一株拮抗多重耐药菌的芽孢杆菌的初步研究

目的 对一株具有拮抗多重耐药菌的芽孢杆菌的特性进行研究.方法 采用菌落法测试多株芽孢杆菌对18种不同来源致病菌的抑制效应,并对其中一株可拮抗多重耐药菌的芽孢杆菌(KC株)进行鉴定和电泳分析.结果 该芽孢杆菌(KC株)经生理生化以及16S rDNA鉴定为枯草芽孢杆菌;KC株对人源、鱼源、畜禽源和鸡粪源的多重耐药菌有不同程度的拮抗效应;SDS-PAGE分析提示,35 kD左右的分泌蛋白可能参与了KC株的抑菌活性.结论 具有拮抗多重耐药菌的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌,且该菌分泌的35 kD蛋白可能参与抑菌活性.     

多重PCR技术检测微生物肥料中巨大芽孢杆菌和蜡样群芽孢杆菌的研究与应用

巨大芽孢杆菌是微生物肥料生产中的常用菌种, 与之形态上相似的蜡样群芽孢杆菌(蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌)则是产品中常见的污染菌, 传统方法区分两者费时费力, 有必要建立检测这两类芽孢杆菌的PCR方法。本文利用已登录的spoOA基因序列分别设计和筛选了上述两个种(群)的特异引物, 并建立了多重PCR检测技术。使用该方法对巨大芽孢杆菌、蜡样群芽孢杆菌和其他芽孢菌共3属13种24株标准菌株的基因组DNA进行扩增, 以检验其特异性。结果显示, 巨大芽孢杆菌、蜡样群芽孢杆菌基因组DNA分别产生大小不同的唯一产物, 其他芽孢杆菌均为阴性。该多重PCR检测方法的灵敏度经测定为105 CFU/mL。同时对10株待测菌株和8个微生物肥料产品进行检测, 其鉴定结果与常规鉴定结果一致。以上结果表明, 本文建立的多重PCR方法具有较高的特异性和灵敏度, 可快速、准确鉴定巨大芽孢杆菌和蜡样群芽孢杆菌, 在微生物肥料检测方面有良好的实用前景。     

一株多功能芽孢杆菌的鉴定

【摘 要】 目的 从土壤筛选所得1株芽孢杆菌并对该菌进行鉴定.方法 通过表型特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析（Gen Bank登录号为: JN609382）。结果 形态学观察：菌落呈圆形,白色微黄,中央凸起,半透明,长时间培养容易形成褶皱;革兰染色为阳性;芽孢中生,周生鞭毛,细长且多。生理生化特征：参照《常见细菌手册》和《伯杰氏细菌鉴定手册》,其中接触酶反应、V-P测定、卵磷脂以及革兰染色呈阳性;能够利用D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露醇产酸,并能使淀粉水解;不能利用丙酸盐,不能形成吲哚,不能水解酪氨酸,生理生化试验结果显示该芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的特征一致。分子生物学鉴定：在Gen Bank上经过BLAT分析,其与枯草芽孢杆菌的相似性最高（99％）。结论 鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。     

海绵共生萎缩芽孢杆菌C89 PPTase bap基因的异源表达

【背景】磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPTase)催化非核糖体肽合成酶(NRPS)中肽酰载体蛋白(PCP)从无活性的脱辅基形态转化为有活性的全辅基形态,从而启动非核糖体肽类化合物的生物合成。【目的】鉴定贪婪倔海绵共生萎缩芽孢杆菌C89中Sfp型PPTase Bap,验证Bap激活NRPS中PCP的能力。【方法】通过BLAST和氨基酸多序列比对鉴定萎缩芽孢杆菌C89中Sfp型PPTase Bap。将bap基因在sfp基因突变株枯草芽孢杆菌168中异源表达,通过重组菌枯草芽孢杆菌168-bap的代谢物检测非核糖体肽类化合物Surfactin。【结果】Bap为Sfp型PPTase,检测到重组菌枯草芽孢杆菌168-bap中Surfactin的产生。【结论】本研究为海洋萎缩芽孢杆菌中NRPS基因簇的异源表达奠定了基础。     

金矿床区蜡质芽孢杆菌孢子数与金矿化关系

土壤中蜡质芽孢杆菌（Bacilluscereus）孢子数目是寻找隐伏金矿床的一种较理想的探矿法。利用此法对我国2个金矿床区的土壤样品进行了该菌的分离鉴定。从55份样品中分离到阳性菌对9株,从739林中挑取11株进行了生理生化特性鉴定,结果证明,该分离株均为典型的蜡质芽孢杆菌。分析矿区每克土壤中蜡质芽孢杆菌数量最高可达19000余个,与背景矿区比较要高达几百倍至几千倍。同时对55份土壤也进行了金含量的分析;结果发现,该菌孢子异常与金异常有一空间上的分离。依据这些研究,作者认为蜡质芽孢杆菌孢子数是指示金矿床区金含量多少的一项重要指标。     

花生侵脉新赤壳菌果腐病生防芽孢杆菌的分离鉴定及防病效果

【目的】为了分离鉴定对花生侵脉新赤壳菌果腐病病原菌Neocosmospora vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌。【方法】利用平板稀释法从花生的根际土壤分离芽孢杆菌,再采用平板对峙法筛选出对N.vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌,通过形态观察、生理生化特性和分子生物学相结合的多相分类方法对生防根际芽孢杆菌进行分类鉴定,检测脂肽类抗生素合成基因类型,并进行花生侵脉新赤壳菌果腐病的田间防治试验。【结果】从花生根际土壤中分离到28株芽孢杆菌,其中对花生果腐病病原菌具有明显抑制作用有8株。多相分类法结果显示2株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),6株为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)。脂肽类抗生素合成基因检测显示,8株生防芽孢杆菌含有至少1种脂肽类抗生素,其中所有生防菌均含有丰原素B合成基因,推测这些芽孢杆菌对N.vasinfecta的抑制机制可能与脂肽类抗生素的合成相关。田间防病实验结果显示,B.amyloliquefaciens GF-3和GF-22制备的生物有机肥均能有效降低NPRP的发病指数,其防治效率分别为32.35%和79.41%,增产率分别为19.12%和25.85%。【结论】分离鉴定了2株对花生侵脉新赤壳菌果腐病具有明显防治效果的根际芽孢杆菌,这不仅为花生侵脉新赤壳菌果腐病的生防制剂研制提供了菌株,还为研究防治机理奠定了基础。     

几种微生物杀虫蛋白基因研究进展

在过去几年中,已经鉴定并克隆出一些新的苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因和其他类型的微生物杀虫蛋白基因。其中来自嗜虫沙雷氏菌,双酶梭状芽孢杆菌,球形芽孢杆菌,嗜线虫致病杆菌,发光杆菌和金龟子绿僵菌的新型杀虫蛋白基因在抗虫遗传工程中具有良好的应用前景     

微生物学实验教学用鞭毛染色的良好菌种——灿烂类芽孢杆菌的鉴定

对自环境中分离的生有鞭毛的细菌进行了形态学观察、生理生化测定及系统发育分析．结果表明该菌属于类芽孢杆菌属,与已知种一灿烂类芽孢杆菌的各项性状极为相似,最终将此菌鉴定为灿烂类芽孢杆菌。研究中还发现该菌可作为良好的鞭毛染色的示范菌,可替代微生物学实验教学中经常使用的普通变形杆菌(Proteus vulgaris)用于鞭毛染色和细菌的运动性观察。     

具有分泌蛋白能力的短芽孢杆菌的筛选及鉴定

短芽孢杆菌（Bacillus　brevis）具有分泌蛋白能力强和胞外蛋白酶活性低的特性,是分泌表达外源蛋白较理想的宿主。为获得分泌表达系统较理想的宿主菌,建立了短芽孢杆菌高效筛选模型,从800余株细菌中筛得8株具有高蛋白分泌能力且没有胞外蛋白酶活性的候选菌。经多相分类学初步鉴定其中5株为短芽孢杆菌。     

地衣芽孢杆菌活菌制剂对成人急性肠炎的疗效观察

1986年我院检验科从一名正常待产妇女阴道分离出一株革兰氏阳性需氧芽孢杆菌,经中科院微生物研究所鉴定为地衣芽孢杆菌。(Baccillue licheniformis)、两年来研究表明该菌生物毒性极低。我们应用地衣芽孢杆菌活菌制剂治疗成人急性肠炎59例,七天治愈率达93.22％,这种疗效的机     

单方中药马蹄香散剂和几种微生态制剂中氨基酸和微量元素含量的测定和比较

目的 测定马蹄香和微生态制剂中氨基酸和微量元素的含量,深入认识马蹄香和微生态制剂的特点.方法 应用国家标准GB/T 5009.124-2003高效液相法和应用日本岛津公司ICPS-1000Ⅱ型等离子体发射光谱仪测定马蹄香和微生态制剂中氨基酸和微量元素含量.结果 氨基酸含量在乳酸菌素片＞亿活＞马蹄香＞金双歧＞贝飞达＞思连康＞合生原＞妈咪爱.谷氨酸在所有制剂中含量均高,天冬氨酸在多数制剂中含量也高.而胱氨酸在所有制剂中含量均低或未能测出.元素钙、磷、镁和硫含量在马蹄香＞乳酸菌素片＞亿活＞思连康＞金双歧＞妈咪爱＞贝飞达＞合生原.马蹄香中微量元素含量较丰富.结论 马蹄香和不同的微生态制剂所含的氨基酸和微量元素各有特点,这对不同制剂的微量营养素的认识有特殊意义.     

蜡样芽孢杆菌检测方法的研究进展

蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)是革兰氏阳性芽孢杆菌,广泛存在于自然环境中,对不良环境有较强的抵抗力,是一种人畜共患的食源性条件致病菌。蜡样芽孢杆菌能够产生多种毒素,这些毒素决定了其致病性。因此,建立快速、准确的蜡样芽孢杆菌检测方法对疾病的诊断和发病后的及时治疗至关重要。本文对近年来检测蜡样芽孢杆菌的菌体与毒素的方法进行了全面的总结,主要是对各方法的原理、检测范围、优缺点等进行比较,并探讨新方法的可行性,以期为科学检测、鉴定蜡样芽孢杆菌提供依据和思路。     

Affinity of Cellular Constituents of Two Bacteria for Fluorescent Brighteners

Two fluorescent brighteners were used to stain an isolate of Bacillus cereus var. mycoides and soil pseudomonad. The stained organisms were fractionated by two procedures to determine which cellular constituents were reacting with the brighteners. Both fractionation procedures provided evidence that the brighteners were adsorbed to proteins within the cells. Microscopy examination of ghost cells of the bacillus showed that cell walls were not being stained. Spheroplasts of the bacillus and the pseudomonad were stained by the brighteners.     

3种细菌芽胞遗传同源性及抗力对比研究

比较细菌芽胞的遗传同源性、结构和抗力差异,为炭疽芽胞的替代试验菌的可靠评价提供依据。采用资料检索、生物信息分析、显微镜观察和微生物学技术分析不同芽胞的遗传同源性、超微结构和抗力差异。炭疽芽胞与腊样芽胞的结构和大小相似,生物遗传同源性最近,对热力、UVC和有效氯的抗力相近。腊样芽胞对炭疽芽胞的代表性最好,可以倾向性选用其替代炭疽芽胞进行试验研究。     

The multiple effect of plasmid RP4::Mu cts 62 in transcipient bacilli

Transfer of conjugative hybrid plasmid RP4::Mu cts 62 from Escherichia coli into Bac. cereus, Bac. thuringiensis, Bac. mesentericus and Bac. polymyxa cells led to the multiple effects on the structure and physiology of bacillus cells. It has resulted in a decrease of the bacillus vitality, in the accelerated autolytic decay of cells, in the delay of cell growth and reproduction rate in liquid and solid media, in the disruption of ultrastructure of the cell membrane and its surface layer.     

鸡肠源芽胞杆菌的分离、鉴定和抗菌活性

从人工饲养的健康三黄肉鸡的盲肠和大肠中分离出10株芽胞杆菌,对其进行菌落形态观察、革兰染色、芽胞染色和生理生化特性鉴定,确定为枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌。同时测定了它们对动物病原性大肠埃希菌和链球菌的抑菌活性。其中有9株芽胞杆菌对大肠埃希菌有抑制作用,8株芽胞杆菌对链球菌有抑制作用。结果表明芽胞杆菌分离株Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8具有作为益生菌开发的潜力。     

Localization of new peptidoglycan at poles in Bacillus mycoides, a member of the Bacillus cereus group

Bacillus mycoides is a sporogenic Gram-positive soil bacillus of the B. cereus group. This bacillus, which forms hyphal colonies, is composed of cells connected in filaments that make up bundles and turn clock- or counterclockwise depending on the strain. A thick peptidoglycan wall gives the rod cells of these bacilli strength and shape. One approach used to study peptidoglycan neoformation in Gram positives exploits the binding properties of antibiotics such as vancomycin and ramoplanin to nascent peptidoglycan, whose localization in the cell is monitored by means of a fluorescent tag. When we treated B. mycoides strains with BODIPY-vancomycin, we found the expected accumulation of fluorescence at the midcell septa and localization along the cell sidewall in small foci distributed quite uniformly. Intense fluorescence was also observed at the poles of many cells, more clearly visible at the outer edges of the cell chains. The unusual abundance of peptidoglycan intermediates at the cell poles after cell separation suggests that the construction process of this structure is different from that of B. subtilis, in which the free poles are rarely reactive to vancomycin.     

Phages naturally associated with the aizawai variety of insect pathogen Bacillus thuringiensis and their relevance to strain identification

Of 36 strains of the ' aizawai ' variety of Bacillus thuringiensis (H-serotype 7) 16 were naturally associated with bacteriophages, 11 of which were isolated at titres of 10⁶ plaque-forming units/ml and above. These 11 phages had varied host ranges among Bacillus cereus and five strains of the ' aizawai ' variety of B. thuringiensis. Host range, plaque morphology and differences in cold lability indicated dissimilarities between the phages, which could be used taxonomically to differentiate between strains of this bacillus.