国内蝮蛇毒制剂的药理研究近况

蝮蛇毒制剂在临床上应用越来越广泛,这是由于蝮蛇毒的作用途径和机理的多样性所决定.本文介绍了国内蝮蛇毒药理作用研究近况,表明蝮蛇毒具有抗凝、去纤、溶栓、抗炎、抗癌、抗菌等功效.     

中国的毒蛇和抗蛇毒血清

我国产有近五十种毒蛇中,具有剧毒且对人畜危害较大者,约有十几种,即银环蛇,眼镜蛇,金环蛇,眼镜王蛇,蝰蛇,蝮蛇,尖吻蝮,竹叶青,烙铁头蛇及常见的几种海蛇。我国抗蛇毒血清的研制,一直未得到应有的重视,及至1970年始有抗蛇毒血清供临床使用。目前计有四种产品,即精制抗蝮蛇毒血清,精制抗尖吻蝮蛇毒血清,精制抗银环蛇毒血清和精制抗眼镜蛇毒血清。现正陆续研制抗蝰蛇毒血清,抗金环蛇毒血清等,为治疗我国毒蛇咬伤中毒患者提供可靠的特效药。     

抗蝮蛇毒血清致血清病65例临床分析

目的通过对抗蝮蛇毒血清致血清病的治疗,观察其疗效及可能的预防手段．方法回顾性分析1576例使用抗蝮蛇毒血清治疗的蝮蛇咬伤患者,常规采用抗蝮蛇毒血清分段稀释滴注法,其中65例患者在治疗后出现血清病,采用抗变态反应治疗。蛄果65例患者均治愈．临床使用抗蝮蛇毒血清治疗的同时加用糖皮质激素7天以上的532例患者无1例出现血清病．结论抗蝮蛇毒血清致血清病及时给予抗变态反应治疗,其预后良好;蝮蛇咬伤后足量、全程应用糖皮质激素是预防血清病的有效方法。     

三类抗蝮蛇毒血清的聚丙烯酰胺凝胶电泳比较研究

用聚丙烯(月先)胺凝胶电泳对三种类型的抗蝮蛇毒血清作了比较研究,结果表明,精制抗蝮蛇毒血清的凝胶电泳谱显然不同于其它两者,仅显示一条明显的抗体蛋白带,而且这种抗体蛋白与正常马血清免疫球蛋白IgG相等。     

短尾蝮蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及抗血小板聚集作用

目的研究短尾蝮蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及其抗血小板聚集作用。方法磷脂酶A2的分离纯化采用CM-SephadexC-25、DEAE-SepharoseCL-6B、SephacrylS-200、SephadexG-75柱层析法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其蛋白分子质量,以磷脂酶Az测定方法测定其酶活性,用比浊法测定其对二磷酸腺苷（ADP）引起的血小板聚集的影响。结果从短尾蝮蛇毒中纯化所得磷脂酶A2的相对分子质量为16．0×10^3（非还原）、17．6×10^3（还原）,它具有磷脂酶A2活性,能明显抑制ADP引起的血小板聚集并呈剂量-效应关系。结论此方法成功地从短尾蝮蛇毒中分离纯化出磷脂酶A2,并能抑制血小板聚集。     

精制抗蝮蛇毒血清在临床中的应用(附786例蝮蛇咬伤的报告)

本文报道应用精制抗蝮蛇毒血清治疗蝮蛇咬伤786例,治愈783例,占99.6%,死亡3例,占0.38%。临床应用中认为精制抗蝮蛇毒血清应用越早越好,该制剂对轻、中型,疗效十分显著,对重型患者以中西医结合疗法为宜。本组786例精制抗蝮蛇毒血清皮试假阴性者22例,当病人接受蛇毒血清时,出现过敏反应,经及时抗敏处理,反应未再发展。通过临床实践并提出了新的脱敏方法,减少了过敏反应的发生。     

中西医结合治疗蝰蛇咬伤75例临床体会

目的总结中西医结合抢救治疗蝰蛇咬伤的方法。方法采用抗蝮蛇毒血清和抗五步蛇毒血清配伍代替抗蝰蛇毒血清以及中西医结合综合抢救治疗蝰蛇咬伤患者75例。结果 75例患者中,治愈58例,好转13例,无效3例,死亡1例。有效率94.67%。结论在缺乏抗蝰蛇毒血清的情况下,抗蝮蛇毒血清和抗五步蛇毒血清配伍使用以及中西医结合综合抢救治疗蝰蛇咬伤能提高抢救成功率。     

抗蝮蛇毒血清的质量提高和临床应用

精制抗蝮蛇毒血清问世后,我国蝮蛇伤死亡率大为降低,随着抗血清工艺的不断改进和临床医生的积极配合,经近万例蛇伤患者治疗统计,死亡率可达0%,过敏反应率可降为0.3%以下,而且对竹叶青蛇伤及烙铁头蛇伤均有效。     

王锦蛇血清对尖吻蝮蛇毒的抑制作用

目的 探讨王锦蛇血清对尖吻蝮蛇毒的抑制作用。方法 王锦蛇血清与不同剂量的尖吻蝮蛇毒分别混合后,注射到小鼠背皮下,测定王锦蛇血清对尖吻蝮蛇毒的抗出血活力;腹腔注射此混合物后,测定王锦蛇血清对尖吻蝮蛇毒的抗毒效价;先后注射尖吻蝮蛇毒和王锦蛇血清,测定王锦蛇血清对尖吻蝮蛇毒引起的死亡、组织损伤和炎症的抑制、保护和治疗作用。结果 1ml王锦蛇血清可完全抑制10mg（干重）的尖吻蝮蛇毒的出血活力;1ml王锦蛇血清可中和11mg（干重）尖吻蝮蛇毒的致死活力;王锦蛇血清对由尖吻蝮蛇毒引起的致死、组织损伤和炎症有显著的抑制、保护和治疗作用。结论 王锦蛇血清是尖吻蝮蛇毒的强抑制剂,可能成为未来新的蛇伤治疗药物的原料。     

抗蝮蛇毒血清致过敏性休克的抢救体会

抗蝮蛇毒血清是治疗蝮蛇咬伤的唯一特效药,可引起少数人发生过敏性休克,如处理不当,将危及生命。我院于1992～2004年共收治蝮蛇咬伤患者2716例,使用抗蝮蛇毒血清治疗2358例,出现过敏性休克16例,发生率6．78％。现报告如下。     

蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的鉴定与含量测定

目的建立一种高效液相色谱法测定蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的新方法。方法采用Venusil MP-C18柱分离和LC—MS技术联用鉴定蝮蛇肌肉中存在次黄嘌呤,并测定蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的含量。姑果该法适合于蝮蛇肌肉中次黄嘌呤含量的测定。操作简便,样品稳定。结论该法操作简便,结果准确可靠,为蝮蛇药材的质量控制提供了有效的方法。     

蝮蛇毒致小鼠肾损伤模型的建立

目的探索一种建立蝮蛇毒致肾损伤动物模型的方法。方法将清洁级12周龄雄性昆明小鼠72只,随机分为9组,每组8只,A、B、C组为不同时间的对照组（A-3h,B-3d,C-5d）;D、E、F组为蝮蛇毒1mg／kg肌注组（D-3h,E-3d,F-5d）;G、H、I组为蝮蛇毒2mg／kg肌注组（G-3h,H-3d,I-5d）。按照分组要求计算每组小鼠中每只小鼠需肌注的蝮蛇毒的总量．配制2种不同浓度的蝮蛇毒液．D、E、F、G、H、I组小鼠分别肌注不同浓度的蝮蛇毒液0．15ml,A、B、C组小鼠右臀部注射生理盐水0．15ml以进行对照。结果肌注蝮蛇毒后的小鼠均出现中毒症状,但各组小鼠均无死亡。E、F、H、I组小鼠的肾功能与正常对照组比较有明显差异（P〈0．05）。D、E、F、G、H、I组小鼠均有如下病理学改变：肾被膜下出血．肾皮质充血．肾小球充血。肾小囊扩大．肾小管周围毛细血管充血．肾小管肿胀。小管细胞变性等。结论肌注蝮蛇毒是一种建立蛇毒致小鼠肾损伤动物模型的较好方法。     

两种蝮蛇抗栓酶与传统方法治疗缺血性脑卒中146例的疗效分析

采用东北白眉蝮蛇抗栓酶、江浙蝮蛇抗栓酶、丹参加低右治疗缺血性脑卒中,以一般对症处理治疗作为对照组结果显示东北白屑蝮蛇抗栓酶治疗缺血性脑卒中与对照组比较 P 值有显著性差异,而其他两组与对照组比较 P 值无显著性差异.     

解毒排毒泄毒消肿法内外合治蝮蛇咬伤的临床研究

目的观察解毒排毒泄毒消肿法内外合治蝮蛇咬伤的临床疗效。方法对2005年4月～2011年12月收治的611例蝮蛇咬伤患者采用中医药解毒排毒、泄毒消肿为主的综合治疗方法治疗,观察分析其临床疗效。结果 611例患者中,治愈553例,显效34例,有效22例,无效（死亡）2例,总有效率99.67%,痊愈率90.51%。结论解毒排毒泄毒消肿法内外合治蝮蛇咬伤具有良好的疗效。     

蛇伤清毒合剂治疗蝮蛇咬伤临床观察

目的观察蛇伤清毒合剂治疗蝮蛇咬伤的临床疗效。方法将82例蝮蛇咬伤患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加服蛇伤清毒合剂。观察比较两组止痛时间、肿胀消退时间、疗程时间及两组患者局部坏死发生率、呼吸肌麻痹、急性肾功能衰竭发生率。蛄果蛇伤清毒合剂治疗组能缩短止痛时间、肿胀消退时间-减少局部坏死发生率、呼吸肌麻痹、急性肾功能衰竭发生率,与对照组比较差异显著（P〈0．05）。蛄论蛇伤清毒合剂能显著提高蝮蛇咬伤的疗效。     

尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A_2I的表达及其生化特征

将尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶 Ａ２ Ｉ（ Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ） 的基因克隆至表达载体ｐ Ｂ Ｌ Ｍ Ｖ Ｌ２ , 在大肠杆菌 Ｒ Ｒ１ 中成功表达。表达产物 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ约占细菌蛋白质总量的３０ ％ , 以包含体的形式存在。纯化包含体后, 将产物变性、复性, 然后用 Ｆ Ｐ Ｌ Ｃ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ Ｔ Ｍ１２ 纯化, 产物经过 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 检测只有单一条带。对表达的 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性的测定。结果显示, 表达的 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ的酶活性同变性后复性江浙蝮蛇酸性磷脂酶 Ａ２（ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２） 的酶活性相近, 既具有抑制血小板聚集活性也具有溶血活性。最后对磷脂酶 Ａ２（ Ｐ Ｌ Ａ２） 的结构与这些活性的关系进行了讨论     

中西医结合治疗蝮蛇咬伤致心功能损害与衰竭79例临床分析

本文报道了中西医结合治疗蝮蛇咬伤致心功能损害与衰竭79例的临床总结.笔者认为坚持解毒与排毒相结合,是保护、改善心功能的根本措施.按心脏及其他脏器功能损害情况,采用益气生脉、解毒护心等法,辨证施治,配合对症支持疗法,及调节水电解质与酸碱平衡等.保持内环境稳定,防治继发感染,是促进心功能恢复的有效方法。     

白眉蝮蛇去整合素Adinbitor的基因克隆、表达及其部分生物学活性

为了寻找去整合素家族的新成员 ,研究其在抗血栓与抗肿瘤等方面的作用 ,从中国白眉蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT PCR扩增 ,获得了 2 19bp的白眉蝮蛇去整合素基因 .测序结果显示 ,其与韩国的同为蝮蛇去整合素的saxatilin的DNA序列同源性为 95 8% ,蛋白质序列同源性为 91 8% ,且蛋白质中含有去整合素的特征模体 RGD .将去整合素基因进行克隆、转化与诱导后 ,得到了该蛋白的可溶性高效表达 .经组氨酸亲和层析纯化 ,获得了分子量为 9kD的均质蛋白 ,并将其命名为adinbitor .活性测定结果显示 ,adinbitor能明显抑制由碱性成纤维细胞生长因子诱导的人脐静脉血管内皮细胞ECV30 4的增殖 ,诱导ECV30 4细胞发生凋亡 ,并且呈剂量依赖性方式抑制ADP诱导的人血小板聚集     

尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2的表达及其生化特征

将尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2 (A .aBPLA2 )基因克隆至温敏表达载体 pBLMVL2 ,在大肠杆菌RR1中成功诱导表达 .表达产物A .aBPLA2 约占细菌蛋白质总量的 2 0 % ,并以包涵体的形式存在 .纯化包涵体后 ,将产物变性、复性 ,然后用FPLCSuperoseTM12纯化 ,产物经过SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测只有单一条带 .对纯化后的表达A .aBPLA2 进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性的测定 .结果显示 ,表达A .aBPLA2的酶活性与变性后复性江浙蝮蛇酸性磷脂酶A2 酶活性相近 ,具有类似变性后复性江浙蝮蛇碱性磷脂酶A2 的溶血活性 ,没有抑制血小板聚集活性 .最后对磷脂酶A2 的结构与这些活性的关系进行了讨论     

蛇毒清合剂治疗蝮蛇咬伤的疗效观察

目的观察蛇毒清合剂对蝮蛇咬伤的临床疗效。方法选择2008年11月～2011年11月我院收治的蝮蛇咬伤患者62例,随机分成两组,其中观察组31例,在常规治疗的基础上加服蛇毒清合剂,对照组31例采用常规治疗。比较两组患者血清酶学3项（CK、LDH、AST）、肿胀消退时间、疼痛缓解情况、肾功能衰竭、呼吸衰竭发生率、局部组织坏死发生率、致残率以及住院时间。结果观察组的血清酶学3项（CK、LDH、AST）、肿胀消退时间、疼痛缓解情况、肾功能衰竭、呼吸衰竭发生率、局部组织坏死发生率、致残率以及住院时间均明显优于对照组（均P〈0.05）。结论蛇毒清合剂治疗对蝮蛇咬伤有显著疗效。