柑橘愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生的关系

为了探讨柑橘愈伤组织不能再生的原因,试图寻找柑橘愈伤组织生长速度与其体细胞胚胎发生之间的关系,对7种柑橘类型的29种基因型的愈伤组织的生长速度进行了测定,并对愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生之间的相关性进行了统计分析。结果表明,柑橘愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生之间的相关系数为r=-0.3683。由此推断在这两者之间还存在其它影响因素。     

青扦胚性愈伤组织悬浮培养动力学及体细胞胚胎发生

在含１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,１ｍｌ／Ｌ,ＫＴ,３０ｇ／Ｌ蔗糖的５９液体培养基上建立了生长旺盛的瑶扦胚性愈伤组织悬浮系,并对胚性愈伤组织悬浮系生长,体细胞胚胎发生,底物消耗,ｐＨ值,电导率的动力学过程及各参数的相关性进行了研究。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。     

采用倍性分析仪鉴定柑橘愈伤组织的遗传变异

使用倍性分析仪,对48种培养多年不同基因型的柑橘愈伤组织的细胞NDA含量进行了测定。结果发现,除了路比葡萄柚,尾张和金诺橘等3种愈伤组织变异较小,未出现第二个峰以外,有93.8%的基因型的愈伤组织的细胞均出现了DNA含量加倍的细胞,通过DPAC分析软件分析得知,凤梨甜橙三倍体,宁波金钳,长沙橘,鲁斯脐橙,国庆4号和卡特夏橙等6愈伤组织的细胞DNA含量还出现了三倍增加及非整倍增加的现象。在待测的48种愈伤组织中,DNA含量变异细胞的百分率最大者为凤梨甜橙三倍体,达18.51%,最小者为暗柳橙,为4.70%,通过取肯氏新复极差分析得知,不同基因型的DNA含量变异细胞的百分率之间存在差异显著性,在相同继代培养基和相同继代周期的条件下,培养时期对愈伤组织变异大小影响不显著。     

石刁柏胚乳愈伤组织内胚胎发生的组织细胞学观察

石刁柏(Asparagus officinalis L.)的幼嫩胚乳接种于MS+NAA 5ppm+6-BA 1ppm和MS+NAA 1ppm+6-BA 0.5ppm的培养基上诱导产生愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+6-BA 1ppm+NAA 0.5ppm的分化培养基上,培养30天后即可形成胚状体,组织细胞学观察表明:胚状体起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。在胚状体发生的早期阶段,观察到与柳叶菜型和藜型胚胎发育大致相似的细胞分裂方式,从而出现了T型或线型的四个细胞的原胚。在多细胞原胚及球形胚期具有单列或不规则排列的多细胞胚柄。石刁柏胚乳愈伤组织中的胚胎发生是不同步的,在同一块愈伤组织的切片中可以观察到不同发育阶段的胚状体。在外形上还可以观察到一个子叶、两个子叶或四个子叶等多种不同形态的胚状体。一部份胚状体能发育成完整小植株。     

胡桃楸胚性愈伤组织诱导与体细胞胚胎发生

胡桃楸是东北东部山地阔叶红松林的重要组成树种。因其被大量采伐,资源日趋枯竭。体细胞胚胎发生是快速繁殖和人工种子研制的基础,对遗传改良有重要意义。为探讨不同外植体、植物生长调节物质种类及配比对胡桃楸培养物的影响,建立了胡桃楸体胚发生及再生植株体系。结果表明:合子胚为外植体时最易形成胚性愈伤组织,外植体最佳取材时期为5～6月。胡桃楸胚性愈伤组织最适诱导为MS+1.0mg·mL-12,4-D+0.5mg·mL-16-BA;体细胞胚的诱导、发育和分化的适宜的培养基为附加蔗糖60g.L-1、水解酪蛋白700mg·mL-1时不添加任何生长调节物质的MS培养基。     

海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生

将生长１４ｄ的海边香豌豆（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ（Ｌ．）Ｂｉｇｅｌ）无菌苗下胚轴切成０．５ｃｍ左右的片段,置于含有１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基中,２８ｄ后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基上,又２８ｄ后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的２,４－Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ。较高浓度的２     

粗枝云杉胚性愈伤组织增殖后期的体细胞胚发生方式转变

粗枝云杉愈伤组织在增殖后期体细胞胚的分化能力显著降低,转变愈伤组织增殖方式和体细胞胚分化培养方式有利于体细胞胚发生能力的提高。采用液体悬浮增殖取代半固体增殖更有利于胚性的保持。在增殖后期,首选的体细胞胚发生方式为＂液体增殖-滤纸分化＂,其次为＂块状增殖-块状分化＂,最后是＂块状增殖-滤纸分化＂。     

生长调节剂对籼稻体细胞胚性愈伤组织发生的调控

早籼(Oryza sativa subsp indica)品种79106、珍鼎28、金早6号、87S2-3和IR_(29)的成熟种子去壳后,切下成熟胚接种于添加不同种类的生长调节剂的改良MS培养基(以MS为基本培养基,其中VitB,改为5.0mg/L、蔗糖为5.0％、琼脂固化,pH 5.8)上,恒温26±1℃、暗中诱导产生愈伤组织。每品种接种8瓶,每     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织,内含许多有分生能力的细胞团。当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力丧失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力。ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其促进乙烯生成有关。     

Relationship Between Ploidy Variation of Citrus Calli and Competence for Somatic Embryogenesis

This study focuses on the relationship between the genetic variation of calli and the competence for somatic embryogenesis in citrus. The DNA content of 35 citrus calli of different genotypes was measured three times by flow cytometry during a period of four years. The results showed that 71.4% of the genotypes had a progressive increase of varied cells, while those of Page tangelo, Shamouti sweet orange, Russ navel orange and Cleopatra decreased; significant difference in the variation degree (percentages) existed among genotypes. Studies carried out on the induction of somatic embryogenesis revealed that 9 out of the 35 genotypes had still kept the competence of somatic embryogenesis, and the rest 26 had lost the competence. Correlation analysis indicated that there was no significant relationship between the variation degree and the embryogenesis competence r=−0.10 (P<0.01), neither for the relationship between the subculture duration and the regeneration capacity.     

伏令夏橙愈伤组织体细胞胚发生中多胺水平的变化

以继代培养8年的伏令夏橙愈伤组织为材料,研究了不同类型愈伤组织体细胞胚发生能力的差异和多胺水平的变化及两者之间的关系.结果表明,胚性愈伤组织的多胺含量高于非胚性愈伤组织,体细胞胚发生能力与多胺水平呈正相关.体细胞胚发生早期Put含量的增加有利于体细胞胚发生.球形胚大量形成时,Spd达到最高值;球形胚发育后期并有少量心形胚形成时Spm达到峰值.随着倍性的增加,伏令夏橙体细胞胚发生能力降低.精氨酸脱羧酶的活性变化与Put水平呈正相关,表明它是调节伏令夏橙体细胞胚发生中多胺水平的重要因子.     

百合体细胞胚胎发生和植株再生

以切花百合(Lilium)品种‘黄天霸’(‘Manissa’)花器官为外植体诱导体细胞胚胎发生与植株再生。结果表明,不同花器官、不同激素配比对愈伤组织形成均具有显著影响。花丝为最佳外植体,激素对愈伤组织诱导的影响效应为NAA>6-BA>2,4-D,最适培养基为MS+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-16-BA;激素诱导体细胞胚胎发生的影响效应为2,4-D>KT>6-BA,最佳培养基配方为MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1KT+1.0 mg.L-16-BA;MS培养基添加IBA可促进体细胞胚萌发成苗,体细胞胚芽成苗的最佳培养基为MS+0.2 mg.L-16-BA+1.0 mg.L-1IBA。     

花楸合子胚诱导体细胞胚胎发生研究

分别以完整成熟胚、切去一个子叶的成熟胚和切下的子叶为外植体,以MS为基本诱导培养基、1/2MS为基本分化培养基,进行了花楸体细胞胚胎发生研究。结果表明:以完整合子胚作为外植体的体胚诱导率最高,为100%,最佳植物生长调节剂组合为5 mg.L-1NAA+2 mg.L-16-BA;NAA和6-BA浓度及二者的交互作用对愈伤组织和体胚诱导率的影响极显著;光照配合延长继代间隔时间有利于体胚发生。实体观察结果表明,花楸体胚发生方式有直接发生和间接发生两种;体胚发育经历了球形期、心形期、鱼雷形期和子叶期。组织学观察结果表明,体胚具有两极性,子叶期体胚结构完整。     

逆境处理和DNA甲基化影响柑橘体细胞胚发生

对 1 5种柑橘胚性愈伤组织进行体细胞胚诱导 ,发现逆境处理有利于体细胞胚发生 ,并可以恢复部分品种的体细胞胚发生能力。对具有和失去体细胞胚发生能力的两种纽荷尔脐橙 (CitrussinensisOsb .)愈伤组织进行随机扩增多态性DNA (RAPD)分析没有检测到带型的差异 ,而对它们的甲基化敏感扩增多态性 (MSAP)进行分析则发现两种愈伤组织间具有明显的DNA甲基化差异 ,具体细胞胚发生能力的愈伤组织的甲基化水平较失去体细胞胚发生能力的低     

马尾松幼胚体细胞胚胎发生研究

本论文首次报道了马尾松（Pinus massoniana Lamb.）幼胚体细胞胚胎发生的完整发育过程,并对影响马尾松胚性愈伤组织诱导的因素如球果采种期、球果冷藏处理时间、外植体处理方式等进行了探讨,统计胚性愈伤组织诱导率,进行增殖评价,探讨ABA浓度梯度对马尾松体细胞胚分化成熟的影响,试验数据用SPSS16统计分析软件进行方差分析、差异显著性检验。结果表明：1）2008~2009连续2年内15个采种期得到的幼胚,胚性愈伤组织诱导和增殖有显著性差异,最适宜的马尾松球果采种期是6月下旬至7月下旬,诱导率在9.66%~22.59%之间;2）球果冷藏处理时间,对胚性愈伤组织诱导有显著性差异,其中4℃冷藏球果15d有利于幼胚胚性愈伤组织诱导;3）雌配子体包含幼胚的接种处理方式是可取的;4）胚性愈伤组织经稳定增殖培养后,转入分化成熟培养基,得到体细胞胚状体＂爆发式＂分化成熟,数量多,质量好。适宜体胚成熟转化的培养基为：成熟LP培养基添加ABA5.0mg·L-1＋60.0g·L-1蔗糖,并附加L-谷氨酰胺和水解酪蛋白;5）成熟体细胞胚在无激素萌发型LP培养基上正常萌发,并转化为结构完整的小植株。本研究首次建立了马尾松幼胚体细胞胚胎发生技术平台,为马尾松遗传改良种质创新、缩短育种周期奠定了研究基础。     

大蕉(Musa paradisiaca ABB Linn.)花序愈伤组织的诱导及其体细胞胚发生

大蕉未成熟雄花接种到胚性愈伤组织诱导培养基中,4～5个月后可诱导出胚性愈伤组织,并可在继代培养基上增殖.胚性愈伤组织转移到体细胞胚诱导培养基中可诱导出体细胞胚.体细胞胚在成熟培养基上培养2个月后转移到含有0.2mg·L-1 6-BA的分化培养基上可以萌发,进而形成再生植株.组织学切片证明所诱导的愈伤组织是胚性组织,其所产生的体胚具有典型的单子叶植物体细胞胚的组织结构.     

Oligosaccharide Inhibits Ethylene Synthesis and Stimulates Somatic Embryogenesis in a Cotton Cell Culture

The effect of a three-component oligosaccharide fragment of xyloglucan FucGalXyl (XG3) on callus-tissue growth and somatic embryogenesis was investigated in a cotton (Gossypium hirsutumL.) cell suspension culture. The oligosaccharide introduced into an induction medium at 10^–8and 10^–7M concentrations did not affect the frequency of callus formation from hypocotyl segments; however, it enhanced the monthly increment of callus-tissue weight 1.5- and 3-fold, respectively. Induction and culturing of the callus on an XG3-containing medium adversely affected its morphogenetic potential. Addition of XG3 to the culture medium during the cell suspension preparation stimulated cell division resulting, after 40 days, in a 3.4-fold (at 10^–8M XG3) and a 1.7-fold (at 10^–7M XG3) increase in the cell number as compared to the control. Exclusion of 2,4-D, kinetin, and oligosaccharide from the culture medium caused, after two weeks, a 3.8-fold increase in the number of embryos in the 10^–7M XG3-treated suspension culture as compared to the control. The stimulation of somatic embryogenesis by the oligosaccharide was accompanied by a 12-fold decrease in ethylene emission. The morphogenetic effect of oligosaccharide is suggested to result from its anti-auxin action, which, in particular, inhibited the auxin-dependent ethylene synthesis.