黑曲霉突变株分解生淀粉的葡萄糖淀粉酶的提纯及其…

黑曲霉突变株Ｔ－２１产生的葡萄糖淀粉酶具有多型性,在凝胶电泳上呈现很多蛋白质带,酶活力显色表明许多条（５条以上）均表现出淀粉酶活力,酶制剂浸出液通过硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－纤维素柱层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０柱凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱再层析分离纯化到了一型能被生淀粉吸附和水解生淀粉的葡萄糖淀粉酶ＧＡＩ和用凝胶制备电泳分离纯化到一型既不为生淀粉吸附又不水解生淀粉的ＧＡＩＩ。ＧＡＩ被生小麦     

Ca2+/CaM介导生长素对小麦胚芽鞘细胞NAD激酶的刺激作用

外源ＩＡＡ 处理可以显著增加小麦胚芽鞘细胞ＮＡＤ 激酶的催化活性,钙离子可以增强ＩＡＡ 的作用效果,而钙离子通道抑制剂ＬａＣｌ３ 则起强烈的抑制作用,但在存在钙离子的条件下,这种抑制作用可以被钙离子载体Ａ２３１８７ 消除;钙调蛋白能够在离体条件下激活经过ＤＥＡＥ 纤维素柱纯化的小麦胚芽鞘ＮＡＤ激酶,经过ＩＡＡ 处理的胚芽鞘细胞中能够刺激ＮＡＤ 激酶活性的钙调蛋白含量明显增加,ＩＡＡ 的这一作用受ＬａＣｌ３ 的抑制。上述结果表明Ｃａ２＋ ／ＣａＭ 复合物介导了生长素对小麦胚芽鞘细胞ＮＡＤ 激酶活性的促进作用。     

Ca^2／CaM介导生长素对小麦胚芽鞘细胞NAD激酶的刺激作用

外源ＩＡＡ处理可以显著增加小麦胚芽鞘细胞ＮＡＤ激酶的催化活性,钙离子可以增强ＩＡＡ的作用效果,而钙离子通道抑制剂强ＩＡＡ的作用效果,而钙离子通道抑制剂ＬａＣｌ３则起强烈的抑制作用,但在存在钙离子的条件下,这种抑制作用可以被钙离子载体Ａ２３１８７消除;钙调蛋白能够在离体条件下激活经过ＤＥＡＥ纤维素柱纯化的小麦胚芽鞘ＮＡＤ激酶,经过ＩＡＡ处理的胚芽鞘细胞中能够刺激ＮＡＤ激酶活性的钙调蛋白含量明显增加,     

α淀粉酶与糖化酶的共固定化研究

以纤维素为载体用重氮化法同时固定了糖化酶和α淀粉酶,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,发现共固定化酶较固定化单酶能更好地发挥协同效应,能在较低温度下将淀粉一步水解为葡萄糖。共固定化酶在３０℃下的操作半寿期可达９２０小时。     

α淀粉酶与糖化酶的共固定化研究

经纤维素为载体用重氮化法同时固定了糖化酶和α淀粉酶,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,发现共固定化酶较固定化单酶能更好地发挥协同效应,能在较低温度下将淀粉一步水解为葡萄糖,共固定化酶在３０℃下的操作半寿期可达９２０小时。     

当归多糖的分离化及其部分性质的研究

中药当归经热水提取、乙醇分级沉淀、乙醇分级沉淀、ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐａｄｅｘＧ－１５０柱层析,得Ａｓ－Ⅲｂ两个多糖级份。Ａｓ－Ⅲａ和ＡｓⅢｂ经醋纤维薄膜电泳、玻璃纤维纸电泳和凝胶柱层析分析,证明都是均二的,经琼脂糖凝胶柱层析测得Ａｓ－Ⅲａ和ＡｓⅢｂ的分子量分别为８５ＫＤ和４９ＫＤ左右。组成分析表明Ａｓ－Ⅲａ由葡萄糖组成,Ａｓ－Ⅲｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,三者比为１０：１０：４。     

BSA和PEG影响固定化辣根过氧化物酶HRP在有机相中活力

ＢＳＡ和ＰＥＧ可以有效地提高固定化辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）在有机相中的活力。固定化酶活力的提高与试剂加入的顺序有密切的联系;不同载体对酶的影响不同,Ｇｅｌｉｔｅ,ａｌｕｍｉｎａ,ＸＡＤ－７,Ｋｉｓｅｌｇｅｌ和Ｆｌｏｒｉｓｉｌ为载体,分别以吸附法制备固定化酶。实验表明固定化过程中保护剂和酶的加入顺序与国家化酶活力密切相关,而这些载体的固定化效果又以Ｃｅｌｉｔｅ最佳,Ｆｌｏｒｉｓｉｌ最差。Ｆｌｏｒｉｓ     

当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究

中药当归经热水提取、乙醇分级沉淀、ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５０柱层析,得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ两个多糖级份。ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ经醋酸纤维薄膜电泳、玻璃纤维纸电泳和凝胶柱层析分析,证明都是均一的,经琼脂糖凝胶柱层析测得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ的分子量分别为８５ＫＤ和４９ＫＤ左右。组成分析表明ＡｓⅢａ由葡萄糖组成,ＡｓⅢｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,三者比为１０∶１０∶４。     

L615白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞脱氢酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对比研究了纯系６１５鼠和Ｌ６１５可移植性淋巴细胞型白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．４９,Ｄ－葡萄糖－６－磷酸：ＮＡＤＰ氧化还原酶,Ｇ６ＰＤ）和乳酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．２７,Ｌ－乳酸：ＮＡＤ氧化还原酶,ＬＤＨ）。并应用定量细胞化学法对ＬＤＨ和６ＰＤ全酶活性进行了测定。结果：在Ｌ６１５白血病鼠胸腺淋巴细胞中（白血病细胞占４０％）,Ｇ６ＰＤ同工酶谱显示异常,全酶活性明显增高、ＬＤＨ同工酶谱及全酶活性未发生明显变化。Ｌ６１５白血病鼠脾脏淋巴细胞中（白血病细胞占８４％）,Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同工酶谱均显示异常,同时全酶活性也明显增强。提示：Ｇ６ＰＤ对白血病细胞的恶性增殖和浸润似乎更为敏感。     

血红素加氧酶系的共固定化及部分性质研究

为了检测血红素加氧酶系分子间的相互作用和共固定化酶系的反应动力学,利用２′,５′－ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱对血红素加氧酶、ＮＡＤＰＨ－细胞色素ｃ还原酶和胆绿素还原酶进行非膜重组,再以纤维素为载体,用重氮化法固定此重组的酶复合物和共固定非重组的３种酶,发现固定化的重组酶系比非重组酶系能更好地发挥协同作用,在室温条件下可催化血红素一步合成胆红素．共固定化酶的最适ｐＨ为７．２,最适温度为３８℃,Ｋｍ值为０．９３μｍｏｌ／Ｌ．巯基试剂和金属卟淋对固定化酶有抑制作用,共固定化酶比游离酶系稳定性提高,３８℃下的操作半寿期可延长至４２０ｈ,在０～４℃保存两个月其酶活力无明显变化．