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红豆杉愈伤组织超代温保存有关因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对红豆杉愈伤组织超低温保存中几个主要因素进行了比较,试验证明:预培养时间、预培养其中蔗糖浓度、保护剂的组合以及冰冻降温方法与超低温保存后的相以细胞活力密切相关。试验结果表明,在含8%蔗糖的62号液体培养基中振荡预培养6d,红豆杉愈伤组织在超低温保存后细胞活力保持最高。有效的冷冻保护剂为10%山梨醇+10%DMSO,冷冻方法以分步冷冻和慢冻较为适宜,而经快冻的愈伤组织复苏后活力低下。 相似文献
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目的:建立脐带和胎盘组织的低温保存方法,为自体化基因治疗和细胞治疗提供丰富的细胞储备。方法:取离体的脐带和胎盘,冲洗干净,以体积比20kg/m3、15kg/m3、10kg/m3,5kg/m3共4组浓度的DMSO作为抗冻剂,采用程序降温,至-80℃后转入液氮中保存,采用细胞培养与电镜扫描进行效果评估。结果:10kg/m3组组织低温保存效果最好,15kg/m3组次之,5kg/m3组效果最差,培养所得的胎盘组织来源的基质样细胞具有间充质干细胞某些生物学特性。结论:低温保存脐带和胎盘组织切实可行,为自体基因治疗和细胞治疗提供了细胞储备。 相似文献
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甘蔗愈伤组织超低温保存中一些因素的研究 总被引:13,自引:0,他引:13
对甘蔗愈伤组织超低温保存中几个主要因素进行了多方面的对比试验,为甘蔗愈伤组织的超低温保存提供了一套较佳的技术。实验结果表明:愈伤组织的适宜培养时间是10—15天。较好的冰冻保护剂是10%二甲亚砜(DMSO)+0.5mol/l 山梨糖醇,在0℃预处理30—45分钟。较佳的冰冻程序是以1℃/分的降温速度从0℃降到-40℃,停留1—3小时,然后浸入液氮中贮存。用自来水冲洗化冻同40℃水浴中化冻的效果一样良好。化冻后的愈伤组织在黑暗培养中生长好,存活率高。经过半年超低温保存后的愈伤组织在再培养中生长良好,并产生大量的新植株。此项结果为甘蔗种质的长期保存提供了可能性。 相似文献
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水稻悬浮细胞的超低温保存研究 总被引:4,自引:1,他引:3
本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3-5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L,山梨醇预培养,10%DMSO+0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,数目明显减少,从 相似文献
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为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异, 对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究。以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料, 首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间, 转至不同的冰冻保护剂中直接液氮冷冻或-20oC预冷冻2 h, 然后液氮超冷冻保存, 37oC水浴迅速解冻, 并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤, 以中性红染色测定细胞的存活率, SPSS13.0软件进行统计学分析。结果表明: 预培养基中蔗糖浓度、预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响, 筛选出4%蔗糖浓度预培养3 d、9号保护剂、0oC停留30 min后直接冷冻为超低温保存的最佳方案, 通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果。 相似文献
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L. W. Chakrin R. M. Marchbanks J. F. Mitchell V. P. Whittaker 《Journal of neurochemistry》1972,19(12):2727-2736
—The specific radioactivity of acetylcholine liberated from the surface of the rabbit occipital cortex has been compared with that of the underlying cortical synaptosomal and vesicular acetylcholine at varying times after the administration of [N-Me-3H]choline. Choline was administered by diffusion from solutions placed in cups formed by Perspex cylinders applied to the surface of the cortex. Acetylcholine was collected by diffusion into these cups. The specific radioactivity of the acetylcholine declined progressively. The effect of stimulation of afferent cholinergic pathways was to cause a fall in the specific radioactivity of the released acetylcholine. However this was always higher than that of the synaptosomal or vesicular acetylcholine as represented by fractions P2 and D of the authors’fractionation scheme. It is concluded that acetylcholine released from the cortex must come from a store or stores more recently synthesized than the endogenous acetylcholine of these subcellular fractions. 相似文献
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