自膨式食管金属加膜支架治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘

目的：探讨自膨式食管金属加膜支架治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘的疗效和并发症。方法：2004年1月至2009年6月对63例恶性食管狭窄和气管食管瘘患者实施食管支架置入,男45例,女28例;年龄45～81岁,平均69.3岁。支架为MTN型形状记忆钛镍合金食管加膜支架（南京微创医学科技有限公司生产）,支架植入均在DSA监视下操作完成。结果：63例均一次性放置成功,即刻口服造影通过顺利剂。结论：自膨式食管金属加膜支架是治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘的有效方法。     

自膨式食管金属加膜支架治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘

目的:探讨自膨式食管金属加膜支架治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘的疗效和并发症。方法:2004年1月至2009年6月对63例恶性食管狭窄和气管食管瘘患者实施食管支架置入,男45例,女28例;年龄45～81岁,平均69.3岁。支架为MTN型形状记忆钛镍合金食管加膜支架(南京微创医学科技有限公司生产),支架植入均在DSA监视下操作完成。结果:63例均一次性放置成功,即刻口服造影通过顺利剂。结论:自膨式食管金属加膜支架是治疗恶性食管狭窄和气管食管瘘的有效方法。     

犬气管超微结构分析及低温保存研究

为气管移植的临床需要,气管的低温保存是迫切需要解决的问题,国内外至今未见报导。本文通过电镜观察研究了抗冻剂的种类、浓度,以及降温速率和复温方法等因素对狗气管低温保存效果的影响;初步得到了一些有关参数,可使经低温处理后的气管仍具有较完善的超微结构。     

先天性食管闭锁和气管食管瘘麻醉及围手术期管理

目的:探讨先天性食管闭锁和气管食管瘘(EA/TEF)的麻醉及围手术期管理方法.方法:回顾性分析40例手术治疗的新生儿EA/TEF的临床资料.总结麻醉及围手术期管理及转归情况.结果:40例麻醉过程较平稳顺利完成手术,3例术后拔管,37例继续呼吸支持.术后死亡7例,其中4例术后死亡,3例术后监护人放弃治疗出院后死亡.活33例中重症肺炎7例,低体温8例,吻合口瘘5例,切口感染2例,均经治疗后痊愈出院.结论:良好的麻醉及围术期管理是EA/TEF手术治疗的重要组成部分,是手术顺利进行及术后成功的关键.     

腹腔镜胃底折叠术和食管裂孔疝修补术在胃食管反流病患者中的临床应用研究

目的:研究腹腔镜胃底折叠术和食管裂孔疝修补术在胃食管反流病的临床应用效果。方法:选择2009年5月~2016年8月于我院接受腹腔镜胃底折叠术和食管裂孔疝修补术治疗的92例胃食管反流病患者作为研究对象,并根据不同的胃底折叠术分为Nissen组54例和Toupet组38例。其中Nissen组患者采用Nissen360°术式治疗,Toupet组患者采用Toupet270°术式治疗。分别比较两组患者术后恢复情况、术后症状缓解情况、手术满意度以及吞咽困难发生情况。结果:两组患者术后Visick评分等级为Ⅰ~Ⅱ级占比高于术前,而Ⅲ~Ⅳ级占比低于术前,差异均有统计学意义(P0.05)。Nissen组术后症状缓解率为90.74%(49/54),与Toupet组的81.58%(31/38)相比,差异无统计学意义(P0.05)。Nissen组手术满意度为92.59%(50/54),与Toupet组的84.21%(32/38)相比,差异无统计学意义(P0.05)。Nissen组患者术后1个月吞咽困难发生率为46.30%(25/54),高于Toupet组的23.68%(9/38),差异有统计学意义(P0.05);而两组患者术后6个月吞咽困难发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:腹腔镜胃底折叠术和食管裂孔疝修补术治疗胃食管反流病具有一定的有效性与安全性,可根据患者具体病情选择Nissen360°术式或Toupet270°术式治疗。     

大鼠经皮肾穿刺造瘘模型的建立

目的:建立大鼠经皮肾穿刺造瘘模型,探讨血清胱抑素C在急性机械性肾损伤中的作用.方法:健康雄性Wistar大鼠共34只,其中10只行数字减影肾动脉造影(DSA),其余24只随机分为甲、乙、丙三组,每组8只,甲组(对照组)不穿刺不灌注,乙组(穿刺灌注组)以穿刺孔径1.6 mm、灌注压力80 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)行肾脏穿刺灌注;丙组(单肾组)术前行一侧肾脏切除后以1.6 mm穿刺孔径、80 cmH2O灌注压力行手术.于术后2 h、12 h、24 h分别采血测定血清Cys C、BUN、SCr变化情况,术后取肾组织行病理检查.结果:大鼠行数字减影肾动脉造影,肾脏血管走形分布及集合系统形态结构显示清晰;同对照组相比,丙组术后2 h Cys C与术前相比有统计学意义(P＜0.05);术后12 b、24 h血清Cys C、BUN、SCr与术前相比变化均有统计学意义(术后12 h P＜0.05;术后24 h P＜0.01).结论:以大鼠建立经皮肾穿刺造瘘模型,可反映肾脏损伤情况;评价急性肾机械性损伤时,与SCr、BUN相比,Cys C灵敏性更高.     

犬体外循环模型建立及麻醉处理

目的建立CPB实验动物模型,加强围手术期麻醉管理,探索肺功能保护方法 ,以减少术后并发症的产生。方法 20只实验犬全部用于建立实验动物模型。丙泊酚复合麻醉后,开胸;全血肝素化后,连接体外循环管道开始体外循环,微量泵入丙泊酚50～150μg/（kg·min）维持麻醉;监测麻醉诱导前（T0）、气管插管即刻（T1）、CPB前即刻（T2）、降温至32.0℃（T3）、阻断主动脉前即刻（T4）、阻断主动脉后2min（T5）、开始复温即刻（T6）、停CPB即刻（T7）及停CPB后15min（T8）9个时间结点的鼻咽温度、平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）及心率（heart rate,HR）。结果体外循环期间各时点鼻咽温度均低于T0及T2（P〈0.05）;T1、T2及体外循环期间各时点的MAP明显低于T0（P〈0.05）,体外循环期间各时点的MAP低于T2（P〈0.05）;T4的HR明显低于T0及T2（P〈0.05）。体外循环期间各时点MAP比较无统计学意义（P〉0.05）。结论犬体外循环模型建立的成败与手术技术和麻醉管理密切相关。     

rhBMP-2 诱导异位软骨修复重建兔气管缺损的实验研究

目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)作为激活物诱导异位软骨修复并重建兔气管缺损的可行性。方法:取24只新西兰大白兔,制备气管前壁软骨1/3缺损模型。随机分为A、B组,每组12只,A组为实验组,在气管缺损处前壁颈前肌肉修补,多点注射rhBMP-2;B组于气管软骨缺损部位直接颈前肌群修补。术后观察动物一般情况,于4、8、12周取材进行大体观察、HE染色观察重建区域情况。结果:术后A组动物均存活至实验完成,B组因气道感染及气道分泌物堵管潴留致使实验兔死亡,其余动物出现皮下气肿,呼吸不畅等情况。组织学观察A组有明显的新生软骨细胞及少量软骨样组织,可见结缔组织包绕,周围肌肉组织完整,排列整齐,未见明显坏死组织,有少量淋巴细胞浸润。B组未见软骨组织生成,可见大量肉芽组织增生,结缔组织排列紊乱,伴少量坏死组织,大量淋巴浸润。结论:rhBMP-2可通过注射到颈前肌肉修补肌群中诱导软骨细胞和软骨样组织生成,减轻炎症反应,联合颈前肌瓣修复重建气管缺损能充分维持修复重建后的气道形态,具有减少术后皮下气肿、气管狭窄的作用,有望用于临床修复重建气管组织缺损。     

rhBMP-2诱导异位软骨修复重建兔气管缺损的实验研究

目的：探讨重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）作为激活物诱导异位软骨修复并重建免气管缺损的可行性。方法：取24只新西兰大白兔,制备气管前壁软骨1／3缺损模型。随机分为A、B组,每组12只,A组为实验组,在气管缺损处前壁颈前肌肉修补,多点注射rhBMP-2;B组于气管软骨缺损部位直接颈前肌群修补。术后观察动物一般情况,于4、8、12周取材进行大体观察、HE染色观察重建区域情况。结果：术后A组动物均存活至实验完成,B组因气道感染及气道分泌物堵管潴留致使实验兔死亡,其余动物出现皮下气肿,呼吸不畅等情况。组织学观察A组有明显的新生软骨细胞及少量软骨样组织,可见结缔组织包绕,周围肌肉组织完整,排列整齐,未见明显坏死组织,有少量淋巴细胞浸润。B组未见软骨组织生成,可见大量肉芽组织增生,结缔组织排列紊乱,伴少量坏死组织,大量淋巴浸润。结论：rhBMP-2可通过注射到颈前肌肉修补肌群中诱导软骨细胞和软骨样组织生成,减轻炎症反应,联合颈前肌瓣修复重建气管缺损能充分维持修复重建后的气道形态,具有减少术后皮下气肿、气管狭窄的作用,有望用于临床修复重建气管纽织缺损。     

比格犬埃立克体病实验模型及治疗研究

目的研究了比格犬埃立克体病实验模型及盐酸强力酶素对犬埃立克体病的疗效。方法用犬埃立克体病病犬血白细胞静脉注射比格犬,对其临床症状、病原学、血液生理生化指标变化、病理学变化进行了观察,并应用盐酸多西环素进行疗效试验。结果与结论成功建立了比格犬埃立克体病实验模型,并证实了盐酸多西环素对犬埃立克体病的疗效是确定的。     

STZ诱导恒河猴糖尿病动物模型的建立

目的复制稳定的链脲佐菌素诱导糖尿病恒河猴动物模型。方法健康恒河猴5只,小剂量（30mg/kg）多次静脉注射链脲佐菌素,分别在注射后2、3个月进行葡萄糖耐量实验并连续观察血糖、胰岛素、C肽的变化。连续观察12个月。结果随着时间推移,动物出现典型的糖尿病症状。3只动物的血糖静脉注射1次后持续10周稳定,另外2只分别进行了第2、3次注射。动物血糖在12个月内平稳上升、胰岛素、C肽分泌持续下降。2个月时葡萄糖耐量减低明显（P〈0.01）。结论小剂量多次注射STZ后恒河猴可出现持续、稳定的糖尿病表现,可作为相关研究的动物模型。     

实验性高脂血症恒河猴模型的初步建立及分析

目的建立实验性高脂血症恒河猴模型,为人类高脂血症研究提供理想动物模型。方法设计高脂实验饲料配方并检测常规营养成分,用高脂饲料诱导实验性高脂血症恒河猴模型,分别在2个月、4个月、6个月后监测体重、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL—C）、低密度脂蛋白（LDL—C）等指标,对其血脂指标的变化趋势进行分析。结果模型组在实验2个月、4个月时的日采食量和摄入能量均低于对照组（P（0．05）,但体重则无明显变化（P〉0．05）;而在实验6个月时日采食量和摄入能量与对照组无显著性差异（P〉0．05）,体重有显著性差异（P〈0．05）;模型组与对照组的TC、TG、HDL—C、LDL—C在实验前和2个月比较无显著性差异（P〉0．05）;在4个月比较时TC、TG、LDL—C有显著性差异（P〈0．05）,而HDL无显著性差异（P〉0．05）;在6个月比较时TC、LDL—C有显著性差异（P〈0．05）,并且TC、LDL—C远远高于恒河猴血脂的正常参考值水平,而TG、HDL—C则无显著性差异（P〉0．05）;变化趋势分析结果为,模型组TC和LDL-C水平有递增趋势、TG水平则出现了先递减后逐渐恢复的趋势、HDL—C水平未出现明显变化趋势。结论模型组恒河猴具有高胆固醇血症和高低密度脂蛋白血症的特征,已经初步建立了实验性恒河猴高脂血症动物模型。     

大鼠心肌梗死动物模型的制备

目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死动物模型。方法SD大鼠经口气管插管,呼吸机辅助呼吸,开胸结扎冠脉左前降支。术后28 d行心脏超声,血流动力学及组织病理学检查。结果大鼠术后存活率60%;手术组LVEF较假手术组显著降低（P〈0.01）;与假手术组比,手术组的LVSP明显下降（P〈0.05）,±dp/dt显著降低（P〈0.01）,而LVEDP明显升高（P〈0.01）;病理组织学检查可见瘢痕形成,纤维组织增生。结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简便、重复性好。     

豚鼠腺性膀胱炎模型的建立及尿流动力学的检查

目的探讨豚鼠腺性膀胱炎动物模型的建立方法及尿流动力学检查方法。方法将28只雌性豚鼠分三组：正常对照组、生理盐水对照组和造模组。用膀胱内灌注大肠杆菌的方法制作腺性膀胱炎动物模型,7周后行尿流动力学检查及病理检测。结果尿流动力学检查发现造模组豚鼠储尿期逼尿肌不稳定发生率较正常对照组及生理盐水对照组显著增多（P〈0.001）;正常对照组无腺性膀胱炎病变,生理盐水对照组出现腺性膀胱炎1例,造模组出现7例,造模组与另外两组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,正常对照组与生理盐水对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论膀胱内灌注大肠杆菌可导致腺性膀胱炎,这证实了细菌感染是腺性膀胱炎的病因之一,同时为临床上的抗感染治疗提供了理论依据。此方法可用于建立腺性膀胱炎的动物模型。同时确立了腺性膀胱炎动物模型尿流动力学检查方法。     

医学遗传学实验教学中实施研究性教学的探索实践

我们根据我校实际情况在医学遗传学实验教学中实施开放式研究性教学手段,培养学生具有自主建构的学习能力,掌握现代医学遗传学的基本理论和遗传性疾病诊断的实验方法,培养学员的综合实践能力,启发创造性思维,促进实验教学的改革。     

C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立及其病理特征

目的探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型的可能性及其发病特点。方法使用PLP139-151抗原及其C57BL/6J小鼠自制脑脊髓匀浆（spinal cord homogenate,SCH）免疫C57BL/6J小鼠,使用完全福（氏）免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型,与经典的PLP139-151免疫的SJL/J小鼠EAE模型进行对比。结果PLP139-151免疫C57BL/6J小鼠仅有一只小鼠表现为尾部张力明显降低;自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变。与PLP139-151免疫SJL/J小鼠组相比发病率较低（P〈0.05）,神经功能评分比较没有明显差异（P〉0.05）,但发病时间长于PLP139-151免疫SJL/J小鼠组（P〈0.05）。结论SCH免疫C57BL/6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨。     

Experimental Infection of Dogs with Leishmania and Saliva as a Model to Study Canine Visceral Leishmaniasis

Background

Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease caused by Leishmania infantum, transmitted by the bite of Lutzomyia longipalpis sand flies. Dogs are the main domestic reservoir of the parasite. The establishment of an experimental model that partially reproduces natural infection in dogs is very important to test vaccine candidates, mainly regarding those that use salivary proteins from the vector and new therapeutical approaches.

Methodology/Principal Findings

In this report, we describe an experimental infection in dogs, using intradermal injection of Leishmania infantum plus salivary gland homogenate (SGH) of Lutzomyia longipalpis. Thirty-five dogs were infected with 1×10⁷ parasites combined with five pairs of Lutzomyia longipalpis salivary glands and followed for 450 days after infection and clinical, immunological and parasitological parameters were evaluated. Two hundred and ten days after infection we observed that 31,4% of dogs did not display detectable levels of anti-Leishmania antibodies but all presented different numbers of parasites in the lymph nodes. Animals with a positive xenodiagnosis had at least 3,35×10⁵ parasites in their lymph nodes. An increase of IFN-γ and IL-10 levels was detected during infection. Twenty two percent of dogs developed symptoms of CVL during infection.

Conclusion

The infection model described here shows some degree of similarity when compared with naturally infected dogs opening new perspectives for the study of CVL using an experimental model that employs the combination of parasites and sand fly saliva both present during natural transmission.     

大鼠体外循环模型的建立及改进

目的对现有大鼠体外循环模型予以改进,降低模型复制难度,并使之更适合用于研究体外循环对肺功能的影响。方法成年雄性SD大鼠16只,体重300～350g,各8只分别用于建模和供血。经右颈静脉、左股静脉引流,右股动脉人工灌注建立体外循环,血气分析监测内环境变化。实验过程中,保留大鼠自主呼吸,不进行机械通气。结果成功建成8只大鼠体外循环模型并按计划顺利脱离人工循环。体外循环期间转流量为70～80mL/（kg·min）,血流动力学监测和血气分析结果基本正常。结论进一步简化了建立大鼠体外循环模型的操作,最显著的改进之处在于避免了机械通气对大鼠肺功能潜在的不良效应,从而更加适合用于研究体外循环对肺功能的影响。