共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
兔阑尾中一种新的21kD的钙结合蛋白的纯化与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
纯化与鉴定了B淋巴细胞中一种新的分子量为21kD的钙结合蛋白(CaBP21)。兔阑尾淋巴细胞匀浆经热变性,Phenyl-Sepharose与DEAE-Sepharose柱层析,自每1kg细胞沉积物中获得SDS-PAGE均一的CaBP215.3mg。HCl水解后的酸性氨基酸(Asp+Glu)含量为26%。如同大多数钙结合蛋白一样,N末端封闭阻止其进行Edman降解。CaBP21中疏水性氨基酸(计Gly,不计Trp)约占46%,碱性氨基酸10%,酸性氨基酸与极性氨基酸约44%。CaBP21有较高的Ser、Tyr含量。肽谱分析等确证CaBP21为2个相同或相似亚基二聚体。以ArsenazoⅢ作Ca2+结合分析表明每分子CaBP21可结合4分子Ca2+,对Ca2+的结合常数约为10-5mol/L。各种性质表明CaBP21是一种不同于其他已知钙结合蛋白的新钙结合蛋白。 相似文献
2.
3.
利用Sephadex G100 及CMSepharose层析法,从白芷悬浮培养细胞的胞外盐提液中纯化了21 kD 钙调素结合蛋白(21 kDCaMBP) ,测其等电点的pH 为8 .9 ,紫外薄层扫描显示其纯度达94 % 以上。以此蛋白为抗原,用免疫小鼠腹水法制备了特异性抗体。由纯化的21 kDCaMBP及其特异性抗体研究其对白芷悬浮培养细胞增殖的影响,结果表明:加入外源纯化的21 kDCaMBP 抑制细胞增殖,半抑制浓度约8 μg/ml;而加入21 kDCaMBP特异性抗体却促进细胞增殖效应。推测胞外内源存在的21 kDCaMBP在生理条件下可能具有参与调节胞外活化CaM 信号分子的浓度,从而调节胞外CaM 的生物学功能。 相似文献
4.
5.
表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性和可溶性蛋白含量的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
0.5mg/L的表油菜素内酯(epi-BR)能显著地促进黄瓜子叶叶绿素a、叶绿素b的含量和叶绿素a/叶绿素b比值的下降,表明eni-BR能促进子叶的衰老。从过氧化物酶(POD)的活性测定及同工酶谱发现epi-BR可提高其活性,暗示它可能通过提高子叶POD的活性而加速子叶叶绿素的降解。另一方面,epi-BR促进子时可溶性蛋白含量的下降,其中主要是RuBP羧化酶含量的下降,同时,epi-BR引起子叶游离氨基酸的累积。 相似文献
6.
白芷细胞外21kD钙调素结合蛋白的生理功能初探 总被引:5,自引:0,他引:5
利用Sephadex G-100及CM-Sepharose层析法,从白芷悬浮培养细胞的胞外盐提液中纯化了21kD钙调素结合蛋白(21kD CaMBP),测其等电点的pH为8.9,紫外薄层扫描显示其纯度达94%以上,以此蛋白为抗原,用免疫小鼠得水法制备了特异性抗体。由纯化的21kD CaMBP及其特异性抗体研究其对白芷悬浮培养细胞增殖的影响,结果表明:加入外源纯化的21kD CaMBP抑制细胞增殖, 相似文献
7.
通过CaM-Sepharose4B亲和层析方法从云南松花粉中提取出10种CaM结合蛋白。它们均能抑制CaM对PDE的激活,但这种抑制可被随后加入的过量的CaM所消除。酶活测定表明CaM结合蛋白中有Ca2+-依赖的ATPase活力,但无植酸酶、过氧化物酶、酸性磷酸酶和磷脂酶D活性。 相似文献
8.
蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及Ca~(2+)、Tb~(3+)离子的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
应用红外光谱技术定量测定了水化膜中蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及在不同比例Ca2+、Tb3+离子的作用下其二级结构的变化。结果表明,NCBP中α-helix含量较低而β-sheet的含量较高,且随不同比例金属离子的加入,1629cm-1处β-sheet峰的变化较明显。同时发现,NCBP具有钙结合蛋白家族特征的SDS-PAGE现象,但不具有激活PDE靶酶的活性,初步认为,NCBP含有与Ca2+浓度相关的特殊的结构和功能。另外,高浓度下Tb3+的结合引发NCBP的分子间聚合,提示对稀土元素的使用要慎重 相似文献
9.
光系统Ⅱ核心天线CP43的纯化及性质 总被引:7,自引:0,他引:7
菠菜放氧的PSII核心复合物经0.8mol/LTris-HCl(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSII核心天线43kD叶绿素a结合蛋白(CP43)。SDS-PAGE显示一条43kD蛋白质带。根据Arnon法和Markewll法的结果表明,每个蛋白质分子结合20~21个分子的叶绿素a。室温条 相似文献
10.
对2株B群脑膜炎奈瑟氏球菌的铁调蛋白的表达及其性质作了研究。在流脑半综合培养基中加人铁螯合剂,诱导了铁调蛋白的表达,并比较了三种铁螯合剂的效果。结果表明,EDDHA是最令人满意的螯合剂。ELISA实验证实含有铁调蛋白的外膜蛋白可以增强对小白鼠的免疫原性。Western-blot实验证明有两种铁调蛋白是有效的抗原成分,分子量分别在75kDa和85kDa附近。由分子量来推算,分别应为FeRP-70及TBP2。 相似文献
11.
前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白(ABP)。在分离纯化ABP的基础上,用SDS-PAGE及SephadexG-150分别测定了ABP的分子量,并做了糖蛋白染色及等电,大测定。实验结果表明ABP是一个分子量为65kD的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为12.7kD的亚单位组成。SDS、β-巯基乙醇处理的ABP仍能与亲和素结合,提示ABP的亚单位能与亲和素结合。氨基酸修饰剂NAI、DTNB、NEM及NBS对ABP与亲和素的结合有不同程度的影响,而HNBB、TNBS及IAA对ABP与亲和素的结合无影响,提示ABP分子中氨基酸残基Tyr、Cyr是ABP与亲和素结合所必需的,可能参与结合位点的形成。另外,测得ABP与亲和素结合的结合常数为1.4×10~(-7)mol/L。 相似文献
12.
CaM BP—10对NAD激酶的抑制效应 总被引:2,自引:0,他引:2
NAD激酶在光合作用等植物生理过程中起重要作用。NAD激酶的激活依赖于钙离子和钙调素(CaM)。从植物中分离得到的一种新的CaM结合蛋白CaM BP-10(BP-10)明显抑制NAD激酶的激活活性。抑制作用可被CaM所克服。动力学研究表明,抑制效应是BP-10与CaM之间特异性相互作用的结果。实验证实BP-10对NAD激酶活性起着重要调节作用。 相似文献
13.
NAD激酶在光合作用等植物生理过程中起重要作用。NAD激酶的激活依赖于钙离子和钙调素(CalmOdulin,CaM).从植物中分离得到的一种新的CaM结合蛋白CaMBP-10(BP-10)明显抑制NAD激酶的激活活性,抑制作用可被CaM所克服.动力学研究表明,抑制效应是BP-10与CaM之间特异性相互作用的结果。实验证实BP-10对NAD激酶活性起着重要调节作用. 相似文献
14.
15.
用一株基因工程菌E.coli2426/pMN表达了麦芽糖结合蛋白-人神经生长因子融合蛋白.菌体超声破碎后,上清液经直链淀粉亲和柱一步即可获SDS-PAGE纯融合蛋白(55kD),为麦芽糖结合蛋白(42kD)与人神经生长因子(13kD)的络合物,产率约10%.产物用鸡胚背根神经节检测生物活性,1BU不大于10ng,与小鼠颌下腺β神经生长因子具有类似生物活性 相似文献
16.
亲和素结合蛋白性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白,在分离纯化ABP的基础上,用SDS-PAGE及ephadex G-150分别测定了ABP的分子量,并做了糖蛋白染色及等电点测定,实验结果表明ABP是一个分子量为65kD的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为12.7kD的亚单位组成。SDS、β-硫基乙醇处理的DDBP仍能与亲和素结合,提示ABP的亚单位能与亲和素结 相似文献
17.
菠菜放氧的光系统Ⅱ(PSⅡ)核心复合物经0.8mol/L Tris(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSⅡ天线组分中的叶绿素α/b结合蛋白(CP29)。SDS-PAGE显示一条30kD蛋白质带。根据Arnon法和Markwell法的结果表明,每个蛋白质分子结合有7~8个分子的叶绿素α和2~3 相似文献
18.
测定了水稻(OryzasativaL.)不同正反交组合的PSⅡ电子传递活性、D1蛋白量、叶绿素a荧光、净光合速率(PN)、光呼吸速率(PR)、RuBPCase/Oase活性,并对RuBPCase进行了动力学分析。结果表明:光抑制条件下粳(japonica)亚种中D1蛋白净降解少,PSⅡ电子传递活性和光化学效率高,表现耐光抑制,而籼(indica)亚种则相反,籼、粳正反交F1的上述指标介于双亲值之间且偏向其母本。进一步观察它们的CO2交换特点,所有基因型水稻PR保持稳定、PN降低,因而PR/PN增加。与耐光抑制的粳亚种相比,对光抑制敏感的籼亚种中PN降低较多、PR/PN增加较多。正反交F1杂种的PR/PN介于双亲值之间且偏向其母本。CO2交换的关键酶RuBPCase/Oase活性和RuBPCase动力学参数没有变化且在基因型间无差异。相关分析表明,D1蛋白量与Fv/Fm、PR/PN的相关系数分别为0.9501和-0.9768。看来,质基因编码的D1蛋白是籼粳杂种稻光抑制特性及其生理遗传的分子基础。 相似文献
19.
水分胁迫对小麦叶绿体色素蛋白复合体的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
水分胁迫可抑制激发能向PSⅡ传递,降低PSⅡ捕光色素蛋白复合体、PSⅡ内周天线色素蛋白复合体以及PSⅠ捕光色素蛋白复合体和PSⅠ反应中心叶绿素a 蛋白复合体的含量,其中以PSⅡ色素蛋白复合体含量下降幅度较大。类囊体膜多肽分析表明,水分胁迫使属于PSⅡ捕光色素蛋白复合体的25 kD蛋白、PSⅡ内周天线色素蛋白复合体的43 kD 和47 kD蛋白以及PSⅠ捕光色素蛋白复合体的21 kD蛋白含量降低,尤以25 kD蛋白含量降幅最大。 相似文献
20.
脂多糖(LPS)结合蛋白(LBP)是存在于下沉人和动物血清中的种糖蛋白,人血清中LBP的正常浓度为5~10μg/ml,急性反应期可升高到200μg/ml,LPB与LPS中的类脂A具有高度亲和性,可作为LPS载体蛋白,催化LPS与CD14结合,刺激单核细胞、内皮细胞等,促进T痰性介绍的释放;LBP还可作为调理素,促进单核细胞等吞噬调理后的LPS和甘兰阴性细菌,故LBP可以调节LPS所致的炎症反应。B 相似文献