川西獐牙菜甙类成分

对川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch.)的水溶性成分进行了研究。应用层析方法,分离得到裂环烯醚萜甙,黄酮甙,(口山)酮甙,3类8种单体成分(Ⅰ—Ⅷ)。除先前报道过的芒果甙外(Ⅱ),又分离和鉴定了苦龙甙(Ⅲ),当药黄素(Ⅷ),8-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,5-三羟基(口山)酮(Ⅶ),8-O-[β-D-吡喃木糖-(1→σ)-β-D-吡喃葡萄糖]-1,7-二羟基-3-甲氧基(口山)酮(Ⅵ)4种已知天然化合物。应用化学和光谱分析方法,测定另外3种新(口山)酮甙的结构为:7-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基咄酮(Ⅰ),7-O-β-D-吡喃木糖-1,8-二羟基-3-甲氧基(口山)酮(Ⅳ),3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,8-二羟基-5-甲氧基(口山)酮(Ⅴ)。芒果甙,苦龙甙和7-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基(口山)酮为川西獐牙菜主要甙类成分。有兴趣的是在已发现的龙胆科植物(口山)酮糖甙中,未见(口山)酮木糖甙,(口山)酮鼠李糖-木糖甙的报道。     

15种獐牙菜属植物中主要药用成分的高效液相色谱测定

对青藏高原和云贵高原的15种獐牙菜属植物进行了3种苦味苷,即獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopicroside)、苦龙苷(amarogentin)、一种黄酮苷-当药黄素(swertisin)、及5种口山酮苷-芒果苷(mangiferin)、当药醇苷(swertianolin)、7-O-[a-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-[a-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、7-O-β-D-吡喃木糖-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-β-D-xylopyranosyl-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,8-二羟基-5-甲氧基口山酮(3-O-β-D-glucopyranosyl-1,8-dihydroxy-5-methoxyxanth-one)等9种主要药效成分同时进行了高效液相色谱的含量测定(Kromasil C18柱,甲醇一水梯度洗脱,二级管阵列检测);并对其主要药效成分的分布进行了比较。     

HPLC测定7种龙胆科植物花中龙胆苦苷与獐牙菜苦苷的含量

目的:建立7种龙胆花中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷含量测定的HPLC方法。方法:采用微波辅助动态回流法进行提取,色谱条件:Fusion-RP 80 A C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液梯度洗脱(0~25 min:15%~30%);流速:1 mL/min;柱温:30℃;检测波长240 nm。结果:7种龙胆花中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的色谱峰与共存组分完全达到基线分离,线性范围分别为0.105~0.945μg(r=0.999 9),0.3~0.7μg(r=0.999 9),平均加样回收率分别为97.8%(RSD=1.02%),98.9%(RSD=1.51%)。结论:所建立的方法测定快速,结果准确可靠。     

4种秦艽属植物不同器官中4种环烯醚萜苷成分含量的比较分析

利用HPLC法测定了秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)、粗茎秦艽(G.crassicaulis Duthie ex Burk.)、麻花秦艽(G.straminea Maxim.)和小秦艽(G.dahurica Fisch.)根、茎、叶和花中4种环烯醚萜苷成分(包括马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷)的含量,并对来源于不同产地秦艽和小秦艽不同器官4种环烯醚萜苷成分的含量进行了比较。结果显示:4种秦艽属植物不同器官4种环烯醚萜苷成分含量差异明显,来源于3个产地(陕西太白、甘肃西河乡和马狭)的秦艽和2个产地(青海互助和陕西麟游)的小秦艽不同器官中4种环烯醚萜苷含量也均具有明显差异。4种秦艽属植物根、茎、叶和花中龙胆苦苷和马钱苷酸总量分别为质量分数5.996%～10.869%、0.310%～4.065%、0.235%～4.138%和0.545%～5.591%;根中獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的质量分数分别为0.516%～0.953%和0.042%～0.210%,茎中分别为0.173%～0.383%和0.031%～1.700%,叶中分别为0.068%～0.684%和0.020%～3.208%,花中分别为0.460%～0.832%和0.138%～3.827%。粗茎秦艽各器官龙胆苦苷和马钱苷酸总量均最高,小秦艽各器官龙胆苦苷和马钱苷酸总量均最低,总体上,秦艽和粗茎秦艽中龙胆苦苷和马钱苷酸总量高于小秦艽和麻花秦艽;小秦艽茎、叶和花中獐牙菜苷含量均最高,而秦艽茎和叶及粗茎秦艽花中獐牙菜苷含量均最低。4种秦艽属植物根部龙胆苦苷和马钱苷酸含量均明显高于茎、叶和花,獐牙菜苦苷在根和花中的积累较多,獐牙菜苷在花中的含量均相对最高。产自青海互助的小秦艽茎、叶和花中獐牙菜苷含量均最高,质量分数分别为2.884%、5.215%和7.321%。研究结果表明:4种环烯醚萜苷成分含量不但与植物种类和器官有关,而且与产地和采样时间也有关。     

重要藏药川西獐牙菜种子萌发的研究

比较了温度、生长素(赤霉素GA3)和储藏条件对川西獐牙菜(SwertiamussotiiFranch)高海拔野生自然种群和低海拔栽培后种子发芽率的影响。未经任何处理的高海拔野生自然种群种子的发芽率明显高于低海拔栽培种群。无论是赤霉素处理还是低温处理对种子的发芽率都有显著提高。经过处理后,两种来源的种子最终发芽率没有明显的变化。结果表明:(i)野生的或栽培的川西獐牙菜种子都存在休眠现象;(ii)通过引种栽培不能打破川西獐牙菜种子的休眠,该机制可能是受遗传因素的控制;(iii)赤霉素处理和4℃低温冷藏对打破种子的休眠具有重要作用。     

川西獐牙菜的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　川西獐牙菜 (Swertiamussotii)。2　材料类别　根、叶、带节茎段、不带节茎段、顶芽。3　培养条件　诱导愈伤组织及芽分化培养基 :( 1 )MS +NAA 0 .0 4mg·L- 1 (单位下同 ) +IAA 0 .0 4 +KT 0 .0 2～ 0 .0 4 ;( 2 )MS +NAA 0 .0 4 +IAA 0 .0 4 +KT 0 .0 6～ 0 .1 0 ;( 3)MS +NAA 0 .0 4 +IAA 0 .0 4 +KT 0 .1 2～ 0 .1 4;( 4 )MS + 2 ,4 D 0 .2 ;( 5 )MS +2 ,4 D 0 .4。增殖培养基 :( 6)MS +NAA 0 .0 4 +IAA 0 .0 4 +KT 0 .1 0～ 0 .1 2 ;( 7)MS +KT 0 .1 5。生根培养基 :( 8)MS ;( 9) 1 /2MS ;( 1 0 …     

栽培藏药材麻花艽中四种苦苷类成分含量的季节性变化

采用高效液相色谱法,测定了栽培藏药材麻花艽根中龙胆苦苷、落干酸、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷四种苦苷类成分的含量及其在不同生长期的动态变化。结果表明,四种苦苷类成分随植物的发育节律而波动。龙胆苦苷的含量是评价药材质量的重要指标。龙胆苦苷的含量虽然在7月有个积累的高峰期,但7月为花期,从资源可持续利用的角度考虑,不宜定为采收期,到9月含量又有所增加,故而确定栽培藏药麻花艽根的适宜采收期应在9~10月之间。     

几种化学药剂对川西獐牙菜种子萌发的影响

川西獐牙菜(Swertia mussotii)属龙胆科(Gentianaceae)一年生草本植物,为高寒藏药,藏名蒂达,产于青海海拔3 600～3 800 m的高寒地区.植物以全草入药,有清热解毒、舒肝利胆之功效,专治黄疸性肝炎和病毒性肝炎.目前,川西獐牙菜仍处于野生状态,其野生资源远远不能满足医药生产和外贸出口的需求.     

RP-HPLC法测定青海产四种秦艽中獐牙菜苦苷的含量

建立了秦艽中獐牙菜苦苷含量测定的RP-HPLC方法。色谱条件：采用ZorbaxEclipseXDB-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相：甲醇-0.03%磷酸水溶液梯度洗脱（0～25min：15%～23%;25～30min：23%～30%）,流速：1mL/min,柱温：25℃,检测波长240nm,獐牙菜苦苷在0.20～1.8μg范围内成良好的线性关系,r=0.9999,回收率RSD=1.32%。对青海产4种秦艽中獐牙菜苦苷的含量进行了定量分析,测定结果：小秦艽中獐牙菜苦苷的含量最高为：0.62%,麻花秦艽与管花秦艽的含量没有显著差异,分别为：0.43%,0.45%,簧管秦艽的含量最低为：0.32%。     

超声波和赤霉素对川西獐牙菜种子萌发能力的影响

采用超声波、赤霉素、超声波和赤霉素相结合的方法处理种子,研究3种处理对川西獐牙菜种子萌发能力影响的结果表明：超声波超声20-40min对种子的萌发均有促进作用,其中以超声35min的效果较好,种子发芽提前1-2d;浓度为1000-2000mg·L^-1的赤霉素（GA3）对种子萌发有一定的促进作用,其中以1500mg·L^-1GA3浸种24h的效果较好;超声波和赤霉素共同处理对种子发芽有协同效应,其中以超声35min和赤霉素浓度为1250-1500mg·L^-1浸种22h的效果较为明显。     

反相高效液相色谱法测定万寿菊中的玉米黄质

用反相高效液相色谱法测定万寿菊中的玉米黄质。以丙酮与石油醚提取色素,色谱柱Kromasil(C184.6 mm×150mm),乙腈∶甲醇∶二氯甲烷(体积比为70:20:10)为流动相,在450 nm下检测玉米黄质。结果表明,玉米黄质的质量分数为0.158%,玉米黄质的回收率是94.7%~98.1%,平均回收率为96.4%(RSD=1.36%)。该方法简便、准确,有良好的重现性,技术参数指标符合食品理化分析的要求。     

Characterisation of hydrophobic peptides by RP-HPLC from different spectral forms of LH2 isolated from Rps. palustris

The separation of light-harvesting peptides by RP-HPLC is notoriously difficult due to the typically strong interaction of peptides with the column matrix, their relatively low solubility in the mobile phase and the tendency for non-specific aggregation during sample preparation. This paper illustrates a reproducible method for investigating the composition of four spectrally different forms of LH2 isolated from Rps. palustris. The method contrasts with previous attempts to isolate peptides from these multi-LH2 complexes and uses the well characterised B800–850 complex from Rps. acidophila as a test of reliability. Three pairs of LH2 peptides, _a, _b and _d, were identified from Rps. palustris grown under high- (7000 lux) or intermediate- (1000 lux) light conditions. At lower light (300 and 90 lux), _b was absent, and the level of _a was significantly reduced. Results show that _a and _b peptides form the high light B800-850 complex, whereas the low light LH2 complex is only composed of _d peptides and resembles the B800–820 complex from Rps. acidophila by sequence homology. The absorption spectrum of this complex has a single peak centred on 800 nm and appears to be a novel LH2 complex. At low light growth conditions, this B800 species is the predominant LH2 complex in Rps. palustris and indicates that peptide expression is a crucial factor in adapting to different light intensities.     

利用反相高效液相色谱测定香椿叶中槲皮素含量

用乙醇对香椿叶粉末进行提取,树脂柱浓缩,真空冷冻干燥,甲醇溶解,制备香椿黄酮。用7.6 mol.L-1盐酸85℃水浴回流2 h进行水解,以反相ODS柱甲醇-水(体积比为50:50,磷酸调pH至2.53)为流动相,在波长368 nm处对香椿叶中的槲皮素进行分离、测定。结果表明:香椿叶中含槲皮素平均质量分数为1.28%,平均加样回收率为98.9%,RSD为1.75%,反相高效液相色谱法测定香椿叶中槲皮素含量操作简便易行、结果准确可靠。     

反相高效液相色谱法测定Bacillus claussi的DNA G+Cmol%

目的:为了建立细菌DNA G Cmol%的快速准确的测定方法,选用反相高效液相色谱法测定Bacillus claussiDNA的G C mol%。方法:以已完成全基因测序的Bacillus haloduransC-125作为标准菌株,作者实验室新分离鉴定的2株Bacillus claussi作为待测菌株。采用80 mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH5.6)20%甲醇为移动相,检测波长260nm,流速1ml.min-1,在Kromasil C18柱上对4种碱基进行分离。结果:DNA碱基分离效果好,无杂峰干扰,以峰面积计算得到标准菌株Bacillus haloduransC-125的G C mol%为44.23%,待测菌株的G C mol%分别为45.75%、43.35%,经过统计学分析,与已经报道的G C mol%差异不显著。结论:实验结果充分显示高效反相液相色谱法测定细菌DNAG C mol%快速、准确、结果稳定,是细菌精确分类鉴定的一种可靠方法。     

吴茱萸五加紫丁香甙含量分析

吴茱萸五加（Acauthopanax evodiaefodius Franch.)在我国南方各省分布较广,资源较丰富,为寻求新的药物资源,用反相高效液相色谱法对吴茱萸五加的化学成分进行了分析,发现其紫丁香甙含量较多,紫丁香甙药用价值较高,本分析方法分离效果好,简便,快速,准确度和精密度高,相对标准偏差为1．8％,平均回收率为98．4％。     

川东獐牙菜小孢子发生和雄配子体形成

报道了川东獐牙菜（Swertia davidii Franch.）小孢子发生和雄配子体形成的过程。主要结果如下：花药四室,药壁发育为基本型;绒毡层异型起源,属于腺质型绒毡层,药室内具有的退化绒毡层核是早期该层细胞有丝分裂凸入药室中央并原位退化形成的;中层细胞3层;药室内壁退化;花药壁表皮宿存,细胞柱状伸长,纤维状加厚。小孢母细胞减数分裂为同时型,四分体排列方式主要为四面体形和左右对称型,少数为“T”形和十字交叉形;成熟花粉为2-细胞类型。     

川西獐牙菜SmSLS2基因的克隆、生物信息学及表达分析

裂环马钱子苷合成酶（SLS）是环烯醚萜类化合物合成途径的限速酶。该研究根据川西獐牙菜转录组信息获得SmSLS2基因序列,对该基因进行克隆、生物信息分析、原核表达载体构建及蛋白体外诱导。结果表明SmSLS2 cDNA全长1 566 bp（GenBank编号MH535904）,编码521个氨基酸,推测其蛋白相对分子质量为59.79 kDa,等电点为8.92。结构域分析表明SmSLS2含一个跨膜结构域,SmSLS2的gDNA全长为2 576 bp,含5个外显子和4个内含子。SmSLS2蛋白与其他植物中SLS蛋白具有高度的相似性。进一步将SmSLS2构建到原核表达载体pET-28a-sumo上,转入大肠杆菌BL21（DE3）中,在37℃、0.5 mmol·L^-1 IPTG条件下进行原核表达,诱导出与预测蛋白大小一致的目的蛋白。该研究成功从川西獐牙菜中克隆了SmSLS2,为进一步阐明该基因在环烯醚萜合成途径中的作用和通过基因工程手段改良环烯醚萜类化合物产量提供了理论基础。