肺吸虫囊蚴保存液的改进

肺吸虫囊蚴保存液的改进近年来,我们配制了改良的囊蚴保存液,经应用后认为,肺吸虫囊蚴在液内存活时间明显延长,（可达４～８个月）,较常用的生理盐水或林格氏液,保存囊蚴的效果为优。同时证明此液可作为肺吸虫童虫的培养基。保存液的配方是：台氏液１００ｍｌ加动物...     

长爪沙鼠作为动物模型感染卫氏并殖吸虫的实验观察

本实验首次用卫氏并殖吸虫囊蚴感染长爪沙鼠,探讨其作为研究卫氏并殖吸虫动物模型的可能性。结果显示：被感染的１８只沙鼠全部检获到发育的大型童虫,回收率为６．７％～９０％。童虫分布范围广泛,不仅腹腔、胸腔、肝、肺等组织中检获到大量童虫,并在２只沙鼠脑组织中亦发现童虫,所有童虫的生殖系统已发育达到性成熟前期。这表明沙鼠体内自然遗传属性及内在生态环境是适合卫氏并殖吸虫的生长发育。如对实验的沙鼠接种适量的卫氏并殖吸虫囊蚴,有可能提高沙鼠的存活时间,使童虫发育为成虫并产卵,从而使沙鼠这个实验动物成为一个适宜的卫氏并殖吸虫动物模型是有可能的。     

乙型脑炎14-2株冻干活疫苗的生产研究

乙型脑炎病毒14-2株经地鼠肾细胞连续传23代,各代次的病毒滴度和回传乳鼠后的毒力都较稳定,与5-3株无差异。各代次的神经毒力和中枢神经外毒力也与5-3株相同。脑内感染12～14克小白鼠均不致死,皮下感染也不致病。用地鼠肾细胞经36℃培养4天,病毒增殖达到高峰,滴度为8.0～8.5logTCID50/0.2ml。病毒培养液的pH值为7.4～7.6时,病毒增殖高峰可持续3天。以1％明胶、5％蔗糖为保护剂,在冻干后无真空、不充氮的条件下。14—2株活疫苗在37℃可保存10天,室温(16～31℃)可保存4个月,5～8℃可保存一年,病毒滴度均无明显下降.冻干后充氮或不充氮病毒的滴度及稳定性看不出差异。冻干14—2株活疫苗融化后,用Eagle’s液稀释,置22～23℃8小时,滴度不变,若以生理盐水稀释,则可保持2～4小时;以蒸馏水稀释只能稳定2小时。     

两株近交小鼠对周期型马来丝虫的易感性

于长爪沙鼠体保种的周期型马来丝虫,其感染性幼虫(100条/只)接种于BALB/cCR和BALB/cJ两株小鼠腹腔内,都获得感染成功。在95只BALB/cCR株鼠(45,50)中,显性感染者8只(4,4),占8.42％;隐性感染者34只(17,17),占35.79％。共检获成虫110条,每鼠检获1—11条,平均2.62条。在30只BALB/cJ株鼠(18,12)中,12只雌鼠全部阴性;18只雄鼠中,2只为显性感染,4只为隐性感染,共检获成虫18条,每鼠检获1—5条,平均3.0条。两株小鼠中的10只显性感染鼠,有2只腹腔液内首次发现微丝蚴是在感染后80天,其最短潜隐期约为75天。     

深层培养法生产无毒炭疽芽孢苗

1．以2％蛋白胨水溶液为培养基,以无毒炭疽芽孢为菌种,连续深层培养2—5代作为种子,再经深层通气培养制成芽孢苗。接种后先在35—36℃连续通气培养8小时,然后自然降温在31—33℃继续培养16小时至收苗。通气置为1:3(V／V),24—28小时芽孢形成率一般可达80％以上。此芽孢可经受60℃30分钟热处理。 2. 深层培养所得芽孢苗安全试验,对家兔注射1毫升(每毫升含1．5—2．5×10,活芽孢),对绵羊注射10毫升后动物均健活;区域试验时,对绵羊注射0．5毫升,对马、牛、驴、骡注射1毫升亦安全。 3. 免疫力试验表明,兔可获得3/4以上的保护,对绵羊,有二批可保护100％,一批保护80％。 4．用30％甘油水溶液稀释成含10‘活芽孢的液体免疫绵羊,二批可抗强毒炭疽芽孢200个,对最小致死量强毒芽孢获100％保护;一批保护75％,与同体培养芽孢苗相似。 5. 室温或10—15℃保存一年至43个月,芽孢菌原液活芽孢死亡不显著,免疫原性稳定,免疫力强。     

11种灭活型样本保存液对病毒核酸保护效果的比较

收集11种不同厂家的灭活型样本保存液,将甲型流感病毒加入保存液和生理盐水中,在4℃、25℃和37℃条件下保存0 h、2 h、4 h、6 h和24 h后,分别提取各组的病毒核酸,并通过逆转录实时荧光PCR检测病毒载量变化,以探究不同样本保存液对病毒核酸保护效果是否存在差异。结果发现不同样本保存液中的病毒载量随保存时间和温度变化存在显著差异。据此可将11种灭活型样本保存液的保存效果分为四类：(1)优秀产品：在任一温度（4℃、25℃、37℃）条件下,即使保存24h时病毒核酸都未发生明显降解,占比27.2%(3/11);(2)良好产品：低温（4℃）和室温（25℃）情况下核酸未出现降解,但在高温（37℃）条件下6 h后保存效果明显下降,占比27.2%(3/11);(3)合格产品：低温（4℃）条件下对病毒核酸具有较好的保护效果,但在室温（25℃）和高温（37℃）情况下随保存时间延长其保护效果显著下降,占比18.1%(2/11);(4)不合格产品：任一保存条件下对病毒核酸的保护效果都较差,甚至加入病毒后立即导致病毒核酸发生快速降解,占比27.2%(3/11)。以上结果说明不同厂家样本保存液对病毒核酸...     

黑麦叶肉原生质体的分离、培养与幼小愈伤组织的形成

黑麦叶肉原生质体系用纤维素酶溶去壁后分离出来的。酶液混合液为:纤维素酶(2％)、果胶酶(0.5％)溶于0.65M的甘露醇中,保温在24～26℃。将生长5—6天的黑麦叶片在酶掖中处理2—3小时后,就可使90％以上的原生质体分离下来。将每毫升含有5×10~4—10~5密度的原生质体培养在液体培养基中(表1),其中附加2,4-D(1毫克/升)、6BA(0.5毫克/升)、CH(1克/升)和0.56M蔗糖。培养条件为光照800—2000米烛光,温度23—26℃。培养48小时后长出新壁。第3天出现第一次分裂,4—7天进行第二、三次分裂,9天后形成细胞团,25天后长成大细咆团。此后,定期加等体积的新鲜培养液,继续培养一个时期后便形成了幼小愈伤组织。     

日本血吸虫尾蚴及童虫的生理学比较

本文介绍了经0.05％中性红-氢氧化钾染色确定为活的血吸虫尾蚴和童虫的生理学比较结果。与尾蚴相比,童虫体表对PAS及Alcian蓝阳性反应消失,与抗血清接触不再产生套膜反应;对水不能耐受,在淡水中6小时内已全部死亡,而在生理盐水中仍有92.7％存活;钻腺内含物排空,童虫不能再经皮肤感染,但越过皮肤屏障若被注入皮下或腹腔则分别有45.4—46.5％及56.9—64.9％发育为成虫。     

大瓶旋转培养地鼠肾细胞用于流行性乙型脑炎疫苗生产

地鼠肾组织经胰酶消化后,接种于盛有2000毫升含5％小牛血清的营养液的15升大瓶内,在旋转机上(4—5转／小时)37--38℃培养42—48小时,瓶壁周围即布满繁殖成致密单层的细胞。然后接种乙型脑炎病毒“P,”毒种,37—38℃静置培养36—48小时。当25—50％细胞圆缩,病变区明显和较多细胞脱落时收获,毒力log LD50 为5.0—6.5者占74％;log LD50为4.5一4.9者占26％。所制疫苗的ID50=10-3叫毫升以下者占84．6％。疫苗在8屯保存一年半,ID50没有降低。     

马来丝虫幼虫低温保存的初步研究

以5％二甲基亚砜为冷冻保护剂,将马来丝虫微丝蚴置于含20％小牛血清的RPMI-1640保存液内,在低温下(-196℃)保存。经过30—270天,微丝蚴解冻后的存活率为93—98％,大部均可使蚊虫宿主感染,并在终宿主长爪沙鼠体内发育为成虫,在其腹腔液内检获微丝蚴。 同法冻存含马来丝虫感染期幼虫的蚊体,经30、90、及181天后,解冻的蚊体内幼虫,其存活率为46.2—54.4％,90天前大部幼虫可在沙鼠体内发育并产出子代,但冻存180天组似已失去感染性。     

贵州省赤水县肺吸虫病的调查研究

1984—1986年,作者对赤水县肺吸虫病作了调查。皮试儿童399人,阳性93人(23.31％)。查拟钉螺618只,阳性5只(0.81％)。查溪蟹6种954只,5种98只检出囊蚴共计367个。捕剖嚯乳性野生动物11种44只,4种14只检获成虫164条。试验家猫3只,获成虫29条。致病虫种为斯氏肺吸虫。     

安徽歙县并殖吸虫囊蚴感染报告

1964年4月我们在皖南石台的华溪蟹(Sinopotamon)检到囊蚴后。1965年4月又从歙县西溪南公社依坑溪(黄山南20余公里)的华溪蟹中检获二种囊蚴:一种为其他科吸虫囊蚴,将另文报告;一种为卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)囊蚴,感染猫、犬后获得该虫成虫,兹将结果报道如下。 材料与方法 所有华溪蟹系1965年4月从歙县西溪南公社依坑溪采集。按体重、性别分10克以上、5—10克、5克以下(以下简称大、中、小蟹)三组,捣碎水洗沉淀。在解剖镜下观察并测量囊蚴。     

东亚钳蝎染色体空气干燥制片技术

最近,作者用气干法制片技术,略加改进,制备东亚钳蝎(Buthus martensii)染色体标本,获得良好效果。首先选取东亚钳蝎刚成熟的成虫,剪去尾部、足和前钳。在林格氏液中解剖,取出其生殖腺。放入培养液(牛血清、林格氏液和0.1%秋水仙素3:3:1)中,培养3—6小时(25℃),然后移至1%枸橼酸钠溶液中低渗处理→固定→染色。晾干、镜检并显微拍照。采用上述方法制备的东亚钳蝎染色体(见图)分散良好,图像较为清晰,便于测量。图东亚钳蝎染色体1.♂2.♀东亚钳蝎染色体空气干燥制片技术@李文盛$第一军医大学寄生虫学教研室!广州…     

日本血吸虫童虫体表超微结构动态观察

本文报告日本血吸虫皮肤型、肺型、肝门型童虫的体被用扫描电镜观察其超微结构的变化,其目的在于寻求日本血吸虫童虫的体被在实验动物体内变化的规律,提供血吸虫病在免疫学上和预防化学药物上的研究参考。其图版Ⅰ—Ⅲ的1—4为日本血吸虫尾蚴,5—7为0．5小时龄皮肤型童虫,8—13为10日龄肺型童虫,14—22为15日龄肝门型雄性童虫。     

四川肺吸虫形态学与生活史的进一步研究

本文对四川肺吸虫进行了一系列补充观察和研究,进一步证明四川肺吸虫确是一个能使人致病的独立新种,与陈氏1960年报告的斯氏肺吸虫截然不同。科学根据概括如下: 1.虫体宽长比,轻压标本平均为1:2.8,未压标本平均为1:3.3,与斯氏1:2.2者不同。 2.卵巢分枝比卫氏及克氏者复杂,比大平及怡乐村者简单,为两者间的过渡型。 3.睾丸在自然形态上为长条状,呈“天”或“王”字形,纵行、并列,侧立于虫体后1/3处。 4.皮棘为混生型,即在虫体前部为单生,向后则丛生者渐增多,介于卫氏、克氏单生型及大平、怡乐村丛生型间的过渡型。本虫皮棘在脱囊蚴为单生,在童虫有2—3并生者,在成虫则为5—6丛生,此种演变可能与虫龄有关,值得注意。与斯氏单生型绝不相同。 5.从人工感染猫、猴和果子狸的粪便中以及大白鼠肺囊内所获得的340个虫卵来看,其大小平均为82.4×48.4微米,宽长比为1:1.71。其中两只果子狸粪便所得虫卵的大小平均值分别为84.1×50.3及82.4×47.2微米,与陈氏1960年报告的从果狸获得斯氏肺吸虫虫卵大小为71×48微米者有明显差别。 本虫开始排卵时间在家猫接种后55—64天,每虫平均排卵1,732—6,662个/天。 6.本种虫卵在28℃温水中经21—23天可孵出毛蚴。毛蚴四列纤毛板排列为6.7.3.1。 7.至此,四川肺吸虫成虫形态,第一     

日本血吸虫童虫体表超微结构动态观察

本文报告日本血吸虫皮肤型、肺型、肝门型童虫的体被用扫描电镜观察其超微结构的变化,其目的在于寻求日本血吸虫童虫的体被在实验动物体内变化的规律,提供血吸虫病在免疫学上和预防化学药物上的研究参考。其图版Ⅰ—Ⅲ的1—4为日本血吸虫尾蚴,5—7为0.5小时龄皮肤型童虫,8—13为10日龄肺型童虫,14—22为15日龄肝门型雄性童虫。     

周期型马来丝虫实验感染小白鼠体内发育的观察

本实验用长爪沙鼠体内周期型马来丝虫微丝蚴,感染东乡伊蚊收集感染期幼虫,经腹腔内注射５５只小白鼠（昆明种）后,定期抽查小白鼠腹腔液和解剖小白鼠观察丝虫发育情况。在１４天、３０天、６０天、１４０天和１６０天时,分别检获了Ⅲ期、Ⅳ期幼虫、童虫和成虫。成虫感染率为３４．６％（９／２６）。９１天还查出微丝蚴。实验结果表明：周期型马来丝虫可以在昆明种小白鼠体内发育到成虫并产生微丝蚴。     

提高成年云南山楂树试管培养苗生根率的方法

用成年云南山楂Crataegus scabrifolia(Franch)Rehd.树的无菌增殖芽苗作为生根试验材料。结果表明:接种在含生长素(IBA、NAA)0.01—1.0mg/l的MS/2培养基中,芽苗的平均生根率为50.4％;在高浓度(150—250mg/l)生长素溶液中浸泡芽苗基部30分钟,然后接种到无生长素的MS/2培养基中,其生根率为60.1％;用高浓度生长素液蘸芽苗基部的生根率为83.5％;芽苗在含IBA 1—5mg/l的培养基中培养2—4天,然后转入MS/2培养基中诱导生根,生根率可达92％以上,根伸长正常。黑暗条件明显抑制生根,每日16小时至24小时光照对芽苗生根有益。     

两种捕食马尾松毛虫鸟类的初步研究

大山雀和白颊噪鹛是马尾松毛虫的最重要捕食性天敌。大山雀营巢于墙洞、土洞和树洞中,每窝产卵4—9枚。孵卵期平均14.8天,育雏期15—18天,幼鸟出窝率56.06％。白颊噪鹛营巢于浓密的杉树树冠及荆刺丛中,每窝产卵2—5枚,孵卵期平均14.6天,幼鸟出窝率36.36—44.26％。大山雀对1龄松毛虫为吞食,对2龄以上的松毛虫只啄食虫体的一部分;白颊噪鹛对各龄松毛虫均为吞食。在林间松树上人工放虫后3—4天,鸟对松毛虫的最高捕食率达94.84％。对已驯化的鸟在笼内做捕食量测定,大山雀和白颊噪鹛对1龄松毛虫每小时的捕食量分别为187和951条。     

鲢、鳙锚头鳋的生物学及其防治的研究

本文对鲢、鳙锚头鳋的生物学、病后获得免疫以及药物治疗进行了探讨。通过试验与观察得出以下几点结论：1)成虫产卵、虫卵孵化的最适水温是20-25℃。2)当水温15-20℃时,幼虫发育约需14-16天;26-31℃时,约需7天。3)在鱼种培育阶段的7月中旬至9月中旬,当水温25-37℃时,成虫的平均寿命为20天。4)成虫可分“童虫”、“壮虫”和“老虫”三种形态。5)感染一定数量锚头鳋的鲢、鳙鱼种,在虫脱、病愈后可以获得明显的免疫力。6)0．3-0．5ppm的晶体敌百虫全池泼洒,能有效地控制较大水体里的鲢、鳙锚头鳋病。7)锚头鳋的寿命和鱼种病后获得免疫与防治此病有密切的关系。