改变。     

饵料系列对军曹鱼仔鱼生长、消化酶活力和体成分的影响

饵料是鱼类早期发育最重要的条件之一,并且随着个体发育,饵料类别不断变化。为了评定各种饵料的效果并筛选得到军曹鱼仔鱼早期发育阶段适宜的饵料组合,进行了本实验。军曹鱼仔鱼在750L桶中孵出并暂养2d,然后在水泥池中培育4d（3—6日龄）,并投喂轮虫;在第7日龄,将240尾仔鱼随机平均分配至12个70L桶中,共分4组,每组3桶;7—15日龄,4组仔鱼分别投喂轮虫、卤虫无节幼体、桡足类和桡足类投;16—42日龄,分别投喂轮虫、卤虫无节幼体、桡足类和鱼糜。第42日龄,将全部仔鱼取样、称重并于-80℃保存备用。鱼体匀浆、离心后的上清液作为粗酶液用以测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶活力,还测定了粗蛋白、粗脂肪等主要体成分,并统计了生长指标。结果表明：（1）组IV的生长表现最佳;（2）组III的成活率最高;（3）饵料对三种酶的活力和体成分都有极显著的影响;（4）组III的蛋白酶活力、组I的淀粉酶活力和脂肪酶活力最高,尤其是组I的淀粉酶活力比其他各组高出6.8—11.9倍;（5）各组鱼体的粗蛋白含量均较相应饵料的低,而粗脂肪含量则比饵料的高。因此,可以认为：仔鱼长期饥饿时,消化酶可能存在补偿性分泌,并优先利用糖类和脂肪作为能源;军曹鱼仔鱼对脂肪的沉积效率较蛋白高。     

军曹鱼催乳素受体PRLR1基因的克隆及其在不同盐度条件下mRNA表达差异

催乳素受体通过结合催乳素,能调节鱼体渗透压。为研究催乳素受体1(PRLR1)在高盐水体和低盐水体中对军曹鱼(Rachycentron canadum)的渗透调节作用,利用cDNA末端快速扩增(RACE-PCR)技术,获得了军曹鱼PRLR1全长cDNA序列。该基因全长为2629 bp,包含1953 bp的开放阅读框ORF,可编码650个氨基酸。氨基酸序列包含了2个纤维连接蛋白3型结构域(FN3)、保守的WS区和box1。采用qRT-PCR技术,检测不同盐度(10‰、30‰和35‰)条件下鳃、肠、体肾中PRLR1基因mRNA表达情况。结果显示,PRLR1基因在军曹鱼的各个组织中均有表达,其中鳃表达量最高,其次是肌肉、体肾和肠,而在胃、脾、脑和心脏中则微量表达。低盐组、正常组和高盐组中,PRLR1基因的表达量均为鳃最高;肠次之;体肾最低。随着盐度提高,PRLR1基因的鳃、肠和体肾组织表达量变化规律均呈逐步下降趋势。以上结果反映了军曹鱼PRLR1在渗透压器官中的功能差异性,说明PRLR1在军曹鱼渗透压调节上具有重要作用。     

北极茴鱼胚胎及仔鱼发育

研究对人工繁殖的北极茴鱼(Thymallus arcticus grubei)胚胎发育开展系统观察, 记录分析其胚胎及仔鱼发育各时期的形态特征, 旨在为北极茴鱼的人工繁育和种质资源保护提供必要的基础数据。结果显示, 北极茴鱼受精卵呈圆球形, 金黄色, 沉性卵, 未吸水卵径(2.46±0.14) mm, 吸水卵径(3.14±0.18) mm, 卵黄质内有多个油球。油球的数量和空间分布在胚胎发育过程中发生了规律性变化。在孵化水温(11.06±0.72)℃, 溶氧8.3—9.8 mg/L条件下, 历时301h完成整个胚胎发育过程,所需积温为3384.84h·℃, 经历合子期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期和孵化出膜7个阶段, 共26个时期。北极茴鱼仔鱼尾鳍、胸鳍的分化和眼色素沉积在受精卵胚胎发育后期就已经完成, 背鳍、腹鳍、臀鳍和脂鳍等在胚后发育过程中相继分化。其初孵仔鱼平均全长为(9.33±0.35) mm, 仔鱼卵黄囊呈圆球形, 18日龄时卵黄囊和油球被完全消耗。其早期发育阶段(0—16日龄)的生长特性符合公式: y=0.0005x⁴–0.0201x³+0.2264x²–0.3773x+9.6102(R²=0.9968)。研究初步阐明了北极茴鱼的胚胎发育和仔鱼发育的时序特征, 为今后的苗种规模化繁育提供了理论基础。     

军曹鱼线粒体DNA全序列与鲹鱼宗系的系统进化

通过长距PCR法测得军曹鱼（Rachycentron canadum）全长16758 bp的mtDNA基因组全序列（GenBank登录号:FJ154956和NC₀11219）,结构组成与其他硬骨鱼类基本一致。Blast获取GenBank数据库的高相似度（score=10055—30213）全序列数据,运用最大简约法、邻位连接法、最大似然法和贝叶斯法重建了军曹鱼与其他鱼类的系统发育关系,并采样用松散分子钟（Uncorrected relaxed lognormal clock）对军曹鱼的起源时间进行了估算,结果表明:（1）军曹鱼与鲯鳅科的亲缘关系较参与分析的其他鱼类更为密切（后验概率为0.997）,推测军曹鱼大约起源于56百万年（Million years ago,Ma）前的古新世塔内特阶（Thanetian）时期;（2）军曹鱼科、鲯鳅科和印鱼科聚为一支,但其置信度较低（后验概率为0.593）,且丝帆鱼科、鲹科分别与鲭科和鲀科鱼类聚为不同分支,因此不支持鲹鱼宗系（Carangoid lineage）为单系群。     

军曹鱼营养需求与饲料研究进展

目前, 养殖鱼类已成为满足人类对水产品需求的主要来源。军曹鱼(Rachycentron canadum)具有生长速度快、肉质细嫩鲜美、营养价值高等特点, 已成为我国南方重要的海水网箱养殖鱼类。然而, 目前饲养军曹鱼仍主要依靠冰鲜杂鱼, 特别是大规格鱼的养殖, 这严重制约其养殖业的健康发展, 研发适合不同生长阶段需要的配合饲料非常必要。文章重点总结了军曹鱼对蛋白质、脂肪、氨基酸、脂肪酸、微量营养素等的需求, 饲料中鱼粉和鱼油替代研究, 饲料添加剂应用及其饲料产业发展现状, 以期为军曹鱼营养需求和配合饲料开发的深入研究提供参考。     

饲料中不同水平n-3 HUFA对军曹鱼生长及脂肪酸组成的影响

以鱼粉、豆粕和酪蛋白为蛋白源,通过调节饲料中的牛油和鱼油水平,使饲料中高度不饱和脂肪酸（n-3HU-FA）的含量分别达到0．60、0．96、1.24、1．56、1．77和2．11％,配制出6种等氮等能的实验饲料,并以此饲料投喂军曹鱼幼鱼（8．3±0、5g）8周。实验结果显示饲料中n-3HUFA水平对实验鱼成活率没有显著影响,但却显著影响了军曹鱼的特定生长率（SGR）。随着饲料中n-3HUFA水平的升高,SGR相应提高,但当饲料中n-3HUFA水平高于1．24％时,各处理之间的生长没有出现显著差异。随着饲料中n-3HUFA水平的升高,肌肉和肝脏中18：1n-9的含量逐渐下降,而22：6n-3的水平相应升高。根据实验结果,当以特定生长率为评价指标时,用折线模型估计出军曹鱼对饲料中n-3HUFA的需求量约为1．49％。     

摄食不同淀粉含量饲料对军曹鱼血清生化指标的影响

实验旨在研究经过10周投喂不同淀粉含量的饲料的养殖实验后, 禁食1d后再投喂对170 g军曹鱼血清生化指标的影响. 饲料以鱼粉为蛋白源, 鱼油、豆油、大豆卵磷脂为脂肪源, 分别添加0%(对照组)、6%、12%、18%、24%和30%的小麦淀粉(以微晶纤维素调平), 养殖实验期间每天饱食投喂2次. 结果表明, 饥饿再投喂饲料后各处理组军曹鱼血糖含量均在(0-5)h升高, 在5h时达到峰值, 并显著高于其他时间组, 摄食5h后开始下降, 7h时基本恢复到投喂前水平; 血清总蛋白含量在不同处理组以及同一处理组的不同时间点上均没有显著差异; 血清中甘油三酯含量在(0-5)h显著升高, 5h后其含量开始下降, 7h时基本恢复到投喂前水平. 其中0%、6%和12%组, 摄食5h后其甘油三酯含量显著高于摄食前与摄食后7h和24h, 而在18%、24%和30%组中, 其含量无显著差异; 0%淀粉组血清中胆固醇含量在(0-2)h显著升高, 2h时达到峰值, 在(2-7)h呈下降趋势, 之后趋于平稳. 其他处理组都是在(0-5)h升高, 5h后开始下降, 在7h时基本恢复到投喂前水平. 18%-30%组, 摄食后5h血清中胆固醇含量显著高于摄食前与摄食后24h. 军曹鱼血清中低密度脂蛋白-胆固醇在(0-5)h显著升高, 摄食5h后其含量开始下降, 7h时基本恢复到投喂前水平, 但各组不同时间点间均无显著性差异. 而血清中高密度脂蛋白-胆固醇含量除在24%添加组中, 摄食后5h显著高于摄食前(0h)及投喂结束后24h处理组, 其他处理之间无显著差异. 综上所述: 170 g军曹鱼禁食再摄入不同含量的小麦淀粉后其血清中血糖含量先升高后降低, 随着饲料中糖添加量的增加, 其峰值先增加, 后趋于平稳. 军曹鱼血清甘油三酯和胆固醇的含量会升高, 对其血清中低密度脂蛋白-胆固醇及高密度脂蛋白-胆固醇影响不显著.       

军曹鱼血液指标及血细胞发生的观察

测定军曹鱼的血液指标,红细胞密度为2．69±0．86×106个/mm3,白细胞密度为1．50±0．09×104个/mm3;血 红蛋白含量为7．42±0．22g/L,红细胞渗透脆性为0．43±0．07g％,红细胞沉降速率为1．18±0．46mm/h。观察军曹鱼 外周血液涂片,可区分出红细胞、血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞,但没有发现嗜酸性粒细胞和嗜碱 性粒细胞。在外周血液涂片观察中还发现了较多未成熟的红细胞和嗜中性粒细胞以及少量正在分裂的红细胞。 血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞在白细胞中所占比例分别为61．20±6．30％,16．60±3．28％,16．00± 3．61％和6．20±3．90％。对肝脏、脾脏、头肾和中肾等四种造血组织进行了涂片观察,军曹鱼的血细胞主要在头肾 和肾脏产生;脾脏是军曹鱼粒细胞发生的另一个场所,而肝脏也具有产生粒细胞和淋巴细胞的作用。     

饲料中不同水平鱼蛋白水解物对军曹鱼稚鱼生长及体组成的影响

设计4种等能等氮试验饲料,对照组以鱼粉为单一蛋白源,处理组分别以鱼蛋白水解物替代鱼粉蛋白的17%、34%和51%,军曹鱼(Rachycentron canadum)稚鱼的初始重为(3.79±0.22)g,实验在室内流水养殖系统中进行6周的饲养试验,每种饲料随机3个重复。试验结果显示不同水平鱼蛋白水解物对试验鱼的存活率没有显著影响(P>0.05),除了以鱼蛋白水解物替代鱼粉蛋白51%组外,其他各组的增重率(WG)和饲料摄入量(FI)都是随着饲料中鱼蛋白水解物替代鱼粉蛋白量的增加而增加。试验结果表明,在军曹鱼稚鱼饲料中用鱼蛋白水解物替代34%的鱼粉蛋白对于军曹鱼稚鱼的生长和饲料摄入量具有一定的促进作用。军曹鱼稚鱼血浆中胆固醇含量随着饲料中鱼蛋白水解物添加水平的升高而升高,而血浆中的总蛋白含量则无此规律,各处理组血浆中的甘油三酯无显著差异(P0.05)。     

军曹鱼(Rachycentron canadum)早期发育阶段的摄食及其影响因子*

研究了军曹鱼(Rachycentron canadum)仔、稚鱼的日摄食节律和摄食强度,以及饵料密度、温度、盐度对其摄食的影响。结果表明,发育8d仔鱼(摄食轮虫)、23d稚鱼(摄食卤虫无节幼体)和38d稚鱼(摄食鳗鱼粉状饵料)均表现为明显的昼夜摄食节律,摄食主要在白天进行,白天摄食强度占日摄食强度的68%以上;在白天的摄食中,又以早晨6:00-8:00和傍晚16:00-18:00摄食强度最大:夜间摄食较少或基本不摄食,所以军曹鱼早期幼体的摄食习性属白天摄食且偏于晨昏性类型。在不同饵料密度梯度的试验中,发育8d-11d仔鱼和23d-26d稚鱼摄食的适宜饵料密度范围分别为15ind·mL^-1-20ind·mL^-1和7ind·mL^-1-2ind·mL^-1。温度和盐度对发育21d-24d稚鱼日摄食强度的影响均表现为抛物线型的变化曲线,摄食的适宜水温范围为27-31℃,适宜盐度范围为28‰-32‰。结果还表明,幼休摄食强度与饵料密度、水温、盐度的关系均适合于用二次多项式来定量描述。     

军曹鱼淋巴囊肿病毒主衣壳蛋白基因全序列分析

军曹鱼(Rachycentron canadum)亦称海鲡,是我国南方沿海一带的重要海水网箱养殖对象。2005年8月,广东省海水网箱养殖的军曹鱼首次暴发类似的淋巴囊肿病,病鱼的口唇、鳃、鳍、尾及体表等处,可看到大小不一的单个或成群的肿瘤,个别网箱的感染率在80%以上,死亡率近30%。病鱼形象丑陋,严重影响其市场价值,造成了较大的经济损失。淋巴囊肿病(Lymphocystis disease)发现于1874年,1965年正式确认该病病原为淋巴囊肿病毒[1],现已知可感染9目34科140种以上鱼类。我国在20世纪90年代陆续在养殖石斑鱼、鲈鱼、牙鲆中发现淋巴囊肿病[2-5],随后对其病原…     

Effect of dietary fatty acids on the body tissues of larval and juvenile cobia and their prey

Polyunsaturated fatty acids (PUFAs) have been used as biomarkers in pelagic ecosystems although previous studies have failed to quantify the timing of conservation of dietary PUFAs in pelagic fishes and invertebrates. Here we investigated the influence of diet upon the timing of conservation of PUFAs throughout multiple trophic exchanges in larval and juvenile cobia (Rachycentron canadum) and their prey. Cobia, rotifers (Brachionus plicatilis), and Artemia (A. franciscana) were fed laboratory processed or natural diets resembling prey and dietary modification of fatty acid signatures was quantified using two-source mixing models. Specimens were collected throughout the experiment to track dietary influences over time. Cobia larvae underwent significant dietary modification of PUFAs after 24 h and conserved > 90% of dietary PUFAs after an average of 6 days. Similar results were identified in juvenile cobia as significant dietary modification of PUFAs took place after 3 days and > 90% were conserved after an average of 12 days. In addition, no significant ontogenetic changes in PUFA signatures were identified in juvenile cobia throughout the 30-day experiment. PUFA signatures in prey items (rotifers and Artemia) underwent significant dietary modification in 24 h, with over 90% incorporation after 5-7 days. Results from this study support the premise that fatty acids are promising dietary indicators and may be useful for future studies examining trophic relationships in marine ecosystems and habitat use of marine fishes.     

几种生态因子对拟目乌贼胚胎发育的影响

摘 要：本实验旨在研究盐度、光照周期、孵化密度、溶解氧对拟目乌贼（Sepia lycidas）胚胎发育的影响,以确定其胚胎发育最佳生态条件。在室内控制条件下,采用单因子试验研究了不同盐度（18、21、24、27、30、33、36）,光照周期L:D（0 h:24 h、6 h:18 h、12 h:12 h）,孵化密度(3、6、9、12、15 ind/L)等对其胚胎孵化率、培育周期、孵化周期、卵黄囊完全吸收率和初孵幼体大小的影响。结果表明：不同盐度对胚胎发育影响显著（P＜0.05）,适宜盐度为27～33,最适盐度为30,最适盐度下孵化率达（93.33?2.89）%、培育周期为（25.67?0.58）d、孵化周期为（5.33?0.58）d、卵黄囊完全吸收率达（89.27?0.33）%、初孵幼体体重达（0.247?0.006）g;光照周期对孵化周期影响不显著（P>0.05）,对其它指标影响显著（P＜0.05）,适宜光照周期为L:D（6 h:18 h）,最适光照周期下孵化率达（80.33?2.89）%,培育周期为 (35.67?0.57) d、孵化周期为（4.67?0.57）d、卵黄囊完全吸收率达（82.18?7.72）%、初孵幼体体重达（0.243?0.012）g;在各孵化密度下充气与否,对胚胎发育有显著影响（P＜0.01）,水中含氧量≤5.55 mg/L时,胚胎发育受阻。在充气情况下不同孵化密度对胚胎发育影响显著（P＜0.05）,适宜孵化密度3～9 ind/L,最适宜孵化密度6 ind/L,最适孵化密度下孵化率达（96.67?2.89）%、培育周期为（29.67?0.58）d、孵化周期为（5.67?1.15）d、卵黄囊完全吸收率达（89.65?0.31）%、初孵幼体体重达（0.244?0.005）g。由此确定,其适宜的孵化盐度为27～33,光照周期为L:D（6 h:18 h）,孵化密度为3～9 ind/L。由此确定,其适宜的孵化盐度为27～33,光照周期为L:D（6 h:18 h）,孵化密度为3～9 ind/L。