东方田鼠的一新亚种——福建亚种

东方田鼠(Microtus fortis Buchner,1889)在我国有三个地理亚种:指名亚种(M.fortis fortis Buchner,1889)(分布于陕西、甘肃),华南亚种(M.fortis calamorum Thomas,1911)(分布于长江下游)和东方亚种(M.fortis pelliceus Thomas,1911)(分布于黑龙江、吉林)。作者于1957年先后在福建西北部的建阳、建瓯等地采到一批东方田鼠标本,     

东方田鼠长江亚种和指名亚种基因组DNA序列比较分析

根据东方田鼠基因组DNA序列片段(CenBank登录号：AF277394),通过PCR方法扩增东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)基因组DNA,得到-670bp左右的特异扩增片段。将PCR扩增产物克隆到pGEM-Teasy裁体,进行DNA序列分析,并用生物信息学方法比较东方田鼠长江亚种与指名亚种之间该序列的差异。结果表明：在东方田鼠两个亚种中共发现19个不同的等位基因,不同的个体在该序列存在广泛的单个核苷酸多态性(SNP),多态性位点多达25个;变换类型包括：转换(G→A、A→G、T→C、C→T)、颠换(G→T、A→T、T→A、C→A)、插入(CA)和缺失(TGTTTT)。东方田鼠长江亚种和指名亚种两个种群之间存在明显差别,尤其是在146、192、223、224、235位,但两种群间同源性仍高达98％。同时采用系统发育树(phylogenetic tree)分析方法,对两个亚种的亲缘关系进行了分析和比较,结果显示,东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种基因组DNA明显的分为两大组别。     

东方田鼠两亚种幼体生长特征参数的比较

在相同驯养条件下同步测定东方田鼠(Microtus fortis)指名亚种和长江亚种幼体的生长特征参数。两亚种初生幼体表型特征无明显差异。采用Von Bertalanffy生长模型对两亚种幼体的体重、体长和尾长,以Logistic生长方程对后足长生长过程进行拟合与描述。指名亚种雄体渐近体重、体长和尾长均大于或显著大于长江亚种,雌体前者小于后者;两亚种在17~20 d体重均已产生性二型分化,长江亚种两性个体渐近体重、体长和尾长差值大于指名亚种。两亚种雌体体重、体长、尾长和后足生长速率均相应地大于雄体,体重生长曲线拐点出现时间、瞬时生长率曲线拐点出现时间较体长、尾长和后足长明显迟缓。两亚种两性个体的后足长生长速率要大于其体重、体长和尾长。结果表明,(1)雌体较雄体早熟;(2)雄性体重指名亚种大于长江亚种,雌体相反,指名亚种性二型现象较长江亚种明显;(3)后足长较体重、体长和尾长较早地达到成熟时的大小;(4)两亚种幼体性二型分化时间早于其性成熟过程。     

大鸨(Otis tarda)两个亚种的遗传多样性与系统分化

大鸨（Otistarda）为中国Ⅰ级重点保护动物,分为两个亚种,即指名亚种（Otis tarda tarda）和东方亚种（Otis tarda dybowskii）。研究从代表母系遗传特征的mtDNA控制区和代表双亲遗传特征的核微卫星两方面对两个亚种的遗传多样性与系统分化进行了分析。指名亚种mtDNA控制区3段序列（CtrIaL/CtrIIoH、L438/H772和LCR2a/HCR8）的单倍型数、Л、δ和К都明显高于东方亚种,更显著高于松辽平原西北部繁殖区。东方亚种3个微卫星（Otmic08、Otmic16和Otmic26）的等位基因数、Ho和He明显低于指名亚种。因此东方亚种的遗传多样性都明显低于指名亚种,甚至低于Madrid种群。两个亚种存在于不同的系统分支,证实了两个亚种的系统关系,欧洲指名亚种存在更多的系统分支。     

大鸨(Otis tarda)两个亚种的遗传多样性与系统分化

大鸨(Otis tarda)为中国Ⅰ级重点保护动物,分为两个亚种,即指名亚种(Otis tarda tarda)和东方亚种(Otis tarda dybowskii)。研究从代表母系遗传特征的mtDNA控制区和代表双亲遗传特征的核微卫星两方面对两个亚种的遗传多样性与系统分化进行了分析。指名亚种mtDNA控制区3段序列(CtrIaL/CtrIIoH、L438/H772和LCR2a/HCR8)的单倍型数、Л、δ和К都明显高于东方亚种,更显著高于松辽平原西北部繁殖区。东方亚种3个微卫星(Otmic08、Otmic16和Otmic26)的等位基因数、Ho和He明显低于指名亚种。因此东方亚种的遗传多样性都明显低于指名亚种,甚至低于Madrid种群。两个亚种存在于不同的系统分支,证实了两个亚种的系统关系,欧洲指名亚种存在更多的系统分支。     

西南地区社鼠的亚种分化兼二新亚种描记

系统整理了我国西南及其邻近地区的社鼠标本,发现原指名亚种分布区内的四川雅江八角楼一带的标本,因体背暗黄褐色显著,尾无白色尖端等特征有别于社鼠指名亚种和其他亚种,且其颧板宽与指名亚种Ｎｉｖｉｖｅｎｔｅｒ ｃｏｎｆｕｃｉａｎｕｓ ｃｏｎｆｕｃｉａｎｕｓ之间的差异系数（Ｃ．Ｄ．）达１．４９,达到亚种水平;而云南德钦的社鼠,因其体背毛黄灰褐色显著,听泡较小,平均约４．９ｍｍ等特征与指名亚种及其他亚种差异明     

棕色田鼠不同性别中R-spondin1基因的特殊表达

哺乳动物睾丸决定的诱导一般依赖于Sry基因,然而棕色田鼠指名亚种的Sry基因已经丢失,而棕色田鼠指名亚种雌雄个体依然有繁殖能力。我们在研究涉及性别决定的一些基因时,发现R-spondin1与性别决定有关。为了探讨R-spondin1在棕色田鼠中的性别决定中的作用,我们用RT-PCR检测R-spondin1在棕色田鼠性腺中的表达。研究结果表明R-spondin1仅在出生后不久的棕色田鼠指名亚种雌性个体的卵巢中表达,在出生后的棕色田鼠指名亚种雄性个体睾丸中未见其表达,这说明R-spondin1可能在棕色田鼠指名亚种卵巢发育中具有某种角色。     

鬼鹗甘肃亚种繁殖期叫声研究

利用叫声回放和声谱分析对莲花山自然保护区鬼鹗甘肃亚种（Aegolius funereus beickianus）繁殖期的叫声进行了研究。其记录了领域叫声、尖叫声等6种叫声,分析了各种叫声的特征及与行为的联系。发现不同地点录制的领域叫声存在差异,但同一个体的叫声电有变化。甘肃亚种的领域叫声和欧洲的指名亚种A.f.funereus及北美的亚种A.f.richardsoni相比较,单音数量少,单音长度小,频率高,但差异不大。     

大鸨东方亚种遗传多样性的微卫星分析

为了探索东方亚种数量正在减少的原因和制定科学、有效的保护措施,利用微卫星DNA对大鸨东方亚种(Otistardadybowskii)的遗传多样性进行了研究。应用3个大鸨指名亚种的微卫星位点和13个波斑鸨的微卫星位点扩增了47个个体的基因组DNA,筛选出8个具有多态性的微卫星。其中有3个微卫星的多态性较低,其余5个微卫星的多态性较高。各位点的观察杂合度为0.0435-1.0000,平均杂合度(h)为0.6595;各位点多态信息含量(PIC)为0.0416-0.8520,平均为0.5497;有效等位基因数(E)为1.04-7.46,平均为3.61。4个位点符合HardyWeinberg平衡,4个位点偏离了HardyWeinberg平衡。多方面比较发现,大鸨东方亚种遗传多样性很低,且低于指名亚种,这可能由于其种群较小、历史遗传瓶颈作用、生境破碎化、分布地域紧缩等原因造成的。     

小熊猫种内遗传及亚种分化研究(食肉目:浣熊科)

到目前为止,多数学者认为小熊猫种内已分指名亚种A.f.fulgens和川西亚种A.f.styani。然而,由于其个体毛色变异较大,一些学者对其亚种分化问题提出质疑。本文采用DNA指纹方法,对小熊猫的种内遗传和亚种分化进行了研究。结果表明,川西亚种所有个体在分子量约为8.4kb处均有一条指名亚种不具有的共有谱带,指名亚种所有个体则在分子量约为1.8kb处具有另外一条川西亚种不具有的共有谱带,且这两条谱带可通过双亲遗传给子代,说明此共有谱带可分别作为区分小熊猫川西亚种和指名亚种的特征带。另外,种内的遗传分化研究表明,川西亚种基因组的多态性强于指名亚种,且川西亚种内各个体之间的遗传变异高于指各亚种,说明小熊猫种内已形成遗传分化。因此,笔者认为以上研究结果为基因水平上进一步证明小熊猫种内已产生遗传分化,并形成两独立亚种,目前的亚种地位成立。     

The complete mitochondrial genome of Microtus fortis calamorum (Arvicolinae, Rodentia) and its phylogenetic analysis

Microtus fortis is a special resource of rodent in China. It is a promising experimental animal model for the study on the mechanism of Schistosome japonicum resistance. The first complete mitochondrial genome sequence for Microtus fortis calamorum, a subspecies of M. fortis (Arvicolinae, Rodentia), was reported in this study. The mitochondrial genome sequence of M. f. calamorum (Genbank: JF261175) showed a typical vertebrate pattern with 13 protein coding genes, 2 ribosomal RNAs, 22 transfer RNAs and one major noncoding region (CR region).The extended termination associated sequences (ETAS-1 and ETAS-2) and conserved sequence block 1 (CSB-1) were found in the CR region. The putative origin of replication for the light strand (O(L)) of M. f. calamorum was 35bp long and showed high conservation in stem and adjacent sequences, but the difference existed in the loop region among three species of genus Microtus. In order to investigate the phylogenetic position of M. f. calamorum, the phylogenetic trees (Maximum likelihood and Bayesian methods) were constructed based on 12 protein-coding genes (except for ND6 gene) on H strand from 16 rodent species. M. f. calamorum was classified into genus Microtus, Arvcicolinae for the highly phylogenetic relationship with Microtus kikuchii (Taiwan vole). Further phylogenetic analysis results based on the cytochrome b gene ranged from M. f. calamorum to one of the subspecies of M. fortis, which formed a sister group of Microtus middendorfii in the genus Microtus.     

洞庭湖区东方田鼠种群暴发期间的行为特征观察

2007年6月下旬洞庭湖区东方田鼠(Microtus fortis calamorum)再度暴发,作者观察到其种群暴发期间的迁移、栖息与取食行为具有典型的"逃难"与临时"集群"特征,大多数东方田鼠在迁移过程中死亡,迁到大堤的鼠聚集在大石下、木头下、矮灌木和草丛等较隐蔽场所,一个月后扩散到农田和荒地中,多扩散到杂草茂盛的荒地内。迁移过程中不仅取食农作物,而且取食老树皮等,农作物损失严重。了解其在迁移期间的行为特征,可为了解东方田鼠的生活史适应特性和防控东方田鼠危害提供依据。     

东方田鼠室内繁殖与生长发育观察

目的　探寻室内东方田鼠的繁殖与生长发育规律。方法　以F4代鼠及其仔代(F5)为对象,分别观察其繁殖与生长发育情况。结果　室内东方田鼠一年四季均具有繁殖能力,春(3～4月)秋(10～11月)两季为繁殖高峰期;雌雄单一配对比多性比配对的母鼠繁殖率明显提高;母鼠怀孕期20～21d,窝产仔数3～11只,平均(4.8±1.5)只,初生重2.5～4.4g;幼鼠3　d龄耳壳全部竖立,6～8d龄被毛长全,7～11d龄开眼,10～11d牙齿长齐;15d龄左右具有采食能力,20d龄可完全断奶;60～70d龄可见个别雌鼠阴门开孔,75～90d龄可见多数雌鼠阴门开孔和雄鼠睾丸明显下位;3月龄后体重、身长增长不显著。结论　开放式(普通级)饲养环境下,室内东方田鼠的繁殖季节、窝产仔数及初生重与野生东方田鼠基本相似;种群密度、性比对雌鼠的繁殖率有明显影响;2～3月龄为性成熟期,3～4月龄为体成熟和初配时期。但成熟时间存在个体差异,同时受饲料营养和环境因素的影响。     

两个地区东方田鼠基因组RAPD分析比较研究

目的　从DNA的水平分析比较两个地区东方田鼠的分子遗传特征,探讨以RAPD标记鉴别两个地区的东方田鼠。方法　筛选6条10bp的随机引物对洞庭湖和青铜峡地区的东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析,并对这两个地区的东方田鼠的基因组DNA进行了比较。结果　①两个地区东方田鼠的所有受试个体中共有的片段数为20条,这是两个地区东方田鼠的共性所在;②两个地区东方田鼠各有其特异性扩增片段;③引物S17和S80可作为鉴别两个地区东方田鼠的特异性引物;④不同地区的东方田鼠其不同个体之间的共享度较低,且存在较大差异;两个地区东方田鼠的遗传背景均呈非均一性。结论　运用RAPD方法可以作为鉴别不同地区东方田鼠的基因多态性的标记。     

洞庭湖区东方田鼠种群动态及其危害预警

洞庭湖区东方田鼠以湖滩沼泽为最适栖息地．秋末洞庭湖水位回落,湖滩出露,东方田鼠从农田迁回到湖滩生活、繁殖,种群数量呈逐月上升趋势．春末夏初,洞庭湖水位上涨,湖滩被淹,东方田鼠被迫越过大堤迁入垸内农田．其种群动态由“水位影响东方田鼠的栖息地变换”主导．每年迁入农田的数量首先取决于东方田鼠在湖滩生活繁殖时期的长短,亦即枯水期的天数;其次3月降雨量对东方田鼠在湖滩上的繁殖有较大的影响．东方田鼠迁入垸内后,种群数量呈逐月下降趋势．在分析影响洞庭湖区东方田鼠种群数量动态的主要因子的基础上,提出了东方田鼠种群迁入垸内农田的迁入量预警模型．经过几年的实际预测,吻合情况良好．     

The high genetic homology of threeMacaca fascicularis and twoMacaca mulatta subspecies on the basis of their highly repeated DNA restriction patterns

We have studied highly repeated DNA sequences of three subspecies ofM. fascicularis (M.f. philippinensis M.f. mordax, M.f. fusca) and of two subspecies ofM. mulatta (M.m. lasiotus, M.m. mulatta). Restriction patterns were obtained after digestion with 9 restriction endonucleases and evidenced after southern blotting and hybridization with Bam HI satellite DNA fragments fromM. fascicularis subspecies. M. fascicularis andM. mulatta subspecies studied, present morphological differences but indistinguishable karyotypes: highly repeated DNA analysis, resulting in the same restriction patterns for all the restriction sites studied with highly repeated DNA probes characteristic of the threeM. fascicularis subspecies, gave arguments in favour of the high genetic homology ofM.f. philippinensis, M.f. mordax, M.f. fusca on one side, andM.m. lasiotus andM.m. mulatta on the other, which can be distinguished only on the basis of morphological criteria.     

封闭群东方田鼠的病理学特征观察

观察了东方田鼠封闭群在不同年龄阶段各种病理学变化的特征,为建立东方田鼠相关标准创造条件。采用常规病理学技术,结合电镜方法,对不同年龄的46只封闭繁育的东方田鼠进行了研究和观察。结果封闭群东方田鼠的病理变化主要集中在肺脏与肝脏;个别东方田鼠有乳腺癌和隐睾,东方田鼠乳腺癌的电镜特征与昆明小鼠有所不同;封闭繁育的东方田鼠主要病变有8种;不同年龄的东方田鼠病变的发生率亦不相同。因此,封闭群东方田鼠应加强病理监测,根据病理监测结果,有目的地分离病原生物体。     

东方田鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及生物学特性

目的对影响东方田鼠胚胎成纤维细胞（MfEF）分离和培养的因素进行探索,并观察其生物学特性。方法取室内繁殖饲养不同胎龄的东方田鼠胚胎分离成纤维细胞,通过原代和继代培养,分析比较不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度等因素对MfEF分离及培养的影响,观察MfEF的生长形态及其生物学特性。结果 MfEF为贴壁型生长,细胞形态多样,呈梭形、不规则多边形;采用0.125%的胰蛋白酶室温消化12～13 d胚胎组织5 min,以DMEM培养基添加15%小牛血清分离培养MfEF的效果最佳;MfEF2～7代增殖最旺盛。结论获得了实验室分离、培养MfEF的有效方法 ,为进一步深入研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定了基础。     

东方田鼠皮肤成纤维细胞的分离培养及生物学特性

目的探索和建立东方田鼠皮肤成纤维细胞体外分离、培养的技术方法并观察其生物学特性。方法采用含10%小牛血清的Dulbecco改良Eagle培养液(DMEM)和1640两种培养体系,运用组织块贴壁法和胰酶消化法,分别对出生后1、3 d和5 d的东方田鼠乳鼠皮肤成纤维细胞进行原代分离、培养。苏木素-伊红染色及倒置相差显微镜下观察成纤维细胞形态和生长特性。结果 0.25%胰酶消化分离出生后1 d和3 d东方田鼠乳鼠皮肤较出生后5 d组织可获得较多数量细胞,成纤维细胞在体外快速贴壁生长,一般6～7 d长满培养瓶,细胞纯度高,HE染色细胞呈长梭形,胞核明显;DMEM和1640两种培养液均可用于东方田鼠皮肤成纤维细胞的培养,但细胞传代后生长趋缓,只可传代2～3次。本实验运用组织块贴壁法未能培养出皮肤成纤维细胞。结论确定了有效分离东方田鼠皮肤成纤维细胞的日龄和方法,为进一步深入研究提供了技术方法和操作依据。