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呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染,是造成婴幼儿、学龄前儿童、免疫缺陷患者、老年人等高危群体住院治疗及死亡的重要病因。目前,多个预防RSV感染的候选疫苗正处于研发中,尚无安全、有效的疫苗面世。对RSV感染的处理仍以治疗为主,使用帕利珠单抗(Palivizumab)是当前仅有的预防药物。在过去数年间出现的新型抗体药物,如多克隆抗体、单克隆抗体、纳米抗体等有些已进入了临床前或I、II、III期临床试验阶段。融合蛋白(fusion protein,F蛋白)在RSV感染过程中是不可或缺的,它介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合。在感染过程中,F蛋白从亚稳态的融合前构象状态(prefusion fusion protein,pre F)转变为热力学稳定的融合后状态(postfusion fusionprotein,post F)。近年来,研究人员通过不断筛选,获得了多株针对pre F的抗体。与结合post F的抗体相比,这些抗体具有更强的RSV中和活性。一些更新的抗体药物候选品,在实验中显示出了效力强、药代动力学特征明显、半衰期长等特点,并能以其他途径给药,而且能降低其制备成本。现就抗RSV pre F的抗体研究进展作一概述。 相似文献
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呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)属于副粘液病毒科,是一种下呼吸道感染最主要的RNA病毒.呼吸道合胞病毒感染是引起全球婴幼儿高致死率的呼吸道感染病原,仅次于疟疾,但用于检测RSV感染的选择相对较少.本文通过抗原抗体结合原理,建立呼吸道合胞病毒(RSV)IgM抗体AlphaLISA快速检测方法.小鼠抗人IgM单克隆抗体偶联的受体微球与临床血清样品中RSV特异性IgM抗体结合,RSV特异性IgM抗体再与生物素标记的RSV抗原结合,生物素连接偶联链霉亲和素的供体微球;受体微球和供体微球的距离被拉近小于200nm,680nm荧光激发供体微球生成单线态氧,扩散给受体微球,发射波长为520~620nm的荧光,荧光强度与血清中RSV特异性IgM抗体呈正比.结果显示,该方法批内变异系数与批间变异系数均小于10%,不与其他呼吸道病原体发生交叉反应,与间接免疫荧光法具有较好的一致性,总符合率达83.33%.该方法具有微量检测、快速省时、操作简便等优势,可快速检测RSV的IgM抗体,为早期确诊RSV感染提供高效可行方案. 相似文献
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目的:建立甲型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒A型、B型(RSV-A、RSV-B)和腺病毒(ADV)五种主要上呼吸道病毒的多重RT-PCR检测方法。方法:利用Primer premier5.0分别针对甲型流感病毒的M基因、乙型流感病毒的PB1基因、RSV-A和RSV-B的F基因及ADV的hexon基因设计五对特异性引物,对Mg2+、dNTP、引物浓度及退火温度等进行优化,建立同时检测甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B和ADV的多重RT-PCR方法,并验证该检测方法的灵敏性。结果:所建立的五种病毒的多重RT-PCR方法可以同时或者分别扩增甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B及ADV的141bp、635bp、525bp、377b和283bp基因片段,敏感度分别达到770PFU/ml、800PFU/ml、680PFU/ml、970PFU/ml和850PFU/ml,且五种病毒间无交叉反应。结论:所建立的多重RT-PCR方法可以迅速准确地检测甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B和ADV,为五种病毒的检测提供了一种方便易行的方法。 相似文献
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目的:从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗呼吸道合胞病毒F蛋白的单链抗体。方法:以RSV F蛋白为靶抗原,通过“吸附-洗涤-洗脱-扩增”过程从天然人源性噬菌体抗体库中筛选特异性抗F蛋白单链抗体。5轮筛选后,单克隆经ELISA检测,阳性克隆进行核酸序列分析,并将阳性克隆噬菌体感染E.coli HB2151,经IPTG诱导,制备抗RSV F蛋白的可溶性单链抗体,并进行Western及Dot blot分析。结果:经过筛选,获得了18株能与F蛋白特异性结合的阳性克隆,取OD值最高的克隆E4经测序并检索Kabat数据库分析,显示其基因与人免疫球蛋白可变区基因具有高度同源性,Western及Dot blot分析表明为单链抗体。结论:利用天然人源性噬菌体抗体库技术制备出高特异性的人源性抗RSV F蛋白单链抗体。 相似文献
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随着病毒免疫学研究的不断深入,呼吸道合胞病毒(RSV)包膜糖蛋白的抗体反应在RSV发病中的作用越来越引人们的重视。动物实验已证明体液免疫具有一定的保护作用,但在人类材料较少。本文综述了A、B两亚型RSV外膜G、F糖蛋白的特异抗原组分,抗体反应的相互联系和在抗RSV感染的作用。 相似文献
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程宁宁;苏彦斌;刘美琴;万常青;郭杨;李辰霄;张志强;高博;杜琳 《微生物学免疫学进展》2024,(2):21-27
目的 建立荧光检测法测定呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)血清中和抗体的检测方法,并对其进行验证和初步应用。方法 采用反向遗传学拯救的表达绿色荧光蛋白的重组呼吸道合胞病毒(recombinant RSV experssed the enhanced green fluorescent protein, RSV-EGFP)进行RSV重组腺病毒疫苗免疫后血清的检测。通过对RSV-EGFP在人喉癌上皮(human epithelioma-2,HEp-2)细胞上荧光的检测波长、检测时间、病毒的感染剂量和HEp-2的细胞密度进行优化,确定合适的条件后,再将RSV血清倍比系列稀释后与RSV-EGFP混合接种至HEp-2细胞培养,利用多功能酶标仪检测HEp-2细胞中表达的绿色荧光蛋白的荧光强度,从而计算其中和抗体滴度。同时,通过对RSV重组腺病毒载体疫苗免疫棉鼠血清的检测进一步评估中和抗体检测方法的精密度、重复性、准确度以及边缘孔效应。结果 结果显示,当检测的激发波长为479 nm,发射波长为517 nm,检测时间为病毒感染后48 h,最佳病毒感染剂量为3 000 pfu/孔,检测的最佳细胞密度为2.0×10~4个/孔时,相对荧光强度最高,且病毒数量与荧光强度之间呈现出较好的剂量-效应关系。采用该方法检测不同抗体滴度的血清样本,日内与日间精密度的CV均<15%;同一血清样本10次重复性检测结果最大值与最小值的比值均≤4,且RSD均<15%;用建立的方法实际测得的中和滴度结果与稀释后理论中和滴度(酶联免疫斑点法)的回收率均在80%~120%之间;在边缘孔与非边缘孔检测RSV血清中和抗体滴度结果一致性较好(P>0.05)。结论 建立的荧光检测法较酶联免疫斑点法操作简便、快捷,可被用来检测RSV血清中和抗体效价。 相似文献
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小鼠感染合胞病毒与鼠流感病毒后肺脏病理学比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的与方法用合胞病毒(RSV)和鼠肺流感病毒(IVP)感染SPF级BALB/c小鼠,复制两种不同的小鼠病毒性肺炎动物模型,观察其临床症状,并对两种模型各自的肺部组织病理学特点进行研究。结果与结论IVP模型组与RSV模型组小鼠感染病毒后,分别在试验的2天和3天发病,临床症状均表现为精神沉郁、耸毛、卷缩、毛无光泽、活动减少、呼吸急促、咳嗽。但IVP感染模型组小鼠在发病后出现死亡,第7天其死亡率达到40%,而RSV感染模型组小鼠7日试验内无死亡病例发生。病理组织学诊断,RSV模型组小鼠为急性渗出性间质性肺炎,IVP模型组小鼠为出血性间质性肺炎。 相似文献
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Raina K. Plowright Peggy Eby Peter J. Hudson Ina L. Smith David Westcott Wayne L. Bryden Deborah Middleton Peter A. Reid Rosemary A. McFarlane Gerardo Martin Gary M. Tabor Lee F. Skerratt Dale L. Anderson Gary Crameri David Quammen David Jordan Paul Freeman Lin-Fa Wang Jonathan H. Epstein Glenn A. Marsh Nina Y. Kung Hamish McCallum 《Proceedings. Biological sciences / The Royal Society》2015,282(1798)
Viruses that originate in bats may be the most notorious emerging zoonoses that spill over from wildlife into domestic animals and humans. Understanding how these infections filter through ecological systems to cause disease in humans is of profound importance to public health. Transmission of viruses from bats to humans requires a hierarchy of enabling conditions that connect the distribution of reservoir hosts, viral infection within these hosts, and exposure and susceptibility of recipient hosts. For many emerging bat viruses, spillover also requires viral shedding from bats, and survival of the virus in the environment. Focusing on Hendra virus, but also addressing Nipah virus, Ebola virus, Marburg virus and coronaviruses, we delineate this cross-species spillover dynamic from the within-host processes that drive virus excretion to land-use changes that increase interaction among species. We describe how land-use changes may affect co-occurrence and contact between bats and recipient hosts. Two hypotheses may explain temporal and spatial pulses of virus shedding in bat populations: episodic shedding from persistently infected bats or transient epidemics that occur as virus is transmitted among bat populations. Management of livestock also may affect the probability of exposure and disease. Interventions to decrease the probability of virus spillover can be implemented at multiple levels from targeting the reservoir host to managing recipient host exposure and susceptibility. 相似文献
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呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)会引起呼吸道和肺部感染,尤其是婴幼儿和老人,容易出现严重感染。尽管RSV感染对医疗保健产生了全球性影响,目前仍以支持性的治疗为主。在过去的几十年中,随着对 RSV 发病机制和免疫病理学的了解不断加深,RSV的预防策略取得了重大进步。自1966年 RSV 疫苗首次试验以来已经过去50多年,目前有两种RSV疫苗获批上市。综述了当前RSV感染的治疗方案(包括RSV 特异性和非特异性)以及RSV疫苗的研发进展,以期为RSV的治疗及疫苗的研发提供参考。 相似文献
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呼吸道合胞病毒感染与细胞凋亡、自噬的关系错综复杂。研究发现呼吸道合胞病毒感染细胞后,既能产生促细胞凋亡作用,也能产生抗细胞凋亡作用,还能诱导细胞发生自噬。研究这些过程机理,能帮助我们更好地认识呼吸道合胞病毒感染发病机制,为预防和治疗呼吸道合胞病毒感染提供一些新的方向。 相似文献
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呼吸道合胞病毒疫苗研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要原因,并可致免疫缺陷病人显著发病和死亡,RSV疫苗已被WHO列为全球最优先发展的疫苗之一。经过几十年的研究,虽然取得了显著进展,但尚未有RSV疫苗上市。目前RSV疫苗的研究主要集中于亚单位疫苗、减毒活疫苗和DNA疫苗等,其中亚单位疫苗和减毒活疫苗被认为最有前途,已分别进行了的临床试验。 相似文献
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Jessica Marcandalli Brooke Fiala Sebastian Ols Michela Perotti Willem de van der Schueren Joost Snijder Edgar Hodge Mark Benhaim Rashmi Ravichandran Lauren Carter Will Sheffler Livia Brunner Maria Lawrenz Patrice Dubois Antonio Lanzavecchia Federica Sallusto Kelly K. Lee David Veesler Neil P. King 《Cell》2019,176(6):1420-1431.e17