猪瘟病毒感染猪白细胞凋亡基因表达谱变化的研究

为了了解CSFV感染引起猪细胞凋亡的分子机制,利用基因芯片分析了猪感染CSFV前后基因组转录水平的变化。分离攻毒前和攻毒后猪外周血白细胞(Peripheral blood leucocyte,PBL),提取总RNA,经反转录和体外转录得到cRNA,与Affymetrix猪全基因组cDNA芯片进行杂交分析,筛选差异表达的凋亡基因。结果显示,感染猪的PBLs中共筛选到24个涉及细胞凋亡有关基因发生2倍以上变化,并对差异表达的12个宿主细胞凋亡相关基因,用荧光定量RT-PCR进行了验证。功能分析显示,这些凋亡基因的表达变化与CSFV诱导宿主细胞凋亡的机制有关。本文首次用猪全基因组芯片研究了CSFV感染诱导宿主基因的表达变化,建立了CSFV感染猪细胞凋亡相关基因的表达谱,初步阐释了CSFV感染诱导宿主细胞凋亡的分子机制。     

细胞辐射抗性关基因的研究进展

电离辐射能够诱导细胞一系列基因的表达,与辐射抗性相关的基因如ｐ５３抑癌基因、癌基因、ＤＮＡ损伤修复相关以及影响细胞生长分化多种调控基因等,通过参与调节细胞周期,促进细胞ＤＮＡ损伤修复和抑制细胞凋亡等多种途径,最终使得细胞的辐射抗性增加。目前人们对其中一些基因的作用机制已有所了解,而对更多的基因的作用机理尚不清楚。认识细胞辐射抗性相关基因的表达调控和生物功能对阐明辐射抗分子机制至关重要。     

P63和p73参与p53依赖的细胞凋亡过程

Ｐ5 3是一个重要的抑癌基因 ,其转录翻译出的蛋白分子 ｐ5 3通过与凋亡相关靶基因 ｐ2 1、ｍｄｍ2、ｂａｘ、ＰＥＲＰ作用而使有潜在癌变倾向的细胞凋亡 ,一些ＤＮＡ损伤诱发的细胞凋亡过程也依赖于 ｐ5 3分子的启动。Ｐ6 3和 ｐ73属于 ｐ5 3基因家族成员 ,其蛋白分子 ｐ6 3和 ｐ73与ｐ5 3有结构上的相似性 ,且功能亦与细胞凋亡相关 ,但ｐ6 3和 ｐ73在凋亡中所起作用的详细机制尚且不清。麻省理工学院和哈佛大学学者ＥｌｓａＲ .Ｆｌｏｒｅｓ和ＫｅｎｎｅｔｈＹ .Ｔｓａｉ等用基因敲除法 ,先后通过 4种ＤＮＡ损伤诱导凋亡的实验 ,同时在体外…     

二烯丙基二硫作用于K562细胞后凋亡相关基因的差异表达

目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide DADS)作用于人白血病K562细胞后凋亡相关基因的差异表达,为进一步探讨DADS诱导K562细胞凋亡的分子机制提供基础.方法:采用瑞士-吉姆萨和Hoechst33342染色观察细胞形态学变化.运用基因芯片技术检测40 mg/LDADS作用于K562细胞24h后凋亡相关基因的差异表达,选择其中上调基因GADD45A、下调基因HO-1运用RT-PCR技术进行验证.结果:40mg/L的DADS作用于K562细胞后出现凋亡所具有的典型形态学变化.40 mg/L DADS作用K562细胞24 h后有14个凋亡相关差异表达基因.GADD45A、HO-1基因表达情况与基因芯片结果一致.结论:DADS可能通过多个基因和多条信号转导通路共同作用诱导人白血病细胞K562凋亡.     

凋亡调控基因BCL2家族研究的新进展

凋亡的调控是细胞生理死亡和肿瘤发生的重要机制. 对各种刺激诱导下细胞凋亡机制的分析有助于深入了解肿瘤细胞生物学及发现新的治疗对策.凋亡调控基因BCL2家族成员可分为凋亡阻遏基因和凋亡促进基因.这些基因编码的蛋白质分子通过组成和/或影响同二聚体与异二聚体的不同比例而介导其对细胞存活的生物学效应.     

早幼粒细胞诱导凋亡过程中Bcl-2动态平衡表达

细胞凋亡机制的探索对于急性早幼粒细胞白血病治疗至关重要。B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)基因家族是调控细胞凋亡的关键基因。拮抗和促进细胞凋亡的动态平衡决定细胞的命运。本研究通过对凋亡相关基因的表达水平与细胞生长趋势的分析表明,高三尖杉酯碱与全反式维甲酸联合处理细胞可以更有效地促进早幼粒细胞凋亡(P<0.05)。随着药物浓度变化,Bcl-2与相关基因的表达呈现先升高后降低的趋势(P<0.05)。低浓度药物处理时,抗凋亡蛋白质Bcl-2表达升高,阻止细胞凋亡(P<0.05)。随药物浓度的升高,Bcl-2表达降低,细胞凋亡率提高,进入深度凋亡期(P<0.05)。荧光显微镜观察与流式细胞术的方法验证了细胞凋亡的情况。本研究进一步阐明了高三尖杉酯碱联合全反式维甲酸诱导早幼粒细胞凋亡过程中,Bcl-2及细胞凋亡与增殖的相关基因表达水平的变化与分子机制,为深入探索药物联合诱导凋亡提供可靠支持,为临床治疗做出基础理论的补充。     

光甘草定诱导小鼠黑色素瘤B16F10细胞凋亡的机制研究

通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显著上升,Bcl-2则表达下调。进一步的研究发现,经光甘草定处理后的B16F10细胞中,培养基中葡萄糖含量升高,而ATP含量、乳酸生成均降低;细胞内糖酵解相关基因及蛋白HK2、Ldha表达下调。同时,经光甘草定处理后,移植瘤小鼠的肿瘤组织生长受到明显抑制,肿瘤组织内细胞凋亡率显著升高,Bax表达明显上升,而Bcl-2、HK2和Ldha则表达均下调。说明,光甘草定在一定浓度范围内抑制了小鼠黑色素瘤B16F10细胞的增殖,诱导细胞凋亡,而其诱导细胞凋亡的机制可能与调控糖酵解相关基因的表达相关。     

植物管状分子发育中的细胞凋亡

细胞凋亡在植物发育过程和防御机制中发挥着重要作用.植物细胞凋亡具有染色质固缩和边缘化、DNA片断化、核的降解、质膜内缩、大量囊泡的出现、细胞壁的修饰等特征,是由相关的基因、蛋白酶以及细胞色素C介导和调控的.本文根据国内外的研究报道,对两种管状分子(导管、筛管)发育过程中细胞凋亡的形态学变化以及机制进行分析,为进一步探讨细胞凋亡的途径和机制提供参考.     

桦木脑通过SREBP1抑制靶基因PIK3R3抗肝癌

该文主要研究桦木脑通过固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element binding proteins, SREBP1)抑制靶基因PIK3R3(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 3)抗肝癌的分子机制。采用MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡; qRT-PCR检测细胞周期蛋白、周期蛋白激酶和凋亡相关基因mRNA水平;采用RNA-seq并整合ChIP-Seq数据筛选SREBP1调控的凋亡相关基因;双荧光素酶报告系统检测SREBP1对凋亡基因的调控作用。结果显示,桦木脑能够显著抑制肝癌细胞增殖,诱导其凋亡,并且使肝癌细胞阻滞在G2/M期;桦木脑通过抑制SREBP1可直接下调凋亡基因PIK3R3的表达,促进细胞凋亡,进而抑制肝癌细胞增殖。     

细胞凋亡中MicroRNA的调控作用

MicroRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA,广泛存在于多种生物体内,通过调控靶基因的转录表达影响各种生命活动。细胞凋亡是细胞受到外部或者内部刺激后自发启动的基因控制的程序性死亡。最近几年,越来越多的研究表明miRNAs通过靶向调控凋亡基因或者凋亡信号传导从而直接或间接地参与到细胞凋亡的产生和发展。综述miRNA和细胞凋亡的关系,揭示miRNA调控细胞凋亡的分子机制。     

冷诱导细胞凋亡及其调控机制

冷和细胞凋亡有着密切的关系,冷诱导细胞凋亡的研究已经成为器官移植医学领域里的热点。冷诱导细胞凋亡的信号转导过程错综复杂,细胞内活性氧自由基、Ca2 、Fe2 以及冷相关基因都介导或调控冷引起的细胞凋亡。结合有关冷和细胞凋亡方面的研究进展,综述了与冷引起的细胞凋亡相关的信号转导过程和相关基因的调控机制。     

凋亡相关基因调控舌苔形成的分子机制

舌苔形成与舌背黏膜上皮细胞的增殖、分化和凋亡密切相关.凋亡相关基因是调控细胞增殖和凋亡的重要基因,不同舌苔中凋亡相关基因的表达规律是近年来舌苔研究的热点.本文综述了近年来的相关研究成果,并展望了新方法和技术在舌苔研究中的应用前景,以期推动凋亡相关基因调控舌苔形成的分子机制研究.     

动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源性研究进展

细胞凋亡是由基因调节的主动过程.对动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源性的研究发现,dad-1基因的结构和功能在动物和植物中均具有保守性.动物中的其他细胞凋亡相关基因,如ras、myc、Rb、p53、bcl-2 等基因,在植物中均有其同源序列,有的在植物中找到了功能相似的基因.细胞凋亡的调控机制在生物进化过程中,不但具有一定程度的保守性,而且在调控机制上具有多样性.     

动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源笥研究进展

细胞凋亡是由基因调节的主动过程。对动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源性的研究发现,dad—1基因的结构和功能在动物和植物中均具有保守性。动物中的其他细胞凋亡相关基因,如ras、myc、Rb、p53、bcl-2 等基因,在植物中均有其同源序列,有的在植物中找到了功能相似的基因。细胞凋亡的调控机制在生物进化过程中,不但具有一定程度的保守性,而且在调控机制上具有多样性。     

生精细胞凋亡相关基因

细胞凋亡(apoptosis)是一种基因控制的细胞生理性自杀行为,用以维持细胞数量的相对恒定,可由某种刺激或抑制剂的移除而激活。在哺乳动物精子发生过程中,各级生精细胞都会发生相应的凋亡,通过严格调控以确保成熟精子生成的数量和质量。生精细胞的凋亡是一个许多基因参与的复杂的不可逆过程,其中Bcl-2/Bax基因族、p53基因、Fas-Fasl基因、C-myc基因、CREM基因、HSP基因族、c-Kit/SCF基因、Insl3基因、iNOS基因、BMP8B基因、TR基因和存活蛋白(survivin)基因等发挥了重要作用。研究哺乳动物睾丸生精细胞凋亡相关基因,有利于了解生精细胞凋亡机制,为进一步阐明精子发生的调控机制,预防和治疗精子发生相关疾病提供重要的理论依据。     

下调CDH17基因对那可丁耐药性人胃癌细胞作用的分析

探讨下调肝肠钙黏连蛋白(CDH17)基因对抑制那可丁耐药性人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制,为临床治疗胃癌提供新的治疗手段。本研究以人胃癌MGC-803细胞为研究材料,通过体外MTT实验检测细胞活力、流式细胞术观察细胞增殖与凋亡情况,蛋白免疫印迹检测凋亡通路相关蛋白的表达水平变化。那可丁药物处理实验和MTT实验表明,下调CDH17可以提高人胃癌MGC-803细胞对那可丁的敏感性;流式细胞术观察结果表明,下调CDH17基因促进引起细胞凋亡;蛋白免疫印迹实验表明线粒体途径参与那可丁诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的过程。综上所述,下调CDH17基因通过提高人胃癌MGC-803细胞对那可丁的敏感性,引起线粒体途径相关蛋白功能障碍促进细胞凋亡,从而抑制胃癌细胞的增殖。     

自体吞噬在细胞死亡中的角色

一直以来人们认为自主性细胞死亡就是凋亡。然而 ,最近的研究表明 ,自主性细胞死亡不仅包括凋亡 ,还包括自体吞噬。自体吞噬通过与凋亡不同的降解机制 (膜包被降解 )和分子机制 (特定基因的激活 ) ,使细胞在某些特殊环境如饥饿、发育、分化等条件下自主死亡。在自主性细胞死亡中 ,自体吞噬与凋亡是两个既相互独立又紧密相关的过程。对自体吞噬机制的了解 ,必将为自主性细胞死亡机制的阐明及其相关疾病的治疗提供新的思路。     

人乳头瘤病毒与细胞凋亡

近来研究表明病毒感染与细胞凋亡有着密切的关系。在研究中发现,许多病毒参与细胞凋亡的诱导和抑制,在这些过程中相关病毒的基因的表达起着关键作用,而细胞凋亡相关因子直接或间接参与这一过程,对于这些问题有助于阐明病毒感染后病毒和细胞相互作用的分子机理。本文对人乳头瘤病毒的E6、E7、E2、和E5等基因及表达蛋白与细胞凋亡相关因子p53、pRB等相互作用,以阐述HPV的致癌机理。     

关键蛋白酶激活因子Apaf-2/CytC在细胞凋亡中的作用

描述了Apaf-2/CytC在细胞凋亡中的作用,主要阐述了细胞凋亡相关因子Apaf-2/CytC的发现,Apaf-2与Apaf-1及Apaf-3在细胞凋亡中的作用及相互关系,CytC介导细胞凋亡的方式。探讨了线粒体CytC的泄漏机制,对MPTP假说、专一性通道假说和线粒体膨胀假说进行了阐述,并对细胞凋亡信号转导途径,如CytC途径、Fas/FasL途径、蛋白激酶途径、AIF凋亡途径及这些信号转导途径间的对话进行了分析,最后分析了研究CytC与细胞凋亡分子机制的意义并提出细胞凋亡分子机制中一些未完全研究清楚的问题。     

PTSD与杏仁核神经元细胞凋亡的关系

目的观察创伤后应激障碍（PTSD）大鼠杏仁核神经元细胞凋亡相关基因的表达与细胞凋亡的发生,从杏仁核神经元细胞凋亡揭示PTSD的部分发病机制。方法成年健康雄性Wister大鼠50只,随机分为连续单一刺激（single prolonged stress,SPS）模型的1d、4d、7d、14d组及正常对照组。应用免疫组化和Western Blotting技术检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2在PTSD杏仁核神经元的表达;采用TUNEL法检测PTSD大鼠杏仁核神经元细胞凋亡。结果PTSD大鼠杏仁核神经元凋亡相关基因Bax于4d达高峰,Bcl-2于1d表达最高,Bax／Bcl-2比值逐渐升高,于4d达到峰值,之后渐趋下降。TUNEL阳性细胞在SPS各组模型均出现,4d达最高峰。结论PTSD大鼠杏仁核神经元细胞凋亡中,凋亡相关基因Bax、Bcl-2各自发挥促进凋亡和抑制凋亡的作用,Bax／Bcl-2比值升高促进细胞发生凋亡,可能与杏仁核调节的PTSD恐惧异常的发病机制相关。