132株奇异变形杆菌的临床分布及药敏分析

目的了解宁波市妇女儿童医院奇异变形杆菌的临床分布和耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法对该院2009年6月1日至2011年5月31日期间分离的132株奇异变形杆菌进行分析,菌株鉴定采用法国生物梅里埃公司的VITEK 60分析仪,药敏试验采用K-B法,用参考菌株作质量控制。结果该院分离的奇异变形杆菌主要来自尿液（51.50%）,其次是创口分泌物（21.21%）,再次是阴道分泌物（19.70%）,其他（7.59%）。对奇异变形杆菌敏感率较高的抗生素是：丁胺卡那霉素、氨曲南、美罗培南、亚胺培南、头孢唑林、头孢呋辛酯、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、马斯平、头孢西丁、罗红霉素、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦。结论加强奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性的测定,是临床合理应用抗生素的重要依据。     

大熊猫生殖道感染奇异变形杆菌一例

中国保护大熊猫研究中心一只雌性成体大熊猫“张卡”（5．5岁,50kg,2001年5月抢救于宝兴野外）发生泌尿生殖道奇异变形杆菌感染,经选用敏感抗生素治疗痊愈。奇异变形杆菌导致大熊猫泌尿生殖道感染在兽医临床上未见报道,对兽医临床有较好的参考价值,特报道如下。     

不同因素对奇异变形杆菌（PM10）R质粒消除的影响

本文报告了应用消除剂（ＳＤＳ．ＥＢ）和高温条件下对奇异变形杆茵ＰＭ１０Ｒ质粒的消除作用。实验结果表明：０．００１％ＳＤＳ对四种耐药性Ｒ质粒的消除率在０．４—０．８,消除类型为Ｋｍ＋Ｓｍ。ＥＢ和高温条件下未获得质粒消除株。     

不同因素对奇异变形杆菌（PM10）R质粒消除的影响

０．００１％ＳＤＳ在４２℃及３７ＯＣ条件下,对奇异变形杆菌（ＰＭ１０）质粒具有消除作用,消除率分别为０．８％和０．４％,６个质粒消除株均对Ｋｍ、Ｓｍ敏感。单纯提高培养温度或经０．００１％ＥＢ作用后均未获得质粒消除株。     

乳粉中普通变形杆菌和奇异变形杆菌复合PCR-DHPLC检测技术的建立

应用复合PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立乳粉中普通变形杆菌和奇异变形杆菌的高通量检测方法。根据普通变形杆菌的blaA和blaB基因及奇异变形杆菌的ureR基因序列分别设计特异性引物,复合PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测,并以37株参考菌株做特异性试验。试验结果表明,该方法具有很好的特异性,经复合PCR-DHPLC可同时检测乳粉中普通变形杆菌和奇异变形杆菌。该方法可以快速、准确、高通量检测普通变形杆菌和奇异变形杆菌,是乳粉中致病菌高通量检测的新技术。     

尿液中奇异变形杆菌耐药性变迁及监测分析

目的了解尿液中奇异变形杆菌临床分布及耐药性变迁情况,为临床医生合理选用抗生素提供理论依据。方法收集2008年至2012年住院及门诊患者尿液标本中分离的215株奇异变形杆菌,采用VITEK2 Compact全自动微生物分析仪进行鉴定及药敏试验,采用WH0NET 5.4软件进行统计分析。结果2008、2009、2010、2011和2012年分离奇异变形杆菌分别为26株（占12. 2% ）、26株（占12.2% ）、36株（占16. 9% ）、55株（占25. 8% ）和72株（占33. 8% ）,总计215株。奇异变形杆菌对呋喃妥因的耐药率最高,均〉90%,对丁胺卡那霉素和美洛培南的耐药率最低,均为0%,对左旋氧氟沙星的耐药率在2008？2011年均〉50% ,2012年为28.1% ;对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率在2008 - 2009年均〉20%,而2010-2012年均〈5% ;头孢替坦、舒普深耐药率均〈7%。结论奇异变形杆菌的分离率从2008 -2012年呈日益增长趋势,提醒我们随着临床上大量使用抗生素,医院的感染率亦不断上升。耐药率从2008-2011年基本呈上升趋势,而在2012年有所下降,这可能与近几年本院临床严格执行抗菌药物的合理应用有关。     

奇异变形杆菌耐药性及亚胺培南不敏感株感染的临床特点研究

目的研究奇异变形杆菌的临床分布和耐药情况、亚胺培南不敏感奇异变形杆菌感染的临床特点。方法分析浙江大学医学院附属第一医院2013年1月至2013年12月分离的非重复奇异变形杆菌的药物敏感性、临床分布,回顾性分析亚胺培南不敏感奇异变形杆菌感染患者的临床资料、治疗及预后情况。结果2013年该院共分离107株奇异变形杆菌,以分离自尿液最多,其次为痰液;来源最多的是外科病房和重症监护病房。体外药敏显示：奇异变形杆菌对美罗培南、厄他培南、头孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星等抗菌药物敏感性良好,敏感率达85%以上;对亚胺培南敏感率为80.4%;对头孢呋辛、环丙沙星、氨苄西林、头孢曲松、庆大霉素耐药率较高,超过30%;对呋喃妥因耐药率为99%。其中21株亚胺培南不敏感奇异变形杆菌对包括美罗培南、厄他培南在内的其他各类抗菌药物耐药率与亚胺培南敏感株基本相仿。亚胺培南不敏感奇异变形杆菌引起院内获得性感染主要发生在入住ICU、外科术后、广谱抗菌药物使用后、留置各类置管和梗阻性尿路疾病的患者,可引起泌尿系统、皮肤创面、腹腔、血流、生殖道等部位感染,表现为全身炎症反应及局部感染症状。选择敏感抗菌药物治疗后该部分患者预后良好。结论奇异变形杆菌对三、四代头孢菌素,β-内酰胺酶抑制剂合剂等抗生素敏感性良好。亚胺培南不敏感奇异变形杆菌对其他碳青酶烯类抗生素仍保持较高的敏感性。亚胺培南不敏感奇异变形杆菌所引起院内获得性感染主要发生在入住ICU、外科术后、广谱抗菌药物使用后、留置各类置管和梗阻性尿路疾病的患者,预后良好。     

奇异变形杆菌耐药性的4年监测及碳青霉烯类耐药株的耐药机制研究

目的了解本地区2007年到2010年奇异变形杆菌的临床分布与常用抗菌药物的耐药情况,了解碳青霉烯类耐药菌株可能存在的机制。方法回顾分析2007年到2010年临床分离奇异变形杆菌的资料及整体耐药情况;对保存的耐亚胺培南（IPM）、美罗培南（MEM）或厄他培南（ETP）的菌株进行复苏,并做Hoage试验进行产碳青霉烯酶的确认,同时对试验菌株进行耐药基因的PCR扩增检测。结果2007年到2010年,奇异变形杆菌在临床各送检样本中以痰液分离率最高：51．1％、34．4％、22．1％和35．4％,其次为尿液：14．3％、28．O％、34．9％和33．6％;耐药监测分析显示,4年间对喹诺酮类、青霉素类、头孢菌素类及氨基糖苷类耐药率相对较高且较为稳定;对碳青霉烯类耐药最低但增加明显,亚胺培南从2007年的1．8％升到2010年的16．1％,美罗培南从2007年的1．7％升到2010年的16．8％。15株耐碳青霉烯类菌株中,Hoage试验阳性7株,6fn。基因阳性11株,blaCTX-M基因阳性13株。结论本地区奇异变形杆菌对临床常用的抗菌药物均有较高的耐药性,对碳青霉烯类药物的耐药率最低,但增加明显。位于质粒上的blaKPc基因所产生的碳青霉烯酶和6如cTx-M基因所产生的超广谱β-内酰胺酶是本菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要原因,临床应引起高度重视。     

一株奇异变形杆菌对铜绿假单胞菌多细胞行为的抑制作用

目的：抗生素耐药性成为了全球性的健康问题。研究发现病原菌的多细胞行为在抗生素的耐药性中起着至关重要的作用（尤其是生物膜）,因而通过抑制多细胞行为而控制耐药性成为当务之急。本文以奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）为研究对象,考察它的发酵滤液对一种机会致病菌——铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）多细胞行为的作用,以期得到一株多细胞行为抑制菌：在不影响Paerugiliosa生长的前提下,抑制生物膜形成、EPS产生以及定向丛集运动,解除保护,减缓扩散,为降低Paemgi—nosa耐药性,增强抗生素作用效果提供可能。方法：采用结晶紫生物膜测定法、蒽酮一硫酸法、平板检测法,探究Pmirabilis发酵滤液对Paemginosa生物膜、胞外多聚物、定向丛集运动和生长的影响。结果：Pmirabilis发酵滤液能显著抑制Paeruginosa生物膜量,在体积百分比浓度为1％时,抑制率可达60．9％。该菌的发酵滤液还能阻碍Paeruginosa的定向丛集运动,减弱它的吸附和扩散运动;同时,也减少了Pacrugillosa胞外多聚物的产量,在滤液体积百分比浓度为1％时,抑制率达到45．9％。更重要的是,固体平板实验证明该发酵滤液对P．aemginosa的生长没有影响。结论：Pmirabilis在不影响病原菌生长的前提下,对病原菌的多细胞行为有一定的控制作用。其发酵滤液中存在着抑制微生物膜、定向丛集运动等的成分,在治疗细菌感染性疾病和降低抗生素耐药性方面有潜在应用价值。     

鹅源奇异变形杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

【背景】奇异变形杆菌(Proteusmirabilis)是一种人兽共患机会致病菌,革兰氏阴性,兼性厌氧,呈多形性。【目的】探明内蒙古自治区通辽市某养殖场雏鹅发生死亡的病因,研究致病菌的分类地位和毒力基因携带情况。【方法】通过病原菌的筛查和感染试验确定发病原因,对其16S rRNA基因测序,建立病原菌系统进化树,结合BD PhoenixTM 100全自动微生物鉴定仪对病原菌进行分析鉴定,综合判定致病菌的种类及其分类地位;根据已报道的基因序列合成奇异变形杆菌的ure C、zapA、mrp A、ucaA、rsbA、pmfA、atfA、atfC8个毒力基因引物,通过PCR扩增研究病原菌毒力基因携带情况。【结果】致病茵的16Sr RNA基因与已报道的奇异变形杆菌(P.mirabilis)相似性在99%以上,通过构建系统进化树和BDPhoenixTM100全自动微生物鉴定仪鉴定,确定该菌株为P.mirabilis并编号为AYQ-1;8种毒力基因在该致病菌中均被检测到;雏鹅腹腔注射感染可导致雏鹅死亡,半致死浓度(LD_(50))为1.51×10~7 CFU/mL;药敏试验结果显示,该菌对链霉素、氨曲南和氧氟沙星等19种药物敏感,对万古霉素、青霉素和四环素等15种药物耐药。【结论】AYQ-1经鉴定为鹅奇异变形杆菌,毒力基因型为ureC(+)、zapA(+)、mrpA(+)、ucaA(+)、rsbA(+)、pmfA(+)、atfA(+)、atfC(+)型。     

生物波特点的实验观察

以细菌是多细胞有机体的观点,实验观察群体细菌波动生长的特点,发现细菌节律性生长的自组织过程中表现出生物波的开放性、单向性、适应性、节律性、稳定性、趋化性及同步性等特点。关于这些特点的认识方式对生物波的研究有较大的理论和实用价值。     

细菌潜生体胞内节律振动对温度反应的研究

针对细菌潜生体胞内节律性振动对温度的反应性进行实验,以认识环境因素对波源（ＣｅｌＷａｖｅＯｒｉｇｉｎ）的影响,并进一步分析波源运动的机制。用相差显微镜油镜观察奇异变形杆菌（ＰｒｏｔｅｕｓＭｉｒａｂｉｌｉｓ）潜生体（ＣｒｙｐｔｉｃＧｒｏｗｔｈＣｅｌ,ＣＧＣ）菌落边缘,见到沿多个潜生体细胞长轴方向进行的快速黑白交替流动,温度升高时消失,温度降低时加剧。这种群体细胞在原位的同步节律性振荡是细胞在低温下发生胞内分子节律性凝结－溶解交替过程形成的,为一种胞内前分子马达的运动,我们称之为细胞波源     

Electrotransformation of the stable L-form of Proteus mirabilis

Abstract To improve the transformability of stable protoplast type L-forms of Proteus mirabilis for recombinant plasmid DNA, conditions for efficient electrotransformation were explored. Exposing cells from the exponential phase of growth at a density of 6−8 × 10⁹/ml in electrotransformation buffer having a conductivity of 1.4 mS/cm to a field strength of 6.5 kV/cm for a mean pulse duration time of 1.2 ms reproducibly yielded transformation efficiencies in the order of 5 × 10⁴ transformants per μg of DNA. Compared to the polyethylene glycol method for transformation, electrotransformation appeared to be the method of choice for introduction of plasmid DNA into L-form cells.     

Studies on the accumulation of cadmium by a strain of Proteus mirabilis

Abstract A bacterium isolated from a wastewater plant sludge, identified as Proteus mirabilis , was tested for cadmium tolerance and accumulation capacity. The organism was able to grow in the presence of Cd²⁺ up to 300 mg l⁻¹.
Accumulation of cadmium is reported for growing and non-growing cells of the organism. In non-growing cultures a 70% removal of cadmium was observed when the initial concentration of Cd²⁺ was 1 mg l⁻¹ whereas at the same concentration the removal by growing cells was only 22%. The metal was shown to be associated with the cell envelope (80%) and accumulated in the cytoplasm (20%).     

显微镜下的湍流

为了实验观察生物作用所致的新的湍流方式—生物性微观湍流,探索其过程及支配因素,以奇异变形杆菌潜生体进行显微培养发生微生物悬液特殊运动现象,通过对照实验比较分析控制因素。结果表明显微镜下湍流呈整体混乱而局部有序特征,以实验证明具凹坑效应及发生启动温度依赖性和悬液量自控性。通过研究阐明新的湍流自发、自控混沌过程,为湍流研究提供一个可控条件的实验模型,并为生物体内体液流动机制及生理作用研究提供新的认识途径     

一株转化大豆苷元为S-雌马酚菌株的筛选和鉴定

【目的】筛选一株可转化大豆苷元为S-雌马酚的微生物菌株,并对该菌株进行鉴定。【方法】在厌氧条件下采用抗生素抑制非目标菌生长并结合稀释涂平板法进行菌株分离,分离可转化大豆苷元生成S-雌马酚的肠道细菌,并对产物进行结构鉴定。之后通过16S rDNA序列分析,构建该菌系统进化树,结合菌体形态及菌落特征,确立该菌系统发育学地位。【结果】从大鼠肠道内筛选分离到一株可以将大豆苷元转化为S-雌马酚的革兰氏阴性兼性厌氧菌株LH-52(JN861767),16S rDNA序列测序结果 BLAST比对表明该菌株与奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)相似度达到了99%,结合形态特征和生理生化实验结果鉴定该菌为奇异变形杆菌。根据HPLC保留时间、质谱、核磁共振等波谱数据分析确定产物为S-雌马酚。【结论】菌株P.mirabilis LH-52为首次筛选到的可转化大豆苷元为S-雌马酚的兼性厌氧菌,相对于文献报道的严格厌氧菌更适合于工业化生产。