“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验的改进及操作建议

分析DNA和RNA在细胞中的分布状况;针对实际教学中存在的问题进行剖析,推测实验失败的原因,通过对教材实验步骤、材料的适当改进和验证,证明了改进后的实验方案切实可行。     

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验反思

按照人教版必修1生物学教材"观察DNA和RNA在细胞中的分布"的实验步骤进行操作,实验效果不理想,学生提出质疑。教师引导学生查阅资料,采用不同的处理方法设计实验步骤并分组进行实验,通过比较观察,找出最佳实验方案,获得理想实验效果。     

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验的改进

"观察DNA和RNA在细胞中的分布"在实际教学中实验效果不理想。通过探究实验发现Triton X-100可以作为代替盐酸解离作用的透膜剂,避免盐酸解离过度影响甲基绿对DNA的染色,取得了非常好的实验结果。Triton X-100在本实验中最适使用浓度为0.1%～1%,最适透膜时间为5 min。系统地总结了前人对"观察DNA和RNA在细胞中的分布"实验的改进,提出一套稳定且行之有效的实验操作方案。     

关于"观察DNA和RNA在细胞中的分布"实验的改进建议

人教版高中新课标教材“分子与细胞”中“观察 DNA和RNA在细胞中的分布”这一实验效果不理想, 即细胞核内的DNA很难被染料染成实验预期中的绿色。笔者反复重做该实验后得出以下结论:实验失败的关键在于实验前的酸处理对染色效果的影响以及酸对DNA的结构的影响。     

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验教学组织

对“观察DNA和RNA在细胞中的分布”这个实验中的试剂配制及实验步骤做了适当的改进,并分析了该实验的教学组织过程.实验结果表明:细胞核能很好地被染成绿色,细胞质被染成淡红色,改进后的方法使实验操作更简单,实验效果更明显.     

磁珠法快速提取基因组DNA的实验研究

针对临床标本基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,提取步骤繁琐,需要进行离心操作,并且提取过程中会用到苯酚、氯仿等有机试剂,会对操作人员有一定的危害性等不足,本研究拟建立一种适用于临床标本的基因组DNA快速提取方法。在传统的基因组DNA提取试剂和方法的基础上,本研究采用二氧化硅修饰的超顺磁珠设计了一种基因组DNA快速提取方法;探讨磁珠用量、裂解液p H、盐酸胍浓度等因素对基因组DNA提取效率的影响并采用凝胶电泳实验进行验证。当磁珠用量在50~100μg/100 mg样品,裂解液p H约为6,盐酸胍的浓度为6 mol/L时基因组DNA提取效果好、效率高,且磁珠的用量与吸附表面积成正比,但达到一定用量后不会增加提取量,对于100 mg肺组织,适宜的磁珠用量为80μg。此基因组DNA提取方法高效省时,简便快捷,性价比高,适用临床大量样本基因组DNA提取。     

双向凝胶电泳缺陷胶及其原因

双向凝胶电泳是蛋白质组学研究中的关键技术之一,涉及较多的实验步骤和试剂,常出现缺陷胶而导致实验失败。从数千张电泳胶图中选取了21张典型的缺陷胶图,对它们进行了归类和总结,分析和讨论了形成缺陷胶的多种原因,提出了实验改进的方法和注意事项。     

盐酸催化水解槐角异黄酮的研究

利用盐酸甲醇溶液对槐角总异黄酮进行水解制备染料木黄酮。采用高效液相色谱法检测槐角异黄酮水解率。探讨水解时间、盐酸浓度和水解温度对异黄酮水解率的影响,并通过响应面法确定最佳水解条件。实验结果表明最佳水解条件为:水解时间3.8 h、盐酸浓度2.59 mol/L、水解温度78.5℃。在此工艺下,槐角异黄酮水解率达93.38%。     

盐酸催化蔗糖水解中反应速率常数和盐酸浓度等温关系式

酸催化水解蔗糖生产果葡糖浆要求在盐酸存在下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖。盐酸的浓度和反应温度是影响蔗糖水解速率常数的最重要的两个因素。为了达到理想的恒温效果,本文对旋光仪组装了恒温系统;首次通过测定不同盐酸浓度条件下蔗糖水解速率常数拟合出盐酸浓度对蔗糖水解速率常数的新的等温式。实验证实,拟合所获得的等温式具有K=a0 a1CH a2expCH 的形式,这个拟合公式比logK=Ka log(d-c)-(5670/T)-pH文献公式氢离子浓度适用范围更大;比K=K0 KH .CnH 文献公式对数据的拟合更好。     

仿刺参基因组DNA提取方法改进

开发了利用仿刺参管足活体取样提取基因组DNA的方法。按照传统方法提取仿刺参基因组DNA需要杀死实验对象并剖取体腔内纵肌(通常100mg)作为实验材料,并且实验过程中常常因为仿刺参的生物学性状而影响最终实验效果。以仿刺参在生活状态下拔取少量管足(10～20mg即可)作为取样源,在保持仿刺参的生活力不受影响的同时提高了取样效率。对仿刺参基因组DNA的提取方法进行了改进优化,并在常规海洋动物基因组DNA提取方法的基础上增加了部分操作步骤。与常规的基因组DNA提取方法相比,改进后的方法获取的基因组DNA完全符合后续实验要求。而且可随时根据即时效果(中间检测)和后续实验要求调整实验步骤,更增加了实验的可操作性。