茶多酚对稻瘟病菌的抑制作用及抑菌机理

用不同浓度茶多酚对稻瘟病菌进行抑菌和抑菌机理研究。结果表明,不同浓度的茶多酚对稻瘟病菌菌丝生长和分生孢子萌发具有很强的抑制作用。随着茶多酚浓度的增加,其抑制作用增强,其中5.00 mg/mL和10.00 mg/mL抑制效果最好,其抑制率高达100%,且分生孢子畸形,细胞破裂,原生质外溢。其作用机理主要是破坏菌体的细胞膜结构,抑制CAT、POD酶活,使其丧失细胞膜的屏障和酶系的保护功能,最终导致菌体生长受到抑制或死亡。     

玉米大斑病菌钙调磷酸酶A亚基的克隆与特征分析

根据已知病原真菌钙调磷酸酶A亚基(Calcineurin A, CNA)丝苏蛋白磷酸酶保守结构域设计引物, 从玉米大斑病菌cDNA中扩增出CNA基因片段。利用cDNA末端快速克隆(Rapid amplification of cDNA ends, RACE)手段获得该基因全长cDNA序列(GenBank登录号: EF 407562)。Southern杂交结果显示, 该基因在玉米大斑病菌基因组只有1个拷贝。CNA特异性抑制剂Cyclosporin A对玉米大斑病菌分生孢子和附着胞发育有抑制作用, 抑制作用与抑制剂浓度呈正相关, 相同浓度的抑制剂对附着胞形成的抑制作用大于对孢子萌发的抑制。经CsA(5µg/mL)处理后, 玉米大斑病菌分生孢子不能侵入玉米叶片, 初步表明CNA基因参与玉米大斑病菌的致病过程。     

华蟹甲草对几种植物病原真菌的离体抗菌活性研究

从华蟹甲草共获得46个提取、分离样品,首先测定这些样品在100 mg/L浓度下对5种植物病原真菌菌丝生长的抑制活性,然后测定活性较高的Y-S16/23～90/96号样品对9种真菌菌丝生长的有效抑制中浓度(EC50)以及对辣椒炭疽病菌孢子萌发的抑制作用.结果表明:对于华蟹甲草的不同组织器官,花提取物的活性相对最高,对供试的5种植物病原菌均有不同程度的抑制活性,其次是叶片提取物,但均是对辣椒炭疽病菌的活性最高;而在所有样品中,Y-S16/23～90/96号样品的活性最高,在100 mg/L浓度下对辣椒炭疽病菌和番茄灰霉病菌的菌丝生长抑制率均超过50%,其作用谱较广,对供试的9种植物病原真菌均有抑制活性,其中对番茄灰霉病菌和辣椒炭疽病菌的活性最高,EC50分别为68.96和99.17 mg/L,对黄瓜疫霉病菌、苹果腐烂病菌、玉米小斑病菌等3个病菌的活性次之,EC50介于137.37～161.68 mg/L之间,对水稻稻瘟病菌、辣椒疫霉病菌、苹果斑点落叶病菌、小麦赤霉病菌等4个病菌的活性相对较差,EC50介于303.05～362.54 mg/L之间;Y-S16/23～90/96号样品对辣椒炭疽病菌分生孢子萌发的抑制活性较低.     

壳聚糖对几种植物病原真菌的作用

在马铃薯葡萄糖琼脂 ( PDA)上测定了酸溶性壳聚糖 ( S- )和 2种水溶性壳聚糖 ( S- 和 S- )对 15种植物病原真菌的作用 ,结果表明 ,三种壳聚糖对供试的 15种植物病原真菌均有一定程度的抑制作用 ,抑制强度因壳聚糖的理化性质以及不同的病原真菌而有较大差异。水溶性壳聚糖 S- 可明显抑制水稻恶苗病菌分生孢子的萌发。壳聚糖的抑菌作用机制与其增加菌丝细胞膜的透性有关。     

迷迭香酸对几种植物病原真菌的抗菌活性*

研究了迷迭香酸对不同植物病原真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性。试验结果表明,迷迭香酸对供试的8种植物病原真菌菌丝生长均有抑制作用,其中对番茄灰霉病菌、芒果灰斑病菌、柑桔青霉和梨黑斑病菌抑制作用较强,EC50分别为615．04μg/mL、698．23μg/mL、714．50μg/mL和809．10μg/mL;对杉木猝倒病菌和苹果树腐烂病菌抑制作用次之,EC50分别为1039．92μg／mL和1044．72μg/mL;对松枯梢病菌和种实霉烂病菌的抑制作用较弱,EC50分别为1256．90μg/mL和1270．87μg/mL。迷迭香酸对供试的6种植物病原真菌孢子萌发也有明显的抑制作用,EC50大致在400～700μg/mL范围,其中对梨黑斑病菌孢子萌发抑制作用最强,EC50为395．37μg/mL。     

黄花草木樨提取物抑菌活性初探

采用离体和活体试验方法分别测定了黄花草木樨不同溶剂提取物对12种植物病原真菌的抑菌活性.结果表明:各溶剂提取物对12种植物病原真菌均具有不同程度的抑菌活性,其中以乙酸乙酯提取物的抑菌活性最高,对油菜菌核病菌、玉米大斑病菌和白菜黑斑病菌抑制菌丝生长的EC50分别为0.62、0.83、0.64g/L,对稻瘟病菌和玉米大斑病菌抑制孢子萌发的EC50分别为0.67、0.97g/L.离体组织法测定表明其乙酸乙酯提取物对番茄灰霉病菌具有较高的保护和治疗作用,在浓度为5.0g/L时,防治效果分别为75.41%和59.18%(6d).活体试验表明乙酸乙酯提取物对小麦白粉病和小麦条锈病也有一定的保护作用,在浓度为10.0g/L时,防治效果分别为73.39%和63.27%.     

菊苣根提取物的抑菌活性研究

采用离体的试验方法测定了菊苣根的石油醚、乙酸乙酯和乙醇提取物对7种植物病原真菌和3种细菌的抑制活性。采用盆栽试验方法测定了菊苣根提取物对小麦白粉病的防治效果。结果表明,乙醇和乙酸乙酯提取物均有一定的抑制植物病原真菌和细菌活性。且乙酸乙酯提取物效果更佳。在10 g.L-1浓度下,乙酸乙酯提取物能显著抑制小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌和烟草赤星病菌3种病原真菌菌丝的生长,抑制率均在85%以上;对小麦根腐病菌、玉米大斑病菌和烟草赤星病菌的孢子萌发抑制率也均在80%以上;对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达21.01 mm和17.23 mm;对盆栽小麦白粉病的预防和治疗作用分别为50.93%和65.82%。     

30种药用植物提取物杀虫杀菌活性研究

采用微量点滴法和载毒叶片饲喂法测定30种药用植物乙醇提取物对粘虫3龄幼虫的触杀、胃毒以及拒食活性。结果表明,供试样品在50mg·mL-1浓度下均无明显的触杀或胃毒作用,但卡瓦胡椒和川陈皮对试虫有一定的拒食活性,其中卡瓦胡椒24h拒食中浓(AFC50)为4.12mg·mL-1,48h为9.12mg·mL-1。采用抑制菌丝生长速率法和抑制孢子萌发法测定离体杀菌活性的结果表明,供试样品在2mg·mL-1浓度下,卡瓦胡椒和厚朴对供试病原菌均有较强抑制作用。毒力测定结果表明,卡瓦胡椒对玉米大斑病菌、番茄灰霉病菌、小麦根腐病菌、油菜菌核病菌4种病原真菌菌丝生长抑制的有效中浓(EC50)分别为108、258、290、205mg·L-1,厚朴分别为208、331、345、408mg·L-1;卡瓦胡椒对玉米大斑病菌、玉米小斑病菌、烟草赤星病菌3种病原真菌抑制孢子萌发的有效中浓(EC50)分别为155、195、268mg·L-1,厚朴则分别为151、242、241mg·L-1。根据以上结果,我们认为卡瓦胡椒和厚朴的乙醇提取物具有较高的杀菌活性,其有效成分值得进一步研究。     

酶法制备壳寡糖对番茄灰霉病病菌抑制机理初探

目的：研究酶降解法制备的壳寡糖对番茄灰霉病病菌的抑制机理。方法：测定壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝发育、孢子萌发的抑制作用以及对菌丝形态、细胞膜透性和对菌丝体可溶性蛋白质含量的影响。结果：当壳寡糖处理浓度为1.5mg/mL以上时,对菌丝生长的抑制率达70%以上,EC50为0.72mg/mL。当处理浓度为6mg/mL时,对分生孢子的抑制率显著优于其他浓度水平,达87.4%,EC50为1.48mg/mL。显微观察,浓度为0.8mg/mL的壳寡糖处理可诱导菌丝分枝增多、菌体分隔增加,分生孢子形成受到抑制。此外壳寡糖能够引起菌丝细胞膜透性发生变化,造成菌丝体内含物的渗漏。壳寡糖处理66 h后,菌丝体可溶性蛋白含量比对照降低了36.7%。结论：壳寡糖对番茄灰霉病病菌抑制机理的探究为研究壳寡糖这一新型生物农药的作用机制提供依据。     

拮抗植物病原真菌的纤维素/木质素降解菌株的筛选及鉴定

【背景】秸秆还田在改善土壤肥力和丰富营养等方面有重要作用,但是也存在秸秆难以快速降解利用和病原真菌病害威胁的问题。【目的】为解决还田秸秆的降解和病原真菌病害问题,从长期秸秆还田地区采集样品,从中筛选出具有降解秸秆和抑菌功能的菌株。【方法】采用稀释分离法、苯胺蓝染色法和刚果红染色法等对秸秆高效降解菌株进行筛选,通过16S rRNA基因测序及构建系统发育树进行菌株鉴定。采用对峙培养法测定筛选到的秸秆降解菌株对玉米大斑病菌(Setostphaeria turcica)、梨黑斑病菌(Alternaria kikuchiana)、马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)、链格孢属真菌(Alternaria alternata) ACCC38230和ACCC38231等5种供试植物病原真菌的抑制作用。以玉米大斑病菌(Setostphaeria turcica)为后期供试植物病原真菌,测定拮抗菌株代谢产物的抑菌能力;通过观察拮抗菌株粗提液对玉米大斑病菌分生孢子萌发和菌丝生长的影响,从而测定菌株对病原真菌的抑制作用。【结果】从秸秆还田土壤中分离筛选获得3株高效降解纤维素及木质素菌株并命名为JY122、ZY133和JY215。通过形态学观察和16S rRNA基因测序鉴定上述菌株全部为芽孢杆菌属(Bacillus)。通过系统发育树分析结果表明,JY122与蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)相似性为99.4%,ZY133与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)相似性为100%,JY215与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)相似性为99.1%。平板对峙实验结果显示,JY122、ZY133和JY215菌株对不同种属的植物病原真菌均有较强的抑制作用,抑制率高达43.74%-67.54%。此外,上述芽孢杆菌代谢产物具有抑菌活性及很强的热稳定性,经95℃处理后依然具有良好的抑菌效果。【结论】筛选获得的JY122、JY133和JY215菌株具有高效降解纤维素/木质素能力,抑制多种植物病原真菌生长,代谢产物抑菌能力强且热稳定性高。这为玉米秸秆还田提供菌株资源,也为进一步解决秸秆还田难点提供了新方法和思路。