筛选西洋参抗黑斑病胚性愈伤组织无性系的研究

应用黑斑病菌滤液筛选西洋参胚性愈伤组织,获得了抗西洋参黑斑病的胚性愈伤组织无性系及再生植株。试验证明,“浓度梯度筛选－继代培养－再筛选”的方法,对于筛选西洋参抗病胚性愈伤组织无性系是有效的。     

几种植物体细胞胚胎发生标记蛋白的研究

利用ＳＤＳ一聚丙烯酰胺凝胶电泳对西洋参（ＰａｎａｘｑｕｌｎｇｕｅｆｏｌｉｕｓＬ．）、香雪兰（Ｆｒｅｅｓｎｉｒｅ－ｆｒａＫｌａｔｔ．）、光棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｏｌｅｐｔｏｐｈｙｌｌａＬ．）和草木气（Ｍｅｄｌ’ｃａｇｏｓｕａａｖｅｏｌｅｎｓＬ．）４种植物的胚性、非胚性愈伤组织及胚状体的可溶性蛋白组成进行了分析。结果表明,在这几种植物的胚性愈伤组织中均存在非胚性愈伤组织中没有的特异蛋白质。在西洋参和光棘豆中,这些胚性蛋白质在胚状体中也能检测到。另外,在香雪兰和光棘豆的非胚性愈伤组织中还发现了胚性愈伤组织中没有的蛋白质成分。特异性的胚性蛋白质可以作为分子标记来鉴别潜在的胚性培养物,跟踪胚胎发育,并为进一步探讨体细胞胚胎发生的基因调控和分子机制提供基础。     

二棱大麦体细胞胚性无性素的建立

对１２个品种的二棱大麦幼穗和６个品种的幼胚在附加５００ｍｇ／Ｌ酪蛋白,１５０ｍｇ／Ｌ天门冬素和２ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基（Ｍ３２０）中进行了离体培养,并诱导产生出愈伤组织。把由Ｄ１幼胚所获得的愈伤组织转移到含２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ（Ｍ３０５）培养基中后诱导了产生出了体细胞胚性愈伤组织,幼苗和根。筛选出了体细胞胚性无性系。在长达二年的继代培养中,该细胞系仍保持旺盛的再生和分化成苗能力。     

蔗糖与激素对小麦幼穗体细胞无性系形成及生长特性的影响研究

通过在诱导培养基中添加不同浓度的蔗糖和激素,研究了蔗糖与激素对小麦幼穗体细胞无性系形成及生长特性的影响。结果表明;较高浓度的2,4-D有利于小麦幼穗愈伤组织的形成与生长,但低浓度的2,4-D更有利于胚性愈伤组织的形成,低浓度的KT能显著促进小麦幼穗愈伤组织的生长和胚性愈伤组织的形成,而高浓度的KT不利于小麦幼穗体细胞无性系的形成和生长;蔗糖有利于小麦幼穗胚性愈伤组织的形成,在2.5%-5.5%浓度范围内,随蔗糖浓度的提高,胚性愈伤组织的形成率也随之提高。     

二棱大麦体细胞胚性无性系的建立

对１２个品种的二棱大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｄｉｓｔｉｃｈｕｍ２ｎ＝２４）幼穗和６个品种的幼胚在附加５００ｍｇ／Ｌ酪蛋白,１５０ｍｇ／Ｌ天门冬素和２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基（Ｍ＿（３２０））中进行了离体培养,并诱导产生出了愈伤组织。把由Ｄ＿１幼胚所获得的愈伤组织转移到含２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ（Ｍ＿（３０５））培养基中后诱导产生出了体细胞胚性愈伤组织,幼苗和根。筛选出了体细胞胚性无性系。在长达二年的继代培养中,该细胞系仍保持旺盛的再生和分化成苗能力。     

黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)未受精胚珠培养诱导体细胞胚状体和植株再生的研究

本文报告了黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)三个栽培品种中的薄皮黑豆未受精胚珠(花粉发育到单核晚期)在MS基本培养基附加植物激素BA,2.4-D和GA_3中形成了体细胞胚状体。长度约为0.5—1.0cm大小的胚状体在生根培养基中可以形成完整的再生植株。经过筛选得到了体细胞胚性愈伤组织无性系,继代培养二年多仍能保持胚状体形成能力。试验结果表明:诱导体细胞胚胎发生受品种和接种时期的影响,适宜的接种时期为花粉发育到单核晚期。培养基中的BA为诱导胚胎发生和保持胚性愈伤组织无性系所必需。     

伊贝母体细胞无性系的建立及其胚状体的发生

本文报道了伊贝母体细胞无性系的建立及其胚状体的发生。已继代培养三年零六个月共30多代的鳞芽愈伤组织,目前仍有分化能力。通过愈伤组织形态细胞学的观察,发现伊贝母体细胞无性系形成小鳞茎的途径有二:一是由特化了的愈伤组织表皮细胞。经多次分裂发育成不定芽而形成小鳞茎;二是由愈伤组织表层或内层特化了的胚性细胞,经多次分裂发育成胚状体而形成小鳞茎。不定芽和胚状体的形态发生是有区别的。     

茴香组织培养中体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

将茴香幼茎或叶柄的愈伤组织转入附加６－ＢＡ和低浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基以后,愈伤组织逐步由松软状转变成为颗粒状的胚性愈伤组织。胚状体起源于胚性愈伤组织中的单个细胞或胚性细胞团。在含ＮＡＡ和６－ＢＡ的培养基中,胚状体发育成熟,并再生小植株。茴香的胚状体主要以单细胞内起源方式发生。首先由胚状体单个原始细胞分裂形成２－细胞原胚,２－细胞原胚以三种方式进行分裂：１。Ｔ－形分裂;２．直线形分裂;３．田字形     

小麦远缘杂种幼胚胚状体的发生、发育及低温对愈伤组织分化能力的影响

通过普通小麦与滨麦、簇毛麦及山羊草属7个种杂交幼胚培养,获得8个体细胞胚性无性系(8个组合10个胚)及大量试管苗。愈伤组织及胚性愈伤组织诱导率分别为65.79%和26.32%。形态学及细胞学鉴定结果,均为真杂种。不同染色体组及同一染色体组不同基因型的幼胚,在组织培养中有明显差异。非整倍体细胞具有遗传的全能性,但当染色体数目严重偏离双单倍体数目时,其全能性即丧失。胚状体的发育具有与合子胚极相似的典型结构。由愈伤组织表层和深层细胞产生的胚状体,在形态结构上有明显区别。低温(4℃)处理早代胚性愈伤组织180—240天,以及严格筛选和及时转移,可使培养65—80代(5—6年)的愈伤组织植株分化率保持在77.73%以上。     

西洋参愈伤组织悬浮培养基质中蔗糖和无机元素的消耗状况

植物离体培养所采用的基本基质大多数是广谱性的,各种营养成分是否被充分利用因植物种类不同而异,这方面的研究报道较少[1～3],尤其在西洋参(PanaxquinquefoliumLinn.)芽胞愈伤组织悬浮培养中尚未见报道。本实验通过对西洋参愈伤组织培养基中蔗糖和无机元素消耗的研究,确定培养周期中碳源和无机元素的用量,为西洋参大规模细胞培养中碳源和无机元素及时补充和起始供给浓度的确定提供参数。1　材料与方法1.1　供试材料与培养条件采用本实验室在1999年筛选的西洋参芽胞愈伤组织无性系作为实验材料。先将固体培养基上的愈伤组织转入含有20m…