扁蓿豆体细胞胚的诱导和植株再生

扁蓿豆实生苗的根、下胚轴、子叶、叶片和叶柄外植体,在含２,４—Ｄ２—０．２５ｍｇＬ－１与ＫＴ０．２５－２ｍｇＬ－１及２,４—Ｄ０．５ｍｇＬ－１与ＺＴ０．５ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．５ｍｇＬ－１与ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ琼脂培养基上均可产生愈伤组织．愈伤组织在含２,４—Ｄ０．５—０．１ｍｇＬ－１与ＫＴ０．５—０．１ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．２５＋ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基上可诱导分化出体细胞胚．体细胞胚在无激素的培养基上发育成完整植株．用海藻酸钠包襄体细胞胚制成人工种子,其发芽率和植株转换率分别为９５％和５３％．     

可乐茄叶肉原生质体培养再生植株

本文报道茄属果树可乐茄（ＳｏｌａｎｕｍｑｕｉｔｏｅｎｓｅＬａｍ．）叶肉原生质体的分离、培养及植株再生。幼嫩叶片原生质体经酶游离、纯化后,以１×１０４个／ｍｌ密度培养于稍加改良Ｋ８ｐ（附加２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）、ＮＡＡ１．０ｍｇＬ（－１）和ＢＡ０．５ｍｇＬ（－１））的培养基中,三天后开始分裂,一周分裂３—４次。一个月形成小细胞团,植板率为０．１—０．２％,小细胞团转培养于ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）上增殖后进行分化。原生质体来源愈伤组织在ＩＡＡ（０．１—１．０ｍｇＬ（－１））与ＢＡ或ＺＴ组合的培养基中能诱导器官发生,芽分化率最高可达４２．９％;但ＩＡＡ、ＢＡ、ＺＴ三者一起使用未见任何器官分化。小芽在ＭＳ＋ＩＡＡ０．２ｍｇＬ（－１）中生根成植株。可乐茄叶肉原生质体的植株再生,可应用于育种和茄属植物遗传工程研究。     

紫菀花序芽培养及植株再生

１植物名称紫菀（Ａｓｔｅｒｔａｔａｒｉｃｕｓ）。２材料类别花序芽。３培养条件愈伤组织、不定芽诱导及增殖培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ０．５～２．０ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）;生根培养基：（２）ＭＳ＋ＮＡＡ０．５～２．０＋６－ＢＡ０．２,（３）１／２ＭＳ（大量元素减半）＋ＮＡＡ０．５～２．０＋６－ＢＡ０．２。上述培养基均加０．８％琼脂和３％蔗糖,高温高压灭菌前ｐＨ值调至５．８。培养温度为（２３１２）℃,每天光照１２ｈ,光照度为１５００～２０００ｌｘ４生长与分化情况４．１愈伤组织及不定芽的诱导剪取长约０…     

香石竹的叶片培养及植株再生

１植物名称香石竹（Ｄｉａｎｔｈｕｓｃａｒｙｏｐｈｙ－ｌｌｕｓ）,别名康乃馨。２材料类别无菌苗叶片。３培养条件以ＭＳ为基本培养基。分化培养基附加：（１）６－ＢＡ１．０ｍｐ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．３;（２）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．１;（３）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．０５。增殖培养基附加６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１。分化和增殖培养基均加蔗糖３％、琼脂０．７％,ｐＨ５．８。生根培养基为１／２ＭＳ附加ＮＡＡ０．１,蔗糖２％,琼脂０．６％,ｐＨ５．８。培养温度为（２５±１）℃,光照１２ｈ·ｄ－１,…     

决明组织培养的研究

以草决明无菌苗子叶为外植体,接种于７类诱导愈伤组织的培养基上：Ａ．ＭＳ＋２．０２,４－Ｄｍｇ／Ｌ（以下单位省略）＋０．３ＢＡ＋０．２ＮＡＡ．Ｂ．ＭＳ＋０．２２,４－Ｄ十０．２ＢＡ＋２．０ＮＡＡ．Ｃ．ＭＳ＋１．０２,４－Ｄ＋０．５ＢＡ＋０．２ＫＴ．Ｄ．ＭＳ＋０．７ＢＡ＋１．５ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｅ．ＭＳ＋１．５２,４－Ｄ＋０．７ＢＡ十０．２ＭＡＡ．Ｆ．ＭＳ＋０．４２．４－Ｄ＋１．０ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｇ．ＭＳＢ（ＭＳ的无机成份和Ｂ５有机成分）＋０．１５ＮＡＡ＋ＢＡ,ＫＴ和ＺＴ各０．５。８～１５天后分别有９０～９９．６％的子叶片被诱导出愈伤组织,并且Ｆ．与Ｃ．类培养基对诱导愈伤组织比较理想,放于Ｇ培养基上的愈伤组织有９．２～３０．２％的芽分化率。芽在生根培养基１／２ＭＳ＋０．２ＩＢＡ中、９８％生根,形成完整的再生植株。     

玫瑰海棠的组织培养及快速繁殖

１植物名称玫瑰海棠（Ｂｅｇｏｎｎｉａ　ｍａｎｎｉｉ）。２材料类别幼芽、叶片。３培养条件以ＭＳ为基本培养基。诱导丛生芽培养基：（１）ＭＳ＋ＫＴ１．０ｍｐ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．１。丛生芽增殖培养基：（２）ＭＳ＋ＫＴ１．０＋ＮＡＡ０．０５;（３）ＭＳ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．０５。诱导生根培养基：（４）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．２。上述培养基均加３％蔗糖,０．８％琼脂,ｐＨ５．８。培养温度（２６±２）℃,光照度约为２０００ｌｘ,光照１４ｈ·ｄ－１。４生长与分化情况４．１无菌材料的获得将玫瑰海棠…     

墨兰原球茎生长的研究

以墨兰种子胚经培养诱导萌发形成的原球茎为材料,研究其生长的最适条件。结果表明：最佳基本培养基是ＭＳ培养基;ＮＡＡ０．５ｍｇＬ＋ＢＡ１．０ｍｇＬ－１有利于生长和分化;在培养基中加入１％蔗糖和０．１％活性炭最有利于原球茎生长;ｐＨ５．０偏酸环境适合于生长;每天给予１５．５ｕｍｏｌｍ－２Ｓ－１１６ｈ的光照最佳。如将上述单因子组合在一起,其原球茎鲜重增长率比对照（ＭＳ培养基）高４６％。在不同切割方式中,掰开法鲜重增长率比纵切法或横切法都高。     

枸杞髓组织离体培养及高频率植株再生的研究

枸杞髓组织在４种ＭＳ培养基上都能诱导出愈伤组织,诱导率５３．７％～１００％。在培养基ＭＳ＋６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ获得的愈伤组织,呈颗粒状,分散性能好,胚性细胞多．将其转移到ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｍ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上获得大量绿色小芽,小芽在ＭＳ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基上得到快速繁殖,繁殖系数５０～１５０株／芽·月。丛生芽在ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｔｍｇ／Ｌ的培养基上形成完整植株     

刺槐宽叶和四倍体无性系的组织培养

１植物名称刺槐（Ｒｏｂｉｎｉａｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ）优良无性系：Ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｌｏｃｕｓｔ、Ｇｌｇａｓｔｙｐｅｌｏｃｕｓｔ。２材料类别带腋芽的茎段。３培养条件（１）启动培养基：ＭＳ＋６－ＢＡ０．２５ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．０５。（２）分化培养基和继代培养基：ＭＳ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１＋ＡｇＮＯ３１０,ＭＳ＋６ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１。上述培养基均添加３％蔗糖、０．６％琼脂。（３）生根培养基：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．２＋ＮＡＡ０．２,添加２％蔗糖０．６％琼脂。培养基ｐＨ…     

宫粉郁金的组织培养和快速繁殖

１植物名称宫粉郁金（Ｃｕｒｃｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ）。２材料类别　块茎萌动芽。３培养条件　萌动芽生长培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ１ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．２。不定芽增殖与愈伤组织诱导培养基：（２）ＭＳ＋６－ＢＡ１０＋ＫＴ５;（３）ＭＳ＋６．ＢＡ１０;（４）ＭＳ＋６－ＢＡ５＋ＫＴ２．５;（５）ＭＳ＋６－ＢＡ５;（６）ＭＳ＋６－ＢＡ２＋ＫＴ１。生根培养基：（７）ＭＳ＋ＮＡＡ０．５;（８）ＭＳ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．５;（９）ＭＳ。以上培养基均加０．７％琼脂,３％蔗糖,ｐＨ５…     

芥蓝下胚轴离体培养及高频率植株的再生

三个芥蓝品种下胚轴离体植株再生的条件的研究结果表明：下胚轴切口处可直接诱导出芽,诱导“早花尖叶芥蓝”、“中花尖叶芥蓝”和“迟花尖叶芥蓝”直接出芽的最佳激素组合分别为2．0mgL-1BA,0．3mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA,0．5mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA,其相应的芽发生频率分别为84．6％,86．7％,93．3％。诱导芽发生的最适蔗糖浓度是1％。培养基中加入4．0mgL-1AgNO3和500mgL-1MES可显著提高芽再生频率。再生芽在MS附加0．1mgL-1NAA的培养基上诱导生根形成完整植株。离体再生苗与种子萌发实生苗田间生长外形差别不大,但长势稍慢。     

水杉愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导器官发生途径,建立了水杉（Metasequoia glyptostroboides）的植株再生体系,探讨了不同外植体（种胚、幼叶切块、茎段、根段）和植物生长调节剂对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响。结果表明：以种胚、无菌苗叶片、茎段和根作为外植体,在MS补加2,4-D、NAA和6-BA不同组合的培养基上都能诱导得到愈伤组织,其中种胚诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达100%,茎诱导效果次之,诱导率为97.1%。诱导愈伤组织效果较好的培养基有：MS＋1.0mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-16-BA、MS＋0.1mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA和MS＋0.5mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-1NAA。以愈伤组织在MS培养基上植株再生效果最好,再生率为62.5%。     

影响四季桔器官发生的因素

对四季桔胚轴直接出芽、愈伤组织诱导及植株再生能力的研究表明：上、下胚轴在含有BA的MT培养基上,均能直接出芽,但上胚轴出芽能力明显高于下胚轴,最高出芽率为96．9％。外植体在培养基上的接种方式,对出芽也有一定影响,上胚轴切段以形态学下端垂直插入,出芽率高,且在培养前期表现尤为突出。胚轴愈伤诱导的适宜培养基为MT＋IBA0．5mg-1＋BAgmg-1。愈伤组织分化时,上、下胚轴愈伤组织所要求的BA浓度分别为4mgL-1及2mgL-1。在根的诱导中,附加的生长素种类,不仅影响生根率的高低,而且影响上部茎叶的生长,其中以加入lmgL-1IBA的效果最好,生根率达84．4％。     

阳桃胚乳愈伤组织诱导和不定芽发生的研究

首次成功建立阳桃胚乳组织培养并获得胚乳再生植株。胚乳愈伤组织诱导以培养基MS 2,4-D2．0mgL^-1 BA0．2mgL^-1的效果最好,诱导频率可达94．7％,愈伤组织乳白色,结构致密,生长旺盛;将其接种在培养基MS ZT3．0mgL^-1 NAA0．2mgL^-1上,愈伤组织由乳白色致密型转变为淡绿色致密型,进而形成绿色芽点,分化出不定芽,分化频率可达73．3％;胚乳植株在培养基MS ZT2．0-2．5mgL^-1 NAA0．05mgL^-1上进行壮苗和营养繁殖。     

文心兰类原球茎的愈伤组织诱导及其植株再生

该研究首次以文心兰的类原球茎( protocorm-like bodies, PLBs)为外植体进行愈伤组织诱导及其植株再生培养,并分析了不同浓度的TDZ和2,4-D配比对愈伤组织增殖的影响。结果表明：以1/2MS为基本培养基,添加1 mg.L-1 TDZ与3 mg.L-12,4-D,从接种的 PLBs上可以诱导出乳白色的、较疏松的愈伤组织,诱导频率达到100％。愈伤组织继代培养时,在2,4-D浓度为0.5~2.0 mg.L-1的范围内,其增殖主要受TDZ浓度的影响,TDZ浓度从1.0 mg.L-1降低到0.5 mg.L-1,愈伤组织鲜重增殖倍数显著增加,由最低的4.50倍增加到最高的6.04倍。愈伤组织增殖的最适培养基为1/2MS ＋0.5 mg.L-1 TDZ ＋1.0 mg.L-12,4-D。将在最适愈伤组织增殖培养基上继代培养约1个月的愈伤组织转移到T2培养基(3.5 g.L-1花宝1号＋20 g.L-1红薯＋25 g.L-1香蕉＋1 g.L-1 tryptone ＋20 g.L-1蔗糖＋3.5 g.L-1 phytagel)上,黑暗培养1个月后,每克鲜重的愈伤组织约诱导出1328.67个PLBs。将诱导出的PLBs转移到新鲜的T2培养基上光照培养1个月,萌发率为90.12％。而将小植株转移到添加1 g.L-1活性炭的1/2MS培养基上,成苗率达到100％。该研究结果成功建立了文心兰的高频愈伤组织诱导及其植株再生体系,为文心兰基因工程育种提供了一个高效、稳定的转化受体系统。     

松潘乌头块根愈伤组织诱导及再生体系的建立

以野生松潘乌头块根为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生培养。由于松潘乌头离体培养时,组织褐变严重,因此在愈伤组织诱导前须进行除褐培养,培养基以MS＋6-BA 1.0 mg·L^-1＋VC 300 mg·L^-1＋PVP 200 mg·L^-1效果较好,连续转移3次后褐变率显著降低到10%。适宜的愈伤组织诱导培养基为MS＋2,4-D 3.0 mg·L-1＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋LH 500 mg·L^-1,诱导率100%;不定芽分化培养基为MS＋ZT 1.0 mg·L^-1＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93%;不定芽增殖培养基为MS＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.3 mg·L^-1,平均增殖倍数为6.0左右;生根培养基为1/2MS＋IAA 0.3 mg·L^-1＋VC 100 mg·L^-1（或PVP 300 mg·L^-1）,平均生根数10条左右,生根率为96%以上。将瓶苗移栽于森林土和蛭石以1：1（V/V）混合的基质中,生长良好,成活率达90%以上。     

菊芋组织培养快繁技术的建立

以菊芋带芽点的薯盘及带节的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的生长调节物质,研究菊芋组织培养和快速繁殖的技术环节,最终筛选出最优技术参数组合,建立菊芋再生体系。试验结果表明：茎段外植体是理想的快速繁殖材料,正接（形态学下端向下）是最佳的接种方式。芽诱导最佳培养基为MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.2mg·L-1IBA,诱导率为95%;继代增殖最适宜培养基为MS＋2.0mg·L-16-BA;壮苗培养最佳培养基为MS＋0.1mg·L-16-BA;生根适宜培养基为MS＋0.2mg·L-1NAA,生根率达100%;移栽成活率达95%,大田种植成活率达95%以上。     

植物生长物质对大花红景天愈伤组织诱导及苗再生的影响

以大花红景天植物的茎、叶、芽、种子为材料,采用DPS软件正交设计法,通过添加不同植物生长物质,考察其对大花红景天愈伤组织形成及苗再生的影响,为低海拔条件下建立大花红景天植株再生体系提供数据基础。结果表明：种子和芽是诱导愈伤组织最适宜的外植体;植物生长物质对愈伤组织形成的影响大小为6-BA〉KT〉2,4-D〉NAA〉IAA,愈伤组织形成的最佳培养基为MS＋6-BA 4.0 mg.L-1＋KT 0.1 mg.L-1＋NAA 0.1 mg.L-1＋IAA 0.2 mg.L-1;不定芽分化的最佳培养基为MS＋TDZ 0.5 mg.L-1＋NAA 0.5 mg.L-1,诱导率达63.14%,不定芽数平均为11.4。本试验获得的最佳培养基配方,适宜在低海拔条件下进行快速诱导大花红景天的愈伤组织和植株再生。     

廊坊杨3号快繁和转基因的再生系统

对杂交杨树新品种廊坊杨3号（Populus langfangensis 3,(P. deltoides (“Shan Hai Guan”)×((P. simonii × pyramidalys)₁₂×Ulmus pumila) 的离体叶片和茎段在附加BA、NAA、IBA和2,4-D的MS培养基上的直接和间接的器官分化、愈伤组织形成和植株再生进行了研究。叶柄和叶片最容易在叶脉处直接诱导生芽。从叶片直接诱导生芽的激素条件为1～2 mg·L^-1 BA和0.5 mg·L^-1 IBA,最高生芽率可达90%。2,4-D促进愈伤组织的形成。由愈伤组织诱导生芽的激素条件为0.3～0.5 mg·L^-1 BA 和 0.02 mg·L^-1 IBA或NAA,生芽率达76%。较好的生根条件为0.1 mg·L^-1 BA和0.2～0.5 mg·L^-1 IBA,生根率可达67％。以上再生条件为廊坊杨3号的转基因育种和无性快繁技术提供了可能。     

提高木薯循环培养的次生体胚再生植株频率研究

用木薯成熟体胚子叶作外植体诱导次生体胚,接种7d或15d后分别在诱导培养基或成熟培养基中加入AgNO3,可明显提高植株再生频率。前者可使体胚再生植株频率由对照的40．5％提高到58．1％;后者可使植株再生频率由对照的36．1％提高到61．3％。用ABA进行上述处理,效果更加显著。诱导期处理,可使植株再生频率由对照的40．5％提高到72．6％;成熟期处理,植株再生频率由对照的36．1％提高到81．3％。若诱导7d后,将2,4－D浓度由4．0mgL-1降至2．0mgL-1,并加AgNO3,继续诱导15d,转到附加0．25mgL-1ABA的成熟培养基中培养至30d,能极显著地促进体胚的发育和成熟,使植株再生频率达到一个相当高的水平,最高达95％,平均每个外植体产生的植株数达39．6个,分别相当于对照的2．38倍和2．46倍。