寄生于粘虫的卵索线虫属一新种——中华卵索线虫(线虫纲:索科)

本文报道从河南省驻马店地区和山东省临沂地区麦田内采集的粘虫幼虫的寄生线虫优势种卵索线虫属一新种,命名为中华卵索线虫,新种Ovomermis sinensis sp.nov.     

中华卵索线虫线粒体基因组多态性分析

为完善昆虫病原索科线虫线粒体基因组全序列数据库, 更系统地研究其基因组特征和系统演化规律, 进而为发挥该线虫生防潜力打下基础, 我们开展了中华卵索线虫Ovomermis sinensis线粒体全基因组的研究。该研究通过线粒体基因组滚环复制及酶切图谱, 揭示了中华卵索线虫线粒体基因组具有种内遗传多态性, 即群体中单体线虫具有独特的酶切条带, 且条带累加之和变化范围较大, 为16.5～24.5 kb。为进一步了解线粒体基因组多态性特征及产生的分子机制, 采用两步长PCR方法对2条代表性成虫线粒体基因组进行了测序及拼接, 得其全长分别为18 864和16 777 bp。对这2条序列的比对表明, 线粒体基因组中位于ND2和ND4之间的可变区域, 不仅基因排列顺序不同, 且存在ND3基因重复现象, 这是导致中华卵索线虫线粒体基因组呈现多态性的主要原因。通过对以上研究结果的分析及与GenBank中已有的6种索科线虫线粒体基因组序列进行比对, 概括出其线粒体基因组基本特点: ①线粒体基因排列顺序各不相同;②部分线虫线粒体基因存在重复现象, 且重复次数不同;③线粒体基因组大小存在很大差异。     

中华卵索线虫的研究与应用

中华卵索线虫Ovomermis sinensis Chen etal.作为一种昆虫病原线虫,在农业害虫的生物防治中起着重大作用。文章综述90年代以来我国有关中华卵索线虫的生物学特性、田间应用、体内外培养以及生化与分子生物学研究进展,并对中华卵索线虫今后的研究方向提出建议。     

中华卵索线虫雌雄成虫可溶性蛋白双向电泳分析

昆虫寄生线虫 (又称虫生线虫、昆虫病原线虫)是本世纪发展起来的一种有潜能的生物防治因子 ,它寄主范围广、能主动寻找寄主、对人畜及环境安全无毒。中华卵索线虫是昆虫寄生线虫的一种 ,由我国学者发现并命名的新种 (陈果等 ,1 9 91 ) ,具有广泛的寄主范围 ,可杀灭粘虫 (任慧芳等 ,1 989)、烟青虫、烟蚜 (侯茂林等 ,2 0 0 2 )及棉铃虫 (陈果 ,1 994)等危害十分严重的害虫 ,其寄生率等于宿主的死亡率。因此在生物防治手段日益突出的今天 ,中华卵索线虫无疑有着广泛的应用前景。然而 ,在线虫培养的过程中 ,无论是体内培养还是体外培养 ,我们发…     

中华卵索线虫感染棉铃虫后脂肪体结构的变化

采用组织超薄切片技术,电镜下观察研究昆虫棉铃虫Helicoverpa armigera Hǖbner脂肪体细胞的超微结构,结果表明。在中华卵索线虫Ovomermis sinensisChen感染棉铃虫后的不同寄生时期内,宿主脂肪体细胞内的线粒体、内质网、脂肪球和细胞核等细胞器在形态和结构上均有较大的病理变化,这些病理变化,与这一时期中华卵索线虫的生长发育和寄生生活等特点密切相关。     

中华卵索线虫的性别分化分子机理研究进展

中华卵索线虫Ovomermis sinensis Chen et al.是一种宝贵的昆虫天敌资源,具有特殊的寄生期营养竞争压力决定其雌雄性别分化机制。本文重点概述了近年中华卵索线虫性别决定与分化、寄生期生理生化以及分子系统学研究等方面的进展,并对中华卵索线虫今后的研究方向提出了建议。     

寄生于直翅目昆虫的索线虫属一新种—西安索线虫（线虫纲：索科）

本文报道陕西省西安附近的咸阳市近郊农作区的直翅目昆虫日本菱蝗、姬蟋等体内寄生的索线虫属一新种,命名为西安索线虫Ｍｅｒｍｉｓ ｘｉａｎｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ．;指出了它的鉴别特征。索线虫属及直翅目宿主皆为国内新记录。     

棉铃虫感染中华卵索线虫后血淋巴游离氨基酸含量的变化

中华卵索线虫Ovomermis sinensis感染棉铃虫Helicoverpa armigera 1天后,棉铃虫幼虫血淋巴中游离氨基酸总量大幅度下降,各种游离氨基酸的含量也是如此变化。感染2～4天后的棉铃虫血淋巴中游离氨基酸总量变化不大,各种游离氨基酸的含量有升有降。感染5～6天后的棉铃虫血淋巴中游离氨基酸总量和各种氨基酸的含量都急剧上升。研究表明,中华卵索线虫寄生棉铃虫时,棉铃虫血淋巴中游离氨基酸含量的变化朝着有利于线虫生长发育的方向进行。     

大白鼠全胚胎体外培养的研究

作者分别取出孕9.5天和孕11.5天大白鼠全胚胎于体外培养各48小时,重点观察9.5天至11.5天胚胎生长发育的形态学变化。     

甜橙成熟果实未发育胚珠的离体培养

路比血橙和锦橙成熟果实的未发育胚珠在含ME(1000mg/l)的MT培养基上培养,胚状体诱导率和每个胚珠平均产生胚状体数均较高。带胚状休的愈伤组织转入该培养基上继代培养,仍可保持其胚性特点。将子叶形胚状体转至含GA(1mg/l)和CH(500mg/l)的MT培养基上,成苗率较高。这为扩大柑桔组织培养的外植体来源和克服外植体的季节限制提供了新途径。     

猪卵母细胞体外成熟与冷冻附睾精子的体外受精

由屠宰母猪卵巢分离得到505枚卵母细胞,经成熟培养,其中468枚卵丘细胞扩张,成熟率为92.7％。采用冷冻的附睾精子授精,受精率为41.9％(57/136),其中单精受精率36.8％(50/136),多精受精率5.1％(7/136)。授精卵体外培养24和48小时后的卵裂率分别为5.3％(15/258)和12.9％(30/232)。把35枚早卵裂期胚胎和250枚未见卵裂的1-细胞期受精卵移入4头受体母猪的输卵管内,其中2头妊娠,分别于1990年4月10日和29日正常分娩,共生产仔猪21头。     

应用离体叶片法鉴定棉花种质抗螨性的研究

应用离体叶片法,对9个棉花种质进行了鉴定,试验结果表明;种质间抗生性和忌避性差异显著;同株棉花不同部位的叶片对朱砂叶螨的抗生性无显著性差异。通过对叶螨在不同棉花种质上种群增长动态进行系统聚类,可将9个棉花种质划分为3类:斯字棉825-91、杞县86789、鄂棉314、苏联8911为1类,中棉164、潼南接龙棉、新库861517-2、南农NAC90-2为1类,美棉7-15独立为1类。依据朱砂叶螨在不同种质上的种群增长曲线和高峰期螨量增长倍数,可将9个种质划分为3个类型;斯字棉825-91、新库861517-2为抗性类型,潼南接龙棉、美棉7-15、南农NAC90-2为感性类型,其余为中抗类型。从忌避性看:斯字棉825-91、美棉7-15表现出较高的忌避性。     

VITRIFICATION OF IN VIVO AND IN VITRO PRODUCED OVINE BLASTOCYSTS

Although cryopreservation of bovine embryo has made great progress in recent years, little achievement was obtained in ovine embryo freezing, especially in vitro produced embryos. However, a simple and efficient method for cryopreservation of sheep embryos will be important for application of ovine embryonic techniques such as in vitro fertilization, transgenic, cloning and etc. In this study ovine blastocysts, produced in vivo or in vitro, were cryopreserved by vitrification in EFS40 (40% ethylene glycol (EG), 18% ficoll and 0.5 M sucrose) or GFS40 (40% glycerol (GL), 18% ficoll and 0.5 Mol sucrose). In Vitro produced, early blastocysts were directly plunged into liquid nitrogen (LN₂) after preparation by one of the following procedures at 25°C: (A) equilibration in EFS40 for 1 min; (B) equilibration in EFS40 for 2 min; (C) equilibration in EFS40 for 30 s following pretreatment in 10% EG for 5 min; (D) equilibration in EFS40 for 30s following pretreatment in EFS20 for 2 min (E) equilibration in GFS30 for 30 s following pretreatment in 10% GL for 5 min. The survival rates observed after thawing and in vitro culture for 12 h were A 78.0% (39/50), B 50.0% (26/52), C 93.3% (70/75), D 92.0% (46/50) and E 68.0% (34/50). Survival rates were not significantly different for treatments C and D (p>0.05), but those for groups C and D were significantly higher than for A, B and E (p<0.05). After 24 h in vitro culture, hatched blastocyst rates were A 28.0% (14/50), B 21.1% (11/52), C 49.3% (37/75), D 48.0% (24/50), E 32.0% (16/50) and control 54.0% (27/50). The hatching rates for groups A, B and E were significantly lower than the control (p<0.05) in which early IVF blastocysts were cultured in fresh SOFaaBSA medium following treatment in PBS containing 0.3% BSA for 30 min, but for groups C and D it was similar to the control (p>0.05). The freezing procedures A, B and C were used to vitrify in vivo produced, early blastocysts recovered from superovulated ewes. The survival rates of frozen-thawed in vivo embryos were A 94.7% (72/76), B 75.0% (45/60) and C 96.4% (54/56) and for group B was significantly lower than for the other two treatment groups (p<0.05). Hatched blastocyst rates were A 46.0% (35/76), B 26.6% (16/60), C 51.8% (29/56) and the control 56.7% (34/60) in which early blastocysts from superovulation were cultured in fresh SOFaaBSA medium following treatment in PBS containing 0.3% BSA for 30 min. The hatching rate for treatment B was significantly lower than for the control (p<0.05) but did not differ between groups A, C and the control (p>0.05). Frozen-thawed embryos vitrified by procedure C were transferred into synchronous recipient ewes. Pregnancy and lambing rates were similar for embryos transferred fresh or frozen/thawed for both in vivo and in vitro produced embryos. These rates did not differ between in vivo and in vitro embryos transferred fresh (p>0.05). However, for frozen-thawed embryos, both rates were significantly lower for in vitro than for in vivo produced embryos (p<0.05).     

杨树叶薄层培养中不定芽形态发生的细胞组织学研究

将杂种杨树(Populus nigra var.betulifolia×P.trichocarpe)NE299叶主脉用振动切片机横切成400μm或800μm的薄切片,培养在附加0.2mg/L BA和0.01mg/L NAA的木本植物培养基上。培养后,位于主脉维管束两侧中上部的维管束鞘薄壁细胞首先启动分裂。几乎同时,与其邻接的一些栅栏组织细胞也分裂,并很快形成胚性分生细胞团。主脉的愈伤组织主要由维管束鞘薄壁细胞,以及与其邻接的一些栅栏组织细胞和韧皮部的薄壁细胞分裂而来。不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可以起源于维管组织结节(vascular nodules)周围的形成层状细胞。侧脉的维管束鞘细胞分裂活动很强,可不经愈伤组织直接长成不定芽。杨树叶主脉处的维管束鞘薄壁细胞在与叶肉组织相邻接的细胞中,通常含有少量较小的叶绿体,而位于背腹面的细胞中含有贮藏的淀粉。对形态发生的特定部位及其细胞进行了讨论。     

离体条件下鱼对灭幼脲的代谢

实验选用甘氨酸－氢氧化钠（ｐＨ９±０．０１）缓冲溶液,草鱼或鲤鱼肝脏匀浆液经低速离心后取上清液作为酶,反应系统中加入ＣＣＵ后在２５℃保温５ｈ,用醋酸乙酯萃取代谢产物,用ＴＬＣ对代谢产物进行分离纯化,用ＨＰＬＣ方法对代谢产物进行定性定量测定,证明有对氯苯基脲素ＣＰＵ产生。为进一步证实代谢产物为ＣＰＵ,用能给出绝对光谱定性数据的紫外检测器在一定的波长范围内,对标样及斑点中测定的组分进行扫描,从光谱学上证明了产物是ＣＰＵ。当加入专一性酯酶抑制剂后,酶活性被抑制８９－９９％,证明酯酶在ＣＣＵ的降解中起重要作用。     

带培养室的倒置显微镜下人雪旺细胞形态和运动的观察

为了显示体外培养条件下三维结构上人雪旺细胞的形态和运动方式,将引产人胎儿坐骨神经的雪旺细胞培养在聚酯纤维上,用带培养室的显微镜观察。结果显示人雪旺细胞呈梭形,绕聚酯纤维作螺旋式迁移;有的细胞同时抓住两根纤维;在相对静止期,细胞虽无位置的迁移,但有频繁的形态变化;分裂后的子细胞有形态和运动时相的不同。     

家兔胚泡ICM在体外培养系统中的行为

一、用显微外科方法从兔早期胚泡分离来的ICM在所用的体外培养系统中的行为,因ICM的生长状态而不同。呈带状生长的ICM从近端向远处延伸,而细胞的分化则从远端逐渐向近端进行,它具有明显的极性。细胞的分化秩序井然,层次分明。因此呈带状生长的ICM适用于进行细胞分化和细胞谱系的研究。二、呈团块状生长的ICM,没有明显的极性,细胞分化开始于团块的外表面,逐渐向中央进行。细胞分化开始稍晚一些,速度也较慢,这种生长状态的ICM适用于分离胚胎干细胞。三、兔子胚外内胚层从ICM分化来,它经历了二次分化的过程。第一次发生于培养后第三天(相当于交配后第七天),形成第一胚外内胚层-胚外体壁内胚层,它向远处迁移,远离原始外胚层。培养后四天(相当于交配后第八天),形成第二种胚外内胚层-胚外脏壁内胚层,它尾随体壁内胚层向远处迁移,其后缘的部分细胞向原始外胚层附近的滋胚层下面侵润。四、胚外体壁内胚层和脏壁内胚层的细胞是由少数决定了的和离开ICM的细胞分化和增殖而来。五、文中讨论了早期胚胎细胞分化的谱系问题。