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1.
高必达 《中国生物工程杂志》2000,20(6):14-18
近10年来国外在果胶酶分子生物学研究上取得了重大进展,从11个属的真菌克隆了50个以上的基因并测序。对果胶酶基因的结构、功能、调控、录译后加工等方面进行了深入探讨。已克隆的果胶酶基因以多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因和果胶裂解酶(PL)基因为主,也有果胶酯酶(PE)基因和鼠李半乳糖醛酸酶(RHG)基因,大多有内含子。前体蛋白一般有N信号肽和糖基化位点。果胶酶一般受果胶、低浓度的(01%)D半乳糖醛酸等诱导,而受较高浓度(1%)的半乳糖醛酸、抗体、某些抗菌素抑制。 相似文献
2.
用番茄乙烯形成酶(EFE)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义cDNA转化番茄子叶,获得两个转基因系统。分别比较了两个基因系统果实和叶片的乙烯生成速率、果实中EFE酶活性和果胶酶活性,表明反义EFE基因在番茄工程植株中能显著抑制EFE酶活性和乙烯生成;反义PG基因则主要是抑制其PG酶活性。 相似文献
3.
两个反义基因在番茄工程植株中的生理抑制效应分析 总被引:14,自引:0,他引:14
用番茄乙烯形成酶(EFE)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义cDNA转化番茄子叶,获得两个转基因系统,分别比较了两个基因系统果实和叶片的乙烯生成速率,果实中EFE酶活性和果胶酶活性,表明反义EFE基因在番茄工程植株中能显著抑制EFE酶活性和乙烯生成,反义PG基因则主要抑制是PG酶活性。 相似文献
4.
枇杷冷藏过程中果肉木质化与细胞壁物质变化的关系 总被引:50,自引:1,他引:49
“大红袍”和“解放钟”枇杷果实在1℃下贮藏时,细胞壁物质代谢异常,果肉硬度升高而出汁率逐渐降低,果胶酯酶(PE)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)活笥和水溶性果胶含量下降,原果胶含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及木质素和纤维含量不断增加。约经3周贮藏后,果实出现果皮难剥、果肉质地变硬、粗糙少汁的异常劣变现象。在12℃下贮藏的枇杷果实,细胞壁物质代谢正常,果肉硬度增加少,PE和PG活性及水溶性果胶含量较遍 相似文献
5.
海南秋芒采后贮藏期间的生理变化(简报) 总被引:2,自引:1,他引:1
海南秋芒采后贮于室温条件下(28~35℃)第6d呼吸速率达到高峰,果实变黄,果皮中果胶甲酯酶(PE)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性分别有采后第7和第11d最高,果肉组织中纤维素酶活性在采后9d最高,其PE和PG活性与果皮中的变化规律相似,均与果实的后熟进程关系密切;多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性变化与果实软化没有明显相关性。 相似文献
6.
果胶裂解酶基因PelC表达载体的构建及原核表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从实验室分离保存的1株产果胶酶的菌株(BTC105)中克隆果胶裂解酶基因(PelC)完整开放阅读框,通过载体构建,将目的基因连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希茵BL21(DE3)进行融合表达,在LB(Luria—Bertani)中进行摇瓶发酵,1mmol/LIPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导。结果表明,拘建了表达载俸pET28a-felC,果胶裂解酶主要在胞内表达,酶活最适pH为5.4,最适温度为50℃,Ca^2+对酶活促进作用最为明显,Cu^2+完全抑制了酶的活性。 相似文献
7.
果胶裂解酶是果胶酶的重要成员之一,能够通过B-消除作用,催化降解(1—4)-α-D-聚半乳糖醛酸。本研究首次鉴定出禾谷镰孢茵中的一个果胶裂解酶PelA,并在体外检测了其生化特性。PelA基因(FGSG_02386)的cDNA被克隆并进行了原核表达,同时构建了单基因敲除突变体。将重组质粒pET-28a(+)-PelA转化蛋白表达菌株大肠杆菌BL21表达目的蛋白,纯化后的蛋白具有果胶裂解酶活性。酶活性测定结果显示,该酶的活性受到外界环境因素如温度、钙离子浓度和pH条件的影响,其最适反应条件为50℃,CaCl:浓度0-5mmol·L^-1,pH8-5。在侵染小麦胚芽鞘时PelA单基因突变体的毒力较野生型菌株并没有出现明显变化。 相似文献
8.
大肠杆菌aroG基因的克隆表达及与pheA、tyrB基因的串联表达 总被引:1,自引:0,他引:1
3-脱氧-2-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DAHP)是苯丙氨酸合成途径中关键酶之一,在大肠杆菌中由aroG基因编码。本文用NTG诱变得到对苯丙氨酸类似物间氟苯丙氨酸(mFP)和对氟苯丙氨酸(pFP)有抗性的大肠杆菌突变株,采用聚合酶链反应(PCR)扩增得到了aroG基因,在大肠杆菌中进行了表达。结果表明,该基因能在λ噬菌体的pR启动子驱动下得到表达,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图上出现清晰的条带,酶的比活提高了1.7倍。在pheA(编码分枝酸变位酶CM和预苯酸脱水酶PD)、tyrB(编码苯丙氨酸转氨酶PAT)基因克隆、串联克隆和表达完成的基础上,将aroG基因和pheA、tyrB基因以aroG-pheA-tyrB的顺序三基因串联到表达载体进行表达,酶活测定结果表明,三个基因都能在λ噬菌体的pR启动子驱动下表达,与对照菌株相比,酶比活分别提高了1.7倍、13.9/7.8倍和2.3倍。 相似文献
9.
黑子南瓜甘油-3-磷酸酰基转移酶基因的克隆及序列分析 总被引:6,自引:3,他引:3
依据国外报道的南瓜甘油-3-磷酸转酰酶(GPAT)基因的cDNA序列合成相应引物,用RT-PCR技术,成功地分离了黑子南瓜(Cucurbitaficifolia)GPAT基因的cDNA片段,并亚克隆到了pGEM-T载体系统的多克隆位点上,序列分析表明黑子南瓜GPAT基因的cDNA序列及递推的氨基酸序列与南瓜(Cucurbitamoschata)相比分别具有98%和965%的同源性。在1188bp中有22个核苷酸发生变化,导致13个氨基酸的改变 相似文献
10.
真菌多聚半乳糖醛酸酶研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
真菌多聚半乳糖醛酸酶是降解植物细胞壁果胶的主要降解酶之一,是植物病原真菌的致病因子之一。文中对真菌多聚半乳糖醛酸酶及其序列特征、多聚半乳糖醛酸酶的基因及其序列特征、多聚半乳糖醛酸酶的表达调控以及与病原真菌致病力之间的关系等方面进行了综述。 相似文献