DnaJ—like蛋白研究进展

ＤｎａＪ－ｌｉｋｅ蛋白由Ｎ－端保守的Ｊ区域、富含Ｇｌｙ和Ｐｈｅ区域,富含Ｇｙｓ区域和Ｃ－端低同源区域组成。Ｊ功能域能调节ＨＳＰ７０分子伴侣的ＡＴＰａｓｅ活性,Ｃ－端不保守域能调节与多肽的关系。直核细胞中存在着多种结构不同的ＤｎａＪ－ｌｉｋｅ蛋白,但都含有一个Ｊ功能域。ＤｎａＪ－ｌｉｋｅ蛋白通过Ｊ功能域调节ＨＳＰ７０功能而参与蛋白的折叠,装配和运输过程。     

菜豆重金属胁迫响应基因：cDNA克隆及其表达分析

通过判别筛选ＨｇＣｌ２胁迫下的菜豆叶片ｃＤＮＡ库,分离出７组不同的ｃＤＮＡ克隆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ ｓｔｒｅｓｓ－ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＰｖＳＲ１－７）。ｃＤＮＡ序列和同源性分析结果表明：ＰｖＳＲ１编码富含脯氨酸细胞壁蛋白,     

紫外线辐射对菜豆幼苗某些胁迫响应基因表达的影响

报道了ＵＶ－Ｃ辐射对菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＬ．）ＰＲＰ、ｄｅｈｙｄｒｉｎ、ＰＲ蛋白、ｐｏｌｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎ和ＤａｎＪ－ｌｉｋｅ蛋白等胁迫响应基因表达的影响。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交结果表明：ＵＶ辐射能强烈地诱导ＰＲ蛋白基因的表达,并能促进ＰＲＰ、ｐｏｌｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎ和ＤａｎＪ－ｌｉｋｅ蛋白等基因的转录,而对ｄｅｈｙｄｒｉｎ基因的转录有抑制作用,这些防御蛋白共同作用可能对于保护细胞免受ＵＶ伤害和维持细胞的正常代谢有重要作用。     

四种无尾两栖动物的核型和银染

本文报道了二种角蟾和二种树蛙的核型和银染ＮＯＲ：无量出角蟾：２ｎ＝２６（２４＋２ＳＭ），５＋８，ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ位于６ｑ＾ｐｅｒ沙坪角蟾：２ｎ＝２６（１６Ｍ＋８ＳＭ＋２ＳＴ），５＋８，ＳＣ位于１ｑ＾ｐｅｒ，但Ａｇ－ＮＯＲｓ有二对，分别是ｌｑ＾ｐｅｒ和２ｑ＾ｐｅｒ；黑蹼树蛙：２ｎ＝２６（２４Ｍ＋２ＳＭ），５＋８，ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ在ｌｐ＾ｉｎｔｅｒ；背条跳树蛙；２ｎ＝１６（１２Ｍ＋４ＳＭ），Ｓ     

中国五种锄足蟾科无尾两栖动物的细胞遗传学研究

本文对中国５种锄足蟾科无尾两栖动物的骨髓细胞有丝分裂中期作了细胞遗传学研究,内容包括核型、Ａｇ－ＮＯＲｓ和Ｃ－带。研究结果表明景东角蟾：２ｎ＝２６（２０Ｍ＋４ＳＭ＋２ＳＴ）,５＋８,ＳＣ和Ａｇ－ＮＯＲｓ位于６ｐ＾ｐｅｒ,同时呈Ｃ－带正染。Ｃ－带以着丝点区域正染为主;粗皮角蟾：２ｎ＝２６（２０Ｍ＋６ＳＭ）,５＋８,Ａｇ－ＮＯＲｓ在６ｑ＾ｉｎｔｅｒ,以着丝点Ｃ－带为主,但Ｎｏｓ．１２,１３有明显的端位     

UV—B辐射对小麦叶片H2O2代谢的影响

研究了温室种植的小麦在０（ＣＫ）、８．８２ｋＪ／ｍ＾２（Ｔ１）和１２．６ｋＪ／ｍ＾２（Ｔ２）三种剂量的紫外线Ｂ（ＵＶ－Ｂ）辐射下Ｈ２Ｏ２含量的变化及其机理。ＵＶ－Ｂ辐射下Ｈ２Ｏ２、还原型抗坏血酸（ＡｓＡ）和还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量增加,抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰｘ）和谷胱甘肽不原酶（ＧＲ）活性升高,脂肪酸不饱和度指数（ＩＵＦＡ）降低。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱图没有质上的差异,但凝胶着色深浅有变化。分析     

PAGE活性染色法分析D.radiodurans过氧化氢酶和起氧化物歧化酶

用ＰＡＧＥＡ活性染色分析了Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ过氧化氢酶（Ｃａｔ）和起氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。２种同种异型Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ（Ｒ１和Ｓａｒｋ）的Ｃａｔ在电泳带型上存在差异,两者Ｋａｔ均可分为Ａ、Ｂ和Ｃ３条带,但各带所占比例明显不同,ＳＯＤ的分析结果表明,Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ ＳＯＤ以Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋离子的嵌合体形式存在,其中Ｆｅ－ＳＯＤ成分占９０％以上。ＰＡＧＥ活性染色法     

大鼠胰腺β细胞离子通道的一些特性

实验以单个Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺β细胞为对象,用穿孔膜片箝和细胞贴附式记录技术研究ＡＴＰ敏感Ｋ＾＋通道（ＫＡＴＰ）、延迟整流型Ｋ＾＋通道（ＫＤＲ）、Ｃａ＾２＋通道和Ｎａ＾＋通道的有关特性。结果表明：⑴ＫＡＴＰ通道的内流电导约６５ｐＳ,外流电导约３１ｐＳ,反转电位在－６０ｍＶ左右;⑵ＫＤＲ通道在延迟２０ｍｓ后达到最大激活,ＫＤＲ电流约为ＫＡＴＰ的１／３;⑶钙电流在０ｍＶ左右达到４０－６０ｐＡ的峰值,Ｌ     

甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物RNA3序列分析及编码25kD蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）内蒙分离物的总ＲＮＡ为模板,通过反转录－ＰＣＲ扩增获得ＢＮＹＶＶＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ。将其克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）上,得到重组质粒ｐＧＢＹ５６。序列分析结果表明,内蒙分离物ＲＮＡ３基因组全长为１７７５ｎｔ,其中包含３个开放阅读框架,分别编码２５ｋＤ蛋白、４．６ｋＤ蛋白和一种由５９个氨基酸组成的Ｎ蛋白。与法国Ｆ２分离物、德国Ｇ１分离物和日本Ｓ分离物相比,其核苷酸序列的同源性分别为９６．４％、９６．８％和９７．３％。将２５ｋＤ蛋白编码基因克隆到ｐＪＷ２上,构建了该基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明,２５ｋＤ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中经温度（４２℃）诱导后,可特异地表达２５ｋＤ蛋白     

玉米细胞质分子伴侣Hsp70的ATPase活性

玉米胚乳细胞中纯化的细胞质Ｈｓｐ７０蛋白有低水平的ＡＴＰａｓｅ活性,它在５０℃、ＰＨ５．８、２０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ条件下活性最高,Ｃａ＾２＋和Ｍｇ＾２＋抑制其活性。大肠杆菌ＤｎａＪ蛋白能将玉米细胞质Ｈｓｐ７０的ＡＴＰａｓｅ活性提高６倍,而ＧｒｐＥ蛋白对其影响很小。８种不同的人工合成多肽均能刺激该蛋白折ＡＴＰａｓｅ活性,增加幅度从２．５倍到１０倍痫水性不同的氨基酸对Ｈｓｐ７０的ＡＴＰａｓｅ活性影响     

菜豆多聚泛肽基因在重金属胁迫下的表达

差别筛选HgCl2胁迫的菜豆(PhaseolusvulgarisL.)幼苗叶片cDNA库,分离出两个重金属胁迫相应基因PvSR5和PvSR51(Phaseolusvulgarisstress_relatedgene)片段。cDNA和氨基酸序列分析表明PvSR5和PvSR51分别编码一种多聚泛肽。Northernblot分析表明多聚泛肽是组成性表达蛋白,主要在根中表达,叶片和茎中表达较少;Hg、Cd、Cu和Zn等重金属、高温和水杨酸能强烈地刺激其在叶片中的表达,而受伤几乎没有影响。推测多聚泛肽在抵抗重金属胁迫和提高植物的抗逆性方面有重要作用。     

菜豆病程相关蛋白基因在重金属胁迫下的表达分析

为探讨植物抗重金属的分子机理 ,差别筛选了 Hg Cl2 胁迫的菜豆 ( Phaseolus vulgaris L.)叶片 c DNA库 ,分离出一个重金属胁迫响应基因 Pv SR4克隆 .c DNA和氨基酸序列分析表明 Pv SR4编码一种细胞内病程相关蛋白 ,该蛋白具有 RNase活性 .Northern blot分析表明 Pv SR4基因在正常生长条件下的叶片中不表达 ,重金属 ( Hg、Cd、As、Zn和 Cu等 )和水杨酸能强烈地诱导其基因的表达 ,受伤也能促进该基因的转录 ,而热胁迫几乎没有调节作用 .推测 Pv SR4蛋白在诱导植物的抗逆性和抵抗重金属胁迫方面有重要作用     

Cloning and expression analysis of SKn-type dehydrin gene from bean in response to heavy metals

A heavy metal responsive gene PvSR3 (GenBank accession number U54703) encoding an acid dehydrin was isolated from a mercuric chloride-treated bean (Phaseolus vulgaris L.) leaf cDNA library by differential screening using cDNAs derived from treated and untreated plants. The PvSR3 cDNA is 981-bp long and has a 606-bp open-reading frame with a 202-residue-deduced amino acid sequence. The PvSR3 sequence contains two conserved repeats of the characteristic lysine-rich K segment (EKKGIMDKIKEKLPG) preceded by an 8-serine residue stretch, whereas the Y segment (DEYGNP) conserved motif is absent. The deduced protein has a calculated molecular weight of 23 kDa and an isoelectric point of 5.2. Sequence similarity and comparative analysis showed that PvSR3 shares 70 and 73% similarity with the dehydrin of poplar and pepper, respectively. Southern hybridizations indicated that PvSR3 was a low copy-number gene. Northern blot analysis revealed that PvSR3 mRNA was weakly detected in seedling leaves. However, the gene expression was strongly stimulated by heavy metals, such as mercury, cadmium, arsenic, and copper, whereas virus infection and salt had little effect on it. In contrast, PvSR3 was not responsive to drought or abscisic acid (ABA), and was downregulated by UV radiation. Furthermore, PvSR3 was upregulated by the exogenous signaling molecules, including salicylic acid (SA) and hydrogen peroxide (H2O2). It is suggested that PvSR3 is extremely related to heavy metal stress, and might play an important role in metal detoxification and resistance to the damage caused by heavy metals.     

菜豆重金属胁迫响应基因:cDNA克隆及其表达分析

通过差别筛选HgCl2胁迫下的菜豆叶片cDNA库,分离出7组不同的cDNA克隆（Phaseolusvulgarisstress-relatedprotein,PvSR1～7）。cDNA序列和同源性分析结果表明：PvSR1编码富含脯氨酸细胞壁蛋白（PRP）,PvSR2和PvSR7编码新的HgCl2胁迫相关蛋白,PvSR3编码脱水蛋白（dehydrin）,PvSR4编码病原相关（PR）蛋白,PvSB5编码polyubiqui－tin,PvSR6编码DuaJ－like蛋白。HgCl2胁迫可强烈地请导PvSR2和PR蛋白基因的表达,并能提高PRP,、dehydrinlike和polyubiq－uitin基因的转录水平。这些蛋白质共同作用可能对维持细胞的正常代谢和抵抗重金属胁迫方面有重要作用。     

菜豆泛肽基因在生物和非生物胁迫下的表达

差别筛选HgCl2胁迫处理的菜豆（Phaseolus vulgaris L.）幼苗叶片cDNA库,分离出1个重金属胁迫响应基因PvSR52克隆,其cDNA长度为281bp。cDNA和氨基酸序列同源性分析表明PvSR52编码一种多聚泛肽。Southern blot结果表明菜豆泛肽可能由少数基因编码。Northern blot分析表明多聚泛肽叶片中表达较少;重金属Hg、Cd和As等、过量的Zn和Cu及高温、病毒侵染和水杨酸等环境胁迫均能强烈地刺激其在叶片中的表达。推测泛肽水解系统在提高植物的抗塑性方面有重要作用。     

Cadmium resistance in transgenic tobacco plants enhanced by expressing bean heavy metal-responsive gene PvSR2

Heavy metal pollution such as Cd, Hg, Pb, As and Se is an increasing environment problem worldwide. These metals and metalloids have toxic effect on both plants and animals, which are strongly poisonous to metal-sensitive enzymes, resulting in growth inhibition and death of the organism[1]. Contamination of soils with heavy metals, either by natural causes or due to pollution, often has pronounced effects on the vegetation, resulting in the appearance of metallophytes, and heavy-metal tolera…