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小鼠胚胎干细胞的培养 总被引:14,自引:0,他引:14
ES细胞的培养应满足促进细胞增殖和抑制细胞分化而保持其高度未分化潜能。我们用胚胎成纤维细胞作为饲养层,培养基DMEM中加白血病抑制因子的方法来培养ES细胞。培养的ES细胞呈集落状生长,细胞排列紧密,呈未分化状态。胚胎成纤维细胞作为饲养层是分离培养ES细胞最普遍使用而且有效的方法。本文还围绕ES细胞培养中的促进增殖和抑制分化这两个方面的影响因素进行了讨论。 相似文献
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小鼠ES细胞种系嵌合体的获得 总被引:14,自引:0,他引:14
种系嵌合体的获得是实现ES细胞介导的转基因途径的决定步骤,ES细胞种系分化能力的保持是决定种系嵌合的前提条件,而事体的主种系嵌合体的获得则是判定ES细胞系是否具有种系分化能力的唯一方法,为考察本室新近建立的3种小鼠ES细胞系MESPU21.MESPU22和MESPU29的种系分化能力,选用近交系C57BL/6J及远交系KMW和ICR为受体胚胎提供者,分别通过囊胚注射法和8细胞期桑椹胚注射法进行了嵌 相似文献
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选用10d金黄地鼠胚胎,取神经管原代培养。通过形态学观察、MTT自动比色定量检测、神经细胞蛋白总量测定以及NSE免疫细胞化学方法,研究了aFGF对神经上皮细胞发育的影响。结果发现,aFGF可明显促进突起生长,增加神经细胞存活数,提高线粒体酶的活性,增加神经细胞蛋白总量,诱导细胞分化。上述结果表明,aFGF具有支持原代培养的鼠胚神经上皮细胞的存活、突起生长、诱导细胞分化的作用 相似文献
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用无血清培养基在填充床生物反应生产rHuEPO 总被引:2,自引:0,他引:2
在填充床生物反应器用含5%FBS的DMEM:F12培养基培养产重组人促红细胞生成素(rHuEPO)的细胞C28 ̄10d后,使用自制的无血清生产培养基(SFM-p)生产rHuEPO。SFM-p培养基既能维持细胞生长,又能生产EPO,也便于纯化分离rHuEPO。使用填充床生物反应器培养细胞,能维持培养20 ̄25d,rHuEPO表达水平达12 ̄28.4mg/L之间,反应器的产率达到71.0mg/L/d, 相似文献
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ES细胞即胚胎干细胞,它是由哺乳动物附植前早期胚胎的内细胞团细胞体外分离培养而建立的。其特点是只生长,不分化,并保持发育的多能性。作为一种理想的模型系统与有用的工具,可用于研究哺乳动物早期胚胎的发育与基因的表达。本文从以下四个方面分述了ES细胞的具体应用及其研究进展:1)探讨早期胚胎生长发育的条件;2)研究胚胎组织分化的发生及其诱导;3)用ES细胞与正常胚胎细胞在体外重建胚胎;4)ES细胞体外定位整合外源DNA。 相似文献
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采用凝胶阻滞实验比较分析了鸡烟碱样乙酰胆碱受体(AChR)亚基基因-275/+36片段与分化/未分化肌细胞核抽提物的相互作用.发现未分化肌细胞核内存在两种直接识别AChR启动子的结合活性,其结合反应不能被AChRα亚基基因增强子(含E盒子)竞争阻断,揭示此结合活性与MyoD家族无关,并表现为基因特异性结合;两种结合活性中一种结合活性既存在于未分化细胞,也存在于分化肌细胞,另一种结合活性只存在于未分化肌细胞.存在于未分化肌细胞、特异识别基因的结合活性不同于MyoD家族,也不同于已发现的Id和I-mf(两者不能直接结合DNA),可能与基因在未分化肌细胞中表达的负调控有关. 相似文献
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翅果油树茎段愈伤组织和芽发生的组织的学研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文对翅果油树大宫灯型茎段培养在MS附加6-BA较高,NAA较低浓度的培养基上培养0-30d的组织学变化进行了研究。创伤对其愈伤组织的形成有明显的刺激作用,培养3-4d切口处的皮层细胞,形成层细胞,韧皮部薄壁细胞以及髓组织细胞,甚至表皮细胞均脱化分化开始分裂; 相似文献
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翅果油树茎段愈伤组织和芽发生的组织学研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文对翅果油树大宫灯型茎段培养在MS附加6-BA较高、NAA较低浓度的培养基上培养0~30d的组织学变化进行了研究。创伤对其愈伤组织的形成有明显的刺激作用,培养3~4d切口处的皮层细胞、形成层细胞、韧皮部薄壁细胞以及髓组织细胞,甚至表皮细胞均脱分化开始分裂;培养8~11d,切口明显膨大,起源于髓及维管组织周围薄壁细胞的愈伤组织突起大;培养12~20d愈伤组织块中出现了分生组织和维管组织结节;培养21~30d,愈伤组织表层和近表层细胞分化出芽原基,但与维管组织结节无直接联系。 相似文献