三疣梭子蟹卵子发生的研究

１９８９年９月－１９９１年１月、作者利用透射电镜在超微结构水平研究了浙江舟山沿海的三疣梭蟹的卵子发生过程。实验结果得自于１２次取得的１５０号样品。根据核和胞质的变化我们把该蟹的卵子发生分为五期；卵原细胞分裂转化为卵原细胞；卵母细胞发育早期；卵母细胞发育中期；卵母细胞发育晚期；卵子形成期。     

三疣梭子蟹光感受器的形态和超微结构

用电子显微镜观察了三疣梭子蟹（Portunus trituberulatus）的光感受器。扫描电镜观察结果显示三疣梭子蟹复眼为半球形。复眼表面积约为25．12mm^2,组成的小眼为长六边形,面积约为24μm^2。复眼除背面有一拇指状的区域无小眼外,其余部分都由小眼组成。透射电镜观察显示,11个小网膜细胞组成了复眼的感光系统,分成上下两部分。4个小网膜细胞位于晶锥的两侧,组成了感光部分的远端,位于晶锥之下,7个小网膜细胞组成感光系统的主体,上下部位有重叠。两部分的小网膜结构上基本相同,都含有线粒体、多囊体、内质网、色素颗粒等,但是上部的小网膜细胞没有扳膜体,而且胞质比较致密,膜下储泡囊的空腔较小,里面有膜状结构。三疣梭子蟹感光系统有二种类型的感光细胞,可能具有不同的功能。     

不同波长光照对三疣梭子蟹复眼超微结构的影响

三疣梭子蟹(Portunus tritubereulatus)经过30 min暗适应后,在不同波长的红光(750 nm),黄光(580 nm),绿光(560 nm),蓝光(400 nm)下,其光感受器形态和超微结构随不同波长光的适应而发生变化。在红光下感杆束直径大,微绒毛排列最整齐,内质网、线粒体等胞器较多,色素颗粒分布均匀,膜下储泡囊小;在蓝光下感杆束直径最小,微绒毛最凌乱,多囊体、板膜体、膜下储泡囊等胞器较多,色素颗粒位于细胞核周围。     

三疣梭子蟹精子顶体反应过程中的形态和结构变化

用离子载体A2 3187和卵水人工诱导三疣梭子蟹精子的顶体反应 ,分别获得 75 33%和 84 83%的顶体反应率。应用光镜和电镜技术观察了顶体反应前后精子形态和结构的变化。未处理精子呈陀螺形 ,由顶体、核杯和 5 - 10条核辐射臂组成。顶体包括顶体囊和顶体管。顶体囊的伞形头帽拥有约 70条辐射肋。连续发生的精子顶体反应过程被人为地分为四个阶段 :(1)头帽鼓起 ;(2 )顶体囊外翻 ;(3)穿孔器前伸 ,顶体囊膜翻转 ;(4 )顶体囊膜脱落 ,顶体丝形成。直到第四阶段才观察到钉状精子的辐射臂开始收缩。探讨了辐射臂和穿孔器前冲在精子入卵中的功能     

蟹类精子超微结构的比较研究

应用光镜和电镜,比较研究了三疣梭子蟹,中华绒螯蟹和长江华溪蟹的成熟精子。揭示３种蟹精子都是不能游动的无鞭毛精子,呈球形,前后略扁,精子前端出现一光滑的小圆面,圆面四周有内陷的沟环。沟环之后,精子表面凹凸不平,并伸出多数辐射臂。３种蟹精子均为高度特化的细胞,外被质膜,内含细胞核,顶体及退化的细胞质。     

三疣梭子蟹胚胎发育早期的组织学研究

对三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus)胚胎发育早期（卵裂至原肠胚期）进行了组织学观察。结果发现：卵排至体外约５２h后开始卵裂,卵裂方式为表面卵裂,卵裂至２５６细胞时,胚胎发育进行了囊胚期。囊胚为实囊胚,囊胚后期,１６个排成例嗽叭形的预定内胚层细胞与聚在其附近的其他细胞一起内陷形成原肠。预定内胚层细胞脱离原肠后,进行１次切向分裂,形成卵黄细胞和内胚层细胞,与此同时,胚工细胞不断分裂,产生视叶原基和胸腹原基,不久,２个胞腹原基逐渐愈合形成胸腹突。随胚胎发育,在似桥细胞带上出现大颚原基、大触角原基,随后大大触角原基与视叶原基之间的腹中线上发生口凹,在小触角原基产生后,胚肥发育进入卵内无节幼体期。     

三疣梭子蟹胚胎期中枢神经系统的发生和发育

应用组织学方法研究三疣梭子蟹胚胎期中枢神经系统的发生和发育,光学显微镜下镜检切片,在第二期卵内无节幼体阶段开始观察到脑;第二期卵内状幼体阶段,前脑由视神经层、侧原脑和中央原脑组成,与位于食道两侧的中脑和后脑形成完整的脑。三疣梭子蟹胚胎期腹神经链由1对大颚、2对小颚和2对颚足所对应的神经节以及腹部神经链组成。光镜下大颚神经节可于第二期卵内无节幼体阶段观察到,2对小颚和2对颚足神经节则在第二期卵内状幼体阶段观察到;腹部神经链则在第三期卵内状幼体阶段观察到。三疣梭子蟹胚胎期中枢神经系统由脑和腹神经链组成,脑由前脑、中脑和后脑组成,脑位于背部,通过2条围食道神经与腹神经链相连。中枢神经系统的不同部分的形成在胚胎发育过程中具有阶段性差异。     

三疣梭子蟹胚胎发育过程中消化系统的发生和发育

对三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus)不同发育阶段的胚胎进行连续组织切片,以揭示其消化系统的发生和发育。结果显示前肠,中肠和后肠皆发生于原肠胚期,前肠在第1期卵内蚤状幼体阶段发育成胃与食道,胃开口于卵黄囊,后肠肠上皮细胞在第1,2期卵内无节幼体阶段尚未形成有序排列,至第1期卵内蚤状幼体时始形成后肠腔,到第2期卵蚤状幼体时与中有肠连接,中肠在第2期卵内蚤状幼体阶段发育成杯状结构,孵化前与前肠贯通,形成完整的消化系统。     

三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞内Ca~(2+)的变化

应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和Fluo-3/AM荧染技术对三疣梭子蟹精子顶体反应前后的胞内Ca2 变化进行了观察和检测.结果显示,在精子顶体反应过程中,胞内Ca2 主要分布在细胞核、穿孔器和胞质膜残存处,胞内Ca2 浓度([Ca2 ]I)总体上呈现先上升后下降的趋势.顶体反应前精子的平均荧光强度为35.95±5.71;穿孔器前伸、顶体囊膜翻转阶段精子的平均荧光强度为66.80±7.35;顶体囊膜脱落、顶体丝形成阶段精子的平均荧光强度为3.87±2.82;上述各阶段间精子荧光强度有极显著差异(P<0.01).顶体反应穿孔器前伸、顶体囊膜翻转阶段的精子相比顶体反应前精子,[Ca2 ]I显著提高;而在顶体囊膜脱落、顶体丝形成阶段,[Ca2 ]I则急剧下降,只在顶体丝基部胞质膜残存处有微量Ca2 存在.初步探讨了三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞内Ca2 变化的功能.     

三疣梭子蟹不同组织同工酶的分析

采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,分析了三疣梭子蟹 (Portunustriuberbuculatus)雌性成体心脏、鳃、肌肉、眼睛、肝胰腺和卵巢 6种组织中的 1 0种同工酶 (ADH、MDH、ME、LDH、α AMY、GDH、SOD、SDH、EST和GOT)的分化表达模式 ,并对各种酶的同工酶位点表达及酶谱表型进行了分析。结果显示 ,三疣梭子蟹的同工酶系统具有明显的组织特异性。     

长江华溪蟹精子发生过程中线粒体的超微结构研究

长江华溪蟹精子发生过程中线粒体的数目,形态及大小在不同时期的细胞中很不一致,随机能状况而起变化。精原细胞期,线粒体数量较多,主要集中在细胞一侧的胞质中,贴近核膜,形态正常,脊发达。初级精母细胞期,线粒体数量有所减少,集中现象消失,嵴开始退化。     

锯缘青蟹精子超微结构的研究

利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟精子的形态和超微结构。精子呈陀螺形，无鞭毛，在较宽的一端环生着１０余辐射臂。精子由球状的顶体、核杯以及核衍生的辐射臂三部分组成。顶体包括顶体管和顶体囊，后者包绕在顶体管的中央管周围，并可分为头帽带，内层和外层区。顶体被杯状的核包裹，仅头帽露于精子表面。成熟的精子中，位于核杯和顶体管之间的核膜出现局部断续或消失，中心粒和一些胞器出现的核杯腔中。     

三疣梭子蟹胚胎发育过程中卵内幼体形态

三疣梭子蟹胚台发育过程中,卵内幼体共经历2期卵内无节幼体和3期卵内tao状幼体,各幼体期的主要特征表现为：第1期卵内无节幼体具小触角,大触角和大颚3对附肢,第2期卵内无节幼体除草1期的3对附肢外,2对小颚开始出现,腹部前端分节,第1期卵内tao状幼体阶段复眼先为棒状,继而变成月牙状,附肢5对,腹部分为6节,第2期卵内tao状幼体阶段2对颚足出现,复眼发育完全,卵黄蝶状,心脏开始跳动,到此阶段末期,附肢分节和分叉,第3期卵内tao状幼体阶段,各器官进一步发育,肌肉明显。     

长江华溪蟹精子超微结构的研究

透射电镜下观察长江华溪蟹成熟精子的形态和超微结构。精子呈椭球形,无鞭毛,具数条由核延伸而成的辐射臂精子。由球形的顶体,膜复合体,核杯及辐射臂组成,顶体由头帽,亚帽带,丁体囊及中央管组成。在中央管的基部发现有中心粒。核膜与质膜紧贴在一起形成了精子的界膜。     

日本沼虾精子发生的研究

对日本沼虾精子发生全过程的电镜观察表明：精原细胞核染色质分散,胞质内有线粒休、内质网的分布。初级精母细胞核染色质块状,不均匀地分布于核中,内质同多小泡多。次级精母细胞核染色质大多分布于核膜内侧,内质网聚集成团,精细胞分化形成精子的早期,胞核增大,核侧形成内质同多小泡的聚合体;中期的核内染色质浓缩,同时形成空囊状结构,     

台湾东风螺精子发生和精子形态的超微结构研究

透射电镜研究结果表明,台湾东风螺(Babylonia formosae~**)精子形成过程中经历了一系列重大的形态变化,主要有核逐步拉长、染色质浓缩、顶体形成、线粒体逐渐发达与融合以及中心粒演变为轴丝等过程。其中精细胞分化可分为6个时期。成熟精子的外形呈发丝状,由头部和尾鞭两大部分组成,头部包括顶体复合体和核,尾鞭可分为中段、主段和末段。精子的形态及功能与软体动物的系统发育有密切关系。本文还就台湾东风螺精子形成过程和形态与其它前鳃类作了比较。     

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子顶体反应的研究

分别用卵水、海水、caCl_2或NaCl水溶液对中华绒螯蟹成熟精子进行人工诱导顶体反应,结果表明:精子的生理性成熟、同种卵或Ca~(++)的存在、碱性环境以及与一定的固体接触均为精子顶体反应触发的重要条件。3月份精子诱导率最高。 电镜观察证明,中华绒螯蟹精子的顶体反应可分四个阶段:(1)辐射臂收缩;(2)顶体囊外翻;(3)顶体管前伸;(4)片层结构脱落。     

细鳞鱼精巢超微结构和精子发生

细鳞鱼Brachymystax lenok(Pallas)精巢为叶型;支持细胞(Sertoli cell)和Leydig细胞具有典型内分泌细胞的一些结构特征;A型精原细胞的细胞器是区域性分布,精原细胞线粒体的发育与拟染色质 (chromatoid bodies)有关;生精细胞(spermatogenic cell)核膜孔由均匀排布最终演变为区域性聚集。重复注射绒毛膜促性腺激素(hCG)可促进雄鱼性成熟;精子质量受到多种因素的影响。     

三疣梭子蟹Na+/H+-exchanger基因克隆鉴定及在盐度胁迫下的表达分析

为研究Na+/H+-exchanger基因在三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）盐度胁迫过程中的功能作用,克隆了三疣梭子蟹Na+/H+-exchanger基因并进行表达分析。结果显示,Na+/H+-exchanger基因（GenBank:KU519329）全长4233 bp,5和3非编码区（UTR）长分别为519和753 bp,开放阅读框（ORF）长2961 bp。编码986个氨基酸,预测蛋白质分子量和等电点分别为110.8 kD和7.42,具有信号肽和典型的Na+/H+-exchanger蛋白结构域,含12个跨膜螺旋;三疣梭子蟹Na+/H+-exchanger基因与普通滨蟹（Carcinus maenas）同源性最高,达到87.2%,系统进化分析也显示该序列与普通滨蟹聚为一支;表达分析显示,三疣梭子蟹Na+/H+-exchanger基因在鳃中表达量最高;在低盐（盐度5、10和20）胁迫过程中,Na+/H+-exchanger基因在0-12h上调表达明显,在24-168h间表达量呈下降趋势;在高盐（盐度50）胁迫初期（0-12h）,该基因表达量相对稳定,之后（24-168h）显著下调表达。研究表明低盐显著诱导Na+/H+-exchanger基因的高表达,推测三疣梭子蟹Na+/H+-exchanger基因在低盐环境下发挥重要的渗透调节功能。