生姜离体叶片愈伤组织悬浮细胞系建立与植株再生

以‘莱芜大姜’为试材,研究了生姜离体叶片愈伤组织的诱导以及细胞悬浮系建立与植株再生。结果表明,以生姜试管苗叶片为外植体,接种到MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的培养基上,可有效诱导出生长迅速、质地疏松的愈伤组织。将获得的愈伤组织接种到MS+0.15 mg/L 2,4-D+6.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的液体培养基上,25℃黑暗条件下震荡培养25-30 d,可建立分散性好、生长迅速的悬浮细胞系,细胞悬浮系培养的适宜参数为:初始接种量为1.0-1.5 g,继代培养的适宜间隔期为15 d,继代培养液体培养基更新比例为3/4。将悬浮细胞接种到固体培养基MS+0.2 mg/L NAA+10.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖上可获得再生植株。     

几种生物学因子对薰衣草胚性愈伤组织悬浮培养生长的影响

通过研究接种量、培养基、碳源、氮源及激素组合等生物学因子对薰衣草胚性愈伤组织悬浮培养生长的影响,建立了一种可快速生长的薰衣草胚性愈伤组织悬浮培养体系。结果表明,在添加0.05mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA、30g/L蔗糖及0.5g/L水解酪蛋白的MS培养液中,以50g/L的接种量进行薰衣草胚性愈伤组织的悬浮培养,其生长速率可达24.14g/(L·d)。     

影响杜仲悬浮细胞生产桃叶珊瑚甙因素的研究

研究了外源激素2,4-D、NAA、6-BA、KT的不同组合以及营养添加物水解酪蛋白、酵母提取物对杜仲悬浮细胞生产桃叶珊瑚甙的影响。结果表明,在2.0mg/L2,4-D的培养基中分别添加1.0mg/LNAA、0.5mg/L6-BA、0.5mg/LKT可提高桃叶珊瑚甙含量;在培养基中添加水解酪蛋白和酵母提取物均能促进桃叶珊瑚甙的合成,以添加100mg/L水解酪蛋白和15mg/L酵母提取物时其含量最大。初步得出桃叶珊瑚甙合成的最适培养条件为添加2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LKT+100mg/L水解酪蛋白+15mg/L酵母提取物的MS培养基。     

黄山药细胞培养初步研究

以黄山药叶片为外植体诱导愈伤组织,经多次继代培养筛选后进行细胞悬浮培养,研究了两种培养基对细胞生长动态的影响以及4种培养参数对细胞生长量的影响。结果表明,培养在含6-BA1 mg/L和2,4-D1 mg/L的MS液体培养基中的细胞生长效果较好,培养20 d左右可达最高生长点。较适宜的培养条件为:接种量0.8~1.0 g/100 mL;培养温度24℃~27℃;pH 5.2~5.8;蔗糖用量20~40 g/L;继代培养周期15~20 d。     

葡萄细胞悬浮培养生产白藜芦醇

以巨峰葡萄果皮为外植体,在添加2.0 mg/L 6-苄基嘌呤（6-BA）和0.1 mg/L 2,4-二氯苯氧基（2,4-D）的B5培养基上诱导葡萄愈伤组织; 以50 g/L的初始接种量在添加1.0 mg/L 6-BA和0.05 mg/L 2,4-D的B5液体培养基上建立葡萄悬浮培养体系。在25～27 ℃下,摇床振荡暗培养（120～130 r/min）18 d后,葡萄细胞生物量和白藜芦醇含量达到最大值（16.17 g/L、95.69 μg/g干质量）。在培养第12天时,向培养基中添加100 μmol/L茉莉酸甲酯（MeJA）,经过6 d处理,细胞中白藜芦醇含量达235.73 μg/g干质量。     

西伯利亚百合鳞片组织培养与快速繁殖

以西伯利亚百合鳞茎作为外植体试材,进行组织培养.结果表明,在改良MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖80 g/L的培养基上,分化率可达90.0％;在改良MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖60 g/L的培养基上增殖生长最好,增殖倍数为9.32;最佳生根培养基为改良MS+NAA 0.2 mg/L,生根率可达97.78％;最佳移栽基质为水苔,成活率达100％.     

加拿大披碱草与2种国产披碱草杂种F1愈伤组织诱导及植株再生研究

对加拿大披碱草×披碱草F1和加拿大披碱草×圆柱披碱草F1的幼穗外植体愈伤组织诱导及植株的再生进行了研究.试验筛选出2个杂交种愈伤组织诱导的最适培养基均为:MS 400 mg/L CH 3.0 mg/L 2,4-D;最适继代培养基为MS 400 mg/L CH 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D;最适幼苗分化培养基为:MS 400 mg/LCH 3.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA;最适生根培养基为:MS 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L IBA.这一组培体系的建立,为2个种间杂交种的种质保存及利用奠定了基础.     

药用植物刺山柑愈伤组织诱导及细胞生长代谢特征研究

本文研究了不同外植体及激素对刺山柑愈伤组织诱导的影响,不同激素配比对愈伤组织增殖培养以及悬浮细胞的生长与代谢特征.结果表明:以刺山柑叶片作为诱导愈伤组织的材料,效果较佳;愈伤组织诱导和继代的适宜培养条件是分别是MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.0mg/L6-BA和MS+1.0mg/L2,4-D+1.5mg/L6-BA.刺山柑悬浮培养细胞的生长周期为30天左右,细胞生长曲线呈"S"形,生物量增长2.8倍左右;细胞生长周期内,碳源消耗规律表现为蔗糖和可溶性总糖的浓度持续降低,而还原糖则表现为先升高后降低;过氧化物酶活测定显示酶活水平与蔗糖浓度的高低呈一定程度的正相关.     

药用植物刺山柑愈伤组织诱导及细胞生长代谢特征研究

本文研究了不同外植体及激素对刺山柑愈伤组织诱导的影响,不同激素配比对愈伤组织增殖培养以及悬浮细胞的生长与代谢特征。结果表明:以刺山柑叶片作为诱导愈伤组织的材料,效果较佳;愈伤组织诱导和继代的适宜培养条件是分别是MS 0.5mg/L 2,4-D 1.0mg/L6-BA和MS 1.0mg/L2,4-D 1.5mg/L6-BA。刺山柑悬浮培养细胞的生长周期为30天左右,细胞生长曲线呈"S"形,生物量增长2.8倍左右;细胞生长周期内,碳源消耗规律表现为蔗糖和可溶性总糖的浓度持续降低,而还原糖则表现为先升高后降低;过氧化物酶活测定显示酶活水平与蔗糖浓度的高低呈一定程度的正相关。     

野生高乌头组织培养及快速繁殖

以野生高乌头的嫩叶和叶柄为材料进行高乌头的组织培养研究。结果表明:高乌头的愈伤诱导培养基为1)MS+2,4-D4.0mg/L,2)MS+2,4-D3.0mg/L+6-BA0.5mg/L;愈伤分化培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L;不定芽增殖培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,平均增殖倍数为5.5;生根培养基为1/2MS+IBA1.5mg/L,生根数10条以上,生根率95%以上。     

枇杷叶片愈伤组织的诱导与保存

在不同成熟度的枇杷叶片中,最适宜诱导愈伤组织的是中度成熟叶;最适合的愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L,诱导出的愈伤组织为黄绿色、颗粒状、硬度适中;适合愈伤组织继代保存的培养基为MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+2,4-D 0.1~0.2mg/L。     

抗茎枯病芦笋品种离体培养的研究

选用芦笋（Asparagus officinalis）茎枯病高抗品种格兰蒂为材料,研究各种生长素及细胞分裂素对其茎尖诱导的愈伤组织、不定芽增殖和生根的效果。实验结果表明,最适芦笋茎尖诱导愈伤组织的培养基为：MS＋6-BA0.3 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L＋蔗糖25 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8;最适愈伤组织增殖诱导、分化不定芽的培养基为：MS＋NAA 0.3 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8;最适生根培养基为：1/2 MS＋0.5 mg/L IBA＋1 mg/L PP333＋0.3 mg/L 6-BA＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L,pH 5.8。     

紫锥菊愈伤组织诱导及生物活性成分分析

以紫锥菊(Echinacea purpurea)无菌苗为材料,研究了不同激素配比条件下不同外值体愈伤组织的诱导及所诱导的愈伤组织中的主要成分多糖和总酚,并应用高效液相色谱法对根愈伤组织提取物与紫锥菊根提取物中的酚酸类物质进行了比较分析.结果表明,紫锥菊不同部位愈伤组织诱导的最适宜激素配比不同,其中根愈伤组织诱导的最佳激素配比为0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L 6-BA.叶、茎、根诱导愈伤组织的多糖含量分别为10.15、11.84、14.49 mg/g干重;总酚含量分别为52.16、28.144、7.99 mg/g干重.根愈伤组织总酚和多糖含量均较高,其提取物的酚酸类物质的高效液相色谱与紫锥菊根提取物图谱主峰一致,且生长速度快、质地疏松,是细胞培养获取紫锥菊主要生物活性成分的适宜材料.     

鱼腥草组织培养研究

以鱼腥草带侧芽茎段为外植体进行组培快繁研究。结果表明,初代培养以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L为最佳,30d侧芽诱导率可达66.7%;MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.2mg/L+NAA 0.2mg/L对芽苗的继代增殖效果最好,40d芽苗的增殖倍数可达7.4,且芽苗较高;以MS+6-BA3.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+NAA0.1mg/L对芽苗的继代增重效果最好,40d芽苗鲜重为7.358g;以沙和蛭石(1:1)为基质瓶外生根效果最好,30d芽苗生根率可达84%。     

石竹细胞悬浮培养研究

石竹细胞继代周期为 7d时 ,悬浮细胞培养系生长最快 ,生长率最高 ,而且培养物中胚性细胞较多 ,并能保持较快的分裂和生长 ,能促进已形成的大细胞团的生长和分化。转代时接种物与新鲜培养基的体积比以1∶2较好 ,悬浮系细胞生长最快 ,生长率最高 ,以 1∶2和 1∶3的高倍稀释接种有利于胚性细胞的形成及产生小的胚性细胞团 ,对悬浮系添加椰乳和水解乳蛋白的混合物 ,可较大幅度地提高悬浮细胞系的生长速率 ,单独添加上述两种物质的效果均不如二者的综合效应好。在 6种不同激素组合中 ,配方 2 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)最好 ,生长率最高。配方 5 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 1 .0mg/L)其次 ;配方 1 (2 ,4 D 1 .0mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)次之。     

高羊茅组织培养再生体系及GUS基因瞬间表达研究

以成熟种子为外值体,对高羊茅纰织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2．4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响．结果表明：9．0mg／L 2．4-L)对愈伤组织的诱导效果最佳．0．2mg／L激动素是愈伤组织分化成苗的最适浓度．二者的诱导率和分化率分别达到68．08%和45．83％。在愈伤组织继代培养基中附加1．0mg／L 2．4-D、0．5mg／L 6-BA和1．25mg／L CuSO4;有利于胚性愈伤组织的形成,可以明显促进愈伤组织分化。同时．采用基因枪法将GUS基因导入高羊茅愈伤组织中,通过组织化学染色检测到了GUS瞬间表达活性;并对影响CUS基因瞬间表达的因素进行了分析．以期为提高基因枪法遗传转化效率提供参考。     

适合于悬浮培养的枇杷愈伤组织诱导及状态调控

以枇杷不同品种和不同器官为外植体,通过对愈伤组织诱导率、诱导状态、熊果酸（UA）和齐墩果酸（OA）含量的综合考虑,筛选适合于悬浮培养的枇杷愈伤组织,并通过调整2,4-D、6-BA浓度,同时加入酸水解酪蛋白（CH）、谷氨酰胺（Gln）、KCl等物质对花丝愈伤组织状态进行调控。结果表明：枇杷‘早钟6号’幼胚诱导的愈伤组织最适用于枇杷悬浮培养,愈伤诱导率为83.70%,愈伤组织嫩黄、疏松、颗粒明显,UA、OA含量分别为6.90、2.34 mg/g dw。在MS中附加2,4-D 6.0 mg/L、6-BA 0.8 mg/L、CH 200 mg/L、KCl 500 mg/L,花丝诱导的坚硬愈伤出现细软、嫩黄的愈伤组织,但多次继代后水渍化,状态不佳。     

安菜的组织培养与植株再生

通过对安菜组织培养的培养基种类、激素配比、碳源的研究,得出适于安菜侧芽分化生长的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L。诱导愈伤组织以2,4-D浓度在0．2mg／L～0．5mg／L之间最佳。碳源以蔗糖,浓度3％最佳。以IBA0．5mg／L～1．5mg／L浓度诱导生根效果最好。