内质网应激介导小鼠急性汞中毒性肝损伤

目的观察急性汞中毒对小鼠肝的损伤,并探讨内质网应激是否介导此损伤。方法选取8周龄健康雄性C57B/L6小鼠,随机分为对照组、HgCl_2染毒组、4-PBA预处理+HgCl_2染毒组,建模成功后,眼球取血检测小鼠肝功能变化;HE染色观察肝形态学变化;免疫组织化学染色及Western blot检测肝组织中内质网应激特异性蛋白Bip与CHOP的表达情况。结果与对照组相比,HgCl_2染毒组小鼠肝损伤明显,且Bip与CHOP表达显著增高,而4-PBA可下调Bip与CHOP表达水平从而减轻肝损伤。结论急性汞中毒可能通过内质网应激引起肝损伤。     

镉离子对文蛤肝胰腺超微结构的影响

本文以文蛤(Meretrix meretrix)为实验对象,将其在不同浓度镉溶液(0、1.5 mg/L、3 mg/L、6 mg/L)中染毒5 d,并利用透射电镜技术分析文蛤肝胰腺细胞的超微结构变化。结果表明：镉对文蛤肝胰腺细胞超微结构的影响较大,主要表现在对内膜系统和线粒体的破坏上,其中线粒体嵴减少,肿胀变形,逐渐空泡化;粗面内质网由原先的板层状结构解体,形成许多大小不同的小泡。微绒毛脱落并逐渐减少,部分空泡化,高尔基体膜也有扩张的现象。膜性结构形成的空泡中出现沉积物,核膜出现内陷。镉离子破坏了文蛤肝胰腺细胞膜和主要细胞器的结构,影响了肝胰腺细胞的正常生理机能,随着镉溶液浓度的升高,对肝胰腺细胞结构的破坏性也增强。     

急性肝损伤时肝脏内Pink1/Parkin的表达变化及意义

目的:观察C57小鼠急性肝损伤(Acute liver injury, ALI)中线粒体自噬相关蛋白Pink1/Parkin表达的变化及意义。方法:领取28只小鼠,随机分为对照组、ALI 1 d组、ALI 4 d组、ALI 7 d组。分别检测血清谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的变化;肝组织病理变化用HE染色观察;Real Time quality PCR检测Pink1/Parkin在m RNA水平的表达变化;进一步利用Western Blot方法分别检测肝组织中Pink1/Parkin蛋白水平的表达变化。结果:ALI组1 d、4 d、7 d组与对照组相比,ALT、AST表达显著升高,具有统计学意义(P0.05);肝组织病理学检查ALI组1 d和4 d组中,释放出大量的炎性细胞,肝细胞出现大面积坏死,7 d组肝细胞坏死与1 d和4 d比较明显缓解;m RNA水平检测Pink1/Parkin在ALI 1 d(4.79/1.82倍)、4 d(1.74/4.17倍)和7 d(2.91/1.25倍)与对照组相比表达水平明显升高(P0.05);Pink1/Parkin在蛋白水平检测时ALI 1 d(2.03/1.82倍)、4 d(1.78/4.17倍)和7 d(1.25/1.25倍)时肝组织内表达也显著增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:急性肝损伤状态下Pink1/Parkin在m RNA和蛋白水平表达升高,且其表达量随着肝脏的损伤缓解而表达水平降低,提示Pink1/Parkin可能对于治疗急性肝损伤具有重要意义。     

灵芝子实体浓缩胶囊对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的：研究灵芝子实体浓缩胶囊对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法：将50只健康的雌性昆明小鼠随机分成空白对照组、模型对照组、灵芝子实体浓缩胶囊低（83.5mg/kg·BW）、中（167mg/kg·BW）、高剂量组（500mg/kg·BW）,每组10只。每日灌胃给药1次,连续灌胃给药37d,空白对照组和模型对照组按等量蒸馏水灌胃。给予受试物第37天,模型对照组及受试物各剂量组灌胃给予50%乙醇（13mL/kg·BW）造成急性肝损伤模型,禁食16h处死动物,测定各组小鼠肝组织中丙二醛（MDA）、甘油三酯（TG）、还原型谷胱甘肽（GSH）的含量并观察肝组织病理形态学变化。结果：各剂量组间小鼠与模型对照组相比,灵芝子实体浓缩胶囊高剂量组的MDA、TG含量明显低于模型对照组,差异具有显著性（P＜0.05）,中、高剂量组的GSH含量显著高于模型对照组,差异具有显著性（P＜0.01）。灵芝子实体浓缩胶囊能显著改善肝细胞肿胀、坏死和炎性浸润状况,在脂肪变性方面各剂量组虽未发现显著性改善,但与模型对照组比较,存在缓解肝损伤的趋势。结论：灵芝子实体浓缩胶囊对小鼠急性酒精性肝损伤具有一定的辅助保护功能。     

慢性丙型肝炎肝细胞及细胞器病变特点研究

目的观察不同炎症程度的丙型肝炎肝细胞及细胞器超微结构,了解不同炎症程度的丙型肝炎患者肝细胞超微结构特征。方法收集6例经肝穿刺活检病理确诊的轻度、中度、重度丙型肝炎肝组织标本各2例,同时选取2例肝移植中的正常供肝组织作为对照,对照光镜特点,对各病例电镜下的肝细胞器超微结构特点进行分析总结。结果光镜下观察到轻度慢性丙型肝炎以肝细胞水肿变性为主;中度慢性丙型肝炎以汇管区炎症为主伴淋巴滤泡形成;重度慢性丙型肝炎肝小叶内易见肝细胞点状坏死,纤维组织增生并可见弓形纤维或假小叶形成。电镜下观察到与正常肝细胞相比较,轻度慢性丙型肝炎病例中肝细胞胞浆内粗面内质网减少、滑面内质网增多;中度慢性丙型肝炎表现为肝细胞胞浆内脂滴稍增多,部分伴脂滴融合,胞浆内局灶可见胶原纤维;而重度慢性丙型肝炎的肝细胞内可见线粒体凝聚、融合和变性,糖原增多,脂滴进一步呈大泡型脂变并融合,细胞核内可见包涵体形成。结论不同炎症程度的丙型肝炎肝细胞具有不同的超微结构特征。     

急性肝损伤小鼠中线粒体解耦联蛋白2的表达变化及意义

目的:观察C57小鼠急性肝损伤(acute liver injury,ALI)中解偶联蛋白2(Uncouple Protein2,UCP2)的表达,探讨ALI与UCP2表达变化的意义。方法:领取36只小鼠,随机分为对照组、ALI 1 d组、ALI 4 d组、ALI 7 d组。分别检测血清谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的变化;肝组织病理变化用HE染色观察;利用Western Blot方法分别检测全肝组织蛋白和肝细胞线粒体提纯蛋白中的UCP2蛋白水平的变化;Real Time quality PCR检测UCP2在mRNA水平的表达变化。结果:ALI组1 d、4 d组与对照组相比,ALT(160.69±22.11 vs 34.43±5.19;96.37±15.39 vs 34.43±5.19)、AST(306.54±68.09 vs 97.74±14.49;173.94±26.74 vs 97.74±14.49)表达差异具有统计学意义(P0.05);肝组织病理学检查ALI组1 d和4 d组中肝细胞出现大面积坏死,7d组肝细胞坏死缓解;蛋白水平检测UCP2在ALI 1 d和4 d时全肝组织分别增加2.84倍和2.25倍,在肝线粒体中1 d、4 d和7 d时分别增加2.19倍、1.68倍和1.56倍,差异具有统计学意义(P0.05);mRNA水平检测UCP2在ALI 1 d和4 d与对照组相比明显升高,相对增加3.79倍和1.46倍(P0.05)。结论:急性肝损伤状态下UCP2在蛋白和mRNA水平高表达,UCP2可能对于治疗急性肝损伤具有重要意义。     

水飞蓟宾·熊去氧胆酸蒸发共沉淀物对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究水飞蓟宾·熊去氧胆酸蒸发共沉淀物(SUE)对小鼠CCl4致急性肝损伤的保护作用。方法:健康昆明种雄性小鼠80只,随机分为8组(n=10):空白组及模型组分别经口投予羧甲基纤维素钠(CMC-Na),其余60只采用CCl4腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,分别给予水飞蓟宾(SLB,20 mg/kg)、熊去氧胆酸(UDCA,16.25 mg/kg)、SLB与UDCA等摩尔物理混合物(PM,36.25 mg/kg)和高中低剂量SUE(以SLB计10、20、40 mg/kg)治疗,采用单因素方差分析肝体比变化,多功能酶标仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。结果:与空白组相比,模型组肝体比有显著性升高(P0.05),血清中AST和ALT水平明显升高(P0.05);与模型组相比SLB、PM、SUE组血清AST、ALT显示有不同程度的下降(P0.05),但UDCA组无显著性差异;与SLB和PM相比,SUE能明显降低小鼠血清ALT、AST含量(P0.05),且呈一定的剂量依赖关系。结论:SUE对CCl4所致小鼠急性肝损伤有较好的保护作用,说明LB与UDCA制备成共沉淀物后,可更好的发挥协同作用,提高联合应用的药效。     

激活PPARγ抑制异烟肼与利福平合用致大鼠肝损伤及HMGB1水平上调

目的探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)对异烟肼与利福平合用致肝损伤的作用。方法以异烟肼和利福平合用制作大鼠肝损伤模型,以15d-PGJ2激活PPARγ。造模第14d和第28d分批处死大鼠,测定血清总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT),、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,观察大鼠肝病理学和超微结构变化,检测大鼠肝组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,免疫组织化学测定肝高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)表达。结果异烟肼和利福平合用所致肝损伤模型小鼠血清TBIL、DBIL明显升高,肝组织SOD活性显著降低,MDA含量升高,肝脂肪变性和炎症细胞浸润较明显,肝细胞线粒体及内质网结构破坏,HMGB1免疫反应性增强;PPARγ激动剂15d-PGJ2处理可明显抑制上述变化。结论 PPARγ激动剂15d-PGJ2可能通过抗氧化及抑制HMGB1表达对异烟肼、利福平合用致肝损伤发挥保护作用。     

氯化镨在小鼠肝脏细胞中形成含镨致密体

本实验给小鼠4次注射氯化镨(总剂量为200mg/kg)后,光镜发现肝细胞呈嗜酸变性或空泡变性,肝细胞与枯否细胞中酸性磷性酶阳性的溶酶体增多。电镜观察到肝细胞出现程度不同的核变形、内质网扩张、糖原缺乏、溶酶体含较多高电子密度微粒。肝细胞与枯否细胞中均出现由高电子密度微粒聚集形成的致密体,应用X射线微区分析术可测到镨特征性能谱峰。     

脐血间充质干细胞对小鼠辐射性肝损伤的作用

目的:研究脐血间充质干细胞(UCMSC)对全身X线受照小鼠的肝组织辐射损伤后的防护作用,为相关放射性肝疾病的治疗提供理论依据。方法:选取清洁级SD小鼠进行全身辐射,建立小鼠辐射损伤模型,观察辐射前后小鼠的一般状态;给小鼠注射UCMSC悬浮液1 m L和等体积生理盐水,分别于处理后第1、2、7、14 d取小鼠肝脏,用苏木精-伊红染色,观察辐射后肝组织病理形态学的变化;取肝脏组织匀浆检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:辐射组小鼠与正常组小鼠相比活动明显减少,治疗后的小鼠状况有所恢复;肝组织石蜡切片染色显示,按组织学标准评价后各组肝组织比较有显著性差异;辐射组与正常组比较,肝细胞内MDA含量显著升高,SOD活性显著降低,差异有统计学意义;普通组与辐射组比较,肝细胞内MDA含量有所降低,SOD活性有所升高有明显改善作用;加强组与普通组比较,MDA含量降低,SOD活性有所升高。结论:脐血间充质干细胞移植具有清除自由基、减轻肝损伤及修复再生损伤肝细胞的作用,能够有效改善肝脏损伤。     

饲料中添加胆汁酸对欧洲鳗鲡幼鱼肝脏脂肪代谢的影响

文章旨在研究饲料中添加胆汁酸对欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)幼鱼肝脏脂肪代谢的影响。将养殖欧洲鳗鲡幼鱼的9口水泥池[初始规格(141.5±1.9) g/尾;初始鱼重(682±23) kg/池]随机分为3个处理组,每组3口池,分别投喂基础饲料(对照组)、基础饲料添加500 mg/kg胆汁酸(BA1组)、基础饲料添加1000 mg/kg胆汁酸(BA2组)的饲料。实验期为15周。实验结果表明, BA组比对照组欧洲鳗鲡幼鱼肝脏组织中脂肪空泡数量明显减少,肝脏粗脂肪水平显著降低(P<0.05)。BA组欧洲鳗鲡幼鱼肝脏脂肪酸合成酶水平显著降低(P<0.05),仅BA1组乙酰辅酶A羧化酶水平显著降低(P<0.05), BA组肝脂酶、脂蛋白酯酶和总脂酶活性均显著升高(P<0.05); BA组间上述酶活性或水平均无显著差异(P>0.05)。BA1组欧洲鳗鲡幼鱼肝脏磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱水平上调,主要是甘油磷脂代谢和甘油酯代谢增强。由此可见,欧洲鳗鲡幼鱼饲料中添加胆汁酸可通过降低脂肪合成有关酶水平及增加脂肪分解有关酶活性,主要增强甘油磷脂代谢和甘油酯代谢,...     

黄芪三七复方两种不同制备方法活性组分与功效对比研究

摘要 目的：对比分析黄芪三七复方经本草提取机器快速制备的汤液（HSQ）与传统煎煮汤液（HS）的活性组分、免疫功能及抗氧化活性，探索传统中药复方汤药制备新技术。方法：采用粒度分析仪对黄芪和三七复方本草提取液HSQ和传统汤液HS提取物进行了粒度分析，并用可见分光光度法对其总多糖和总皂苷活性成分的含量进行了分析。腹腔注射抗肿瘤药物阿霉素和灌胃地塞米松分别在NIH小鼠上诱导两种免疫功能紊乱的动物模型。同时，灌胃给予HSQ和HS 连续4周，并通过计算其胸腺和脾脏指数来评估其对免疫功能障碍的调节作用。采用可见光分光光度法测定HSQ和HS与NIH小鼠脑组织匀浆液体外孵育后MDA（丙二醛）含量的变化。结果：与传统汤液HS相比，黄芪三七复方本草提取液HSQ的颗粒平均粒径约为HS的32.7%，尺寸更小、更均一，而且HSQ中总多糖与总皂苷含量显著增加，分别提升27%和50%。在抑制抗肿瘤药物阿霉素引起的小鼠胸腺萎缩，以及激素地塞米松引起的脾脏萎缩等免疫系统紊乱方面也具有更好的活性。另外，黄芪三七复方本草提取液HSQ在体外对MDA生成的抑制率比传统汤液HS高47%，其抗氧化活性更优。结论：相对传统汤液HS，黄芪三七复方本草提取液HSQ拥有更好的微纳形态，具有更高水平的总皂苷与总多糖等活性成分，并且表现出更好的免疫调控与抗氧化活性，该研究对传统汤液制备技术的创新具有较好的示范研究与探索意义。     

G proteins immunodetection and adrenergic transduction pathways in the liver of Anguilla anguilla

G proteins are members of a highly conserved superfamily of GTPases, which includes heterotrimeric (alpha, beta, gamma) proteins acting as critical control points for transmembrane signaling. In ectothermal vertebrates, knowledge about these proteins is scarce, and our work provides the first demonstration that G(s), G(q), and G(i) proteins are all present in the liver of a fish. G(q)alpha subunits of about 42 kDa have been identified in European eel (Anguilla anguilla) liver membranes, supporting previous reports about the existence of hormone transduction pathways coupled to inositol 1,4,5-trisphosphate/Ca(2+) enhancement in fish hepatocytes. Although two G(s)alpha proteins of about 45 and 52 kDa have been reported in mammals, a single isoform of approximately 45 kDa has been recognized in eel liver. G(s)alpha and G(q)alpha proteins are involved in the epinephrine transduction pathway, leading to cAMP and Ca(2+) intracellular increments, respectively. Interestingly, both messengers significantly stimulated glucose release from eel hepatocytes but with a different time course. In fact, the Ca(2+)-dependent glucose output preceded the cAMP-mediated release by about 7 min. G(i)alpha subunits of about 40 kDa were also immunodetected, suggesting the presence of hormone receptors leading to adenylyl cyclase inhibition in eel liver; however, alpha(2)- adrenoreceptor ligands were ineffective on both enzyme activity and glucose release.     

四君子汤对实验性脾虚小鼠肠道菌群的影响

本文报道了四君子汤对脾虚小鼠肠道内与人类关系密切的主要菌群的影响。用大量大黄水煎液灌胃给予小鼠,造成实验性脾虚模型,引起小鼠肠道内菌群紊乱,其中双歧杆菌、乳杆菌菌量均下降,与对照组小鼠相比具有显著性差异。当小鼠服用四君子汤后,双歧杆菌,乳杆菌均上升至正常值水平。四君子汤对拟杆菌数量也有一定的影响。本研究表明,四君子汤对小鼠肠道菌群的失调具有调节功能,对脾虚小鼠的康复具有一定的促进作用。     

Carbofuran- and cypermethrin-induced histopathological alterations in the liver of Labeo rohita (Hamilton) and its recovery

Alterations in the liver histology of Labeo rohita were examined after exposure to different concentrations of carbofuran (0.06 and 0.15 mg L^?1) and cypermethrin (0.16 and 0.40 μl L^?1) for 28 days. Histological recovery was also studied by maintaining the intoxicated fish in a freshwater system for an additional 28 days. Major damages caused by carbofuran toxicity were diffuse necrosis, cordal disarrangement, individualization of hepatocytes, etc.; significant changes induced by cypermethrin were hyperplasia, disintegration of hepatic mass, focal coagulative necrosis, etc. In both cases, damages were dose‐dependent, with cypermethrin exhibiting more sensitivity than carbofuran. In all cases, recovery was prominent and rate of recovery was faster with carbofuran than when using cypermethrin.     

白头翁汤治疗炎症性肠病的分子机制研究

目的：探讨白头翁汤治疗炎症性肠病的分子机制。方法：40只Wistar雄性大鼠随机分为5组（n=8）：正常对照组、模型组、模型＋阳性对照组（美沙拉嗪）、模型＋中药治疗组,中药治疗组又分为中、高剂量组。阳性对照组、中药治疗组分别灌胃给药。疗程结束后取大鼠结肠组织利用免疫组织化学、Western blot等方法检测Smad7及p-Smad3在各组中的表达变化。结果：模型与组相比较,阳性药物及中药组尤其是高剂量组可有效抑制Smad7的表达,同时增强p-Smad3的表达。结论：白头翁汤可能通过激活TGF-β1/Smad3信号通路从而发挥了对炎症性肠病中的抗炎作用。     

复方中药对大鼠力竭运动与恢复过程中端脑神经递质含量的影响

目的：探讨复方中药对运动大鼠中枢神经递质含量的影响,进一步认识中药提高运动能力和促进运动性疲劳恢复的作用机理。方法：选8周龄大鼠64只,随机分成服药组和对照组,服药组灌服中药煎剂8周。然后,每组再分成4个亚组分别于不同状态下断头处死,测其中枢递质含量。结果：服药组大鼠力竭运动时间极显著长于对照组（P〈0．01）;安静时,除谷氨酸（GLU）含量服药组极显著高于对照组（P〈0．01）外、其余各指标无组间显著性差异;定量负荷后,服药组5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、弘氨基丁酸（GABA）、多巴胺（DA）含量和5-HT／5-HIAA显著低于对照组,GLU、GLU／GABA和DA／5-HT明显高于对照组;力竭即刻,服药组5-HT、GABA含量和5-HT／5-mAA显著低于对照组（P〈0．05）,GLU含量、DA／5-HT和GLU／GABA显著高于对照组（P〈0．05）;恢复12h。服药组5-HT含量和5-HT／5-HIAA极显著低于对照组（P〈0．01）,GLU、DA、GABA含量和DA／5-HT明显高于对照组（P〈0．05）。结论：在大鼠运动至力竭性的过程中,复方中药制剂有明显抑制5-HT、5-HIAA、DA、GABA生成和促进GLU中枢递质合成的作用,其综合效应表现为兴奋性递质相对显著增多,使中枢神经兴奋性增强、明显延长大鼠运动时间和促进中枢疲劳的恢复。     

复方树舌液对肠道微生态失调小鼠的调节作用

目的应用复方树舌液作为微生态调节剂对肠道微生态失调小鼠进行调节。方法用盐酸林可霉素造成菌群失调模型,用复方树舌液进行治疗,在治疗期间分别检测各组小鼠的肠道优势菌群、乙酸、内毒素含量及肝脏肠杆菌易位。结果小鼠肠道菌群失调得到恢复、小鼠肠道内乙酸含量增加、内毒素含量下降、易位至肝脏的肠杆菌数量减少,与自然恢复组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,树舌组优于丽珠肠乐组。结论复方树舌液作为益生元对小鼠肠道菌群失调具有调节作用。     

Effects of assay and acclimation temperatures on incorporation of amino acids into protein of isolated hepatocytes from the european eel, Anguilla anguilla L.

Hepatocytes of adult eels acclimated to 5° C, 10° C and 20° C, respectively were isolated by perfusion of the liver with collagenase. The liver-somatic index and the protein content of liver cells showed significantly higher values in fish kept at the lower temperatures. However, in the adenine nucleotide content and energy charge no significant differences were observed between the 5° C and the 20° C acclimation groups. The incorporation of radioactivity from a ¹⁴C-labelled amino acid mixture into perchloric acid precipitates was used as an estimate of over-all protein synthesis. When eel hepatocytes were incubated in Hanks' solution containing tracer amounts of amino acids, labelling of perchloric acid precipitates showed linear time courses over at least 60 min at 10° C and 20° C assay temperatures. The total cellular radioactivity, however, exhibited non-linear time courses. In the measurement range from 5° C to 25° C Arrhenius plots of protein labelling exhibited a discontinuity in both groups of fish. Hepatocytes from 10° C-acclimated eel showed almost twice the incorporation rates of amino acids as those from the 20° C-acclimated fish. It is concluded that high temperature dependencies in the low temperature range require an increase in the capacity of the apparatus for protein synthesis during cold acclimation.     

饲料中复方中草药对大菱鲆生长、饲料利用及非特异性免疫的影响

研究探讨了不同剂量的复方中草药[党参(Codonopsis pilosula Nannf.)、白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)、茯苓(Poria cocos Wolf.)、熟地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.)、甘草(Glycyrrhiza urale...