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共有20条相似文献,以下是第1-20项 搜索用时 328 毫秒

1.  黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究*  
   吴克 蔡敬民 刘斌 丁佐龙 张洁 潘仁瑞 钱芳《菌物学报》,2000年第19卷第3期
   黑曲霉A3(AspergillusnigerA3)的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ。经7%凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ的等电点分别为6.8、5.5和6.1。SDS-PAGE测得亚基分子量(Da)分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,3000。三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃I;xⅡ,50℃;xⅢ,50℃。最适反应pHxⅠ,3.5;xⅢ,4.5;xⅢ,5.0。保温一个小时后,酶的半失活温度分别为xⅠ,55.6℃;xⅡ,54.8℃;xⅢ,46.6℃。金属离子Ag+、Hg2+、Ni2+和脲对不同的酶组份具有一定的影响。    

2.  黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究  被引次数:2
   吴克  蔡敬民  刘斌  丁佐龙  张洁  钱芳  潘仁瑞《菌物学报》,2000年第19卷第3期
   黑曲霉A3(AspergillusnigerA3)的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ.经7%凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份.经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ的等电点分别为6.8、5.5和6.1.SDS-PAGE测得亚基分子量(Da)分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,31000.三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃;xⅡ,50℃;xⅢ,50℃.最适反应pHxⅠ,3.5;xⅡ,4.5;xⅢ,5.0.保温一个小时后,酶的半失活温度分别为xⅠ,55.6℃;xⅡ,54.8℃;xⅢ,46.6℃.金属离子Ag+、Hg2+、Ni2+和脲对不同的酶组份具有一定的影响.    

3.  黑曲霉An-76木聚糖酶系的酶学研究  被引次数:13
   陈惠忠 高培基 王祖农《微生物学报》,1991年第31卷第2期
   用分子筛和离子交换等色谱分离技术,由黑曲霉An-76的木聚糖酶系中分离纯化到一种β-木糖苷酶(βx)和三种内切-β-木聚糖酶组分(EX1,EX 2,EX 3)。这几种酶均达到凝胶电泳纯和聚焦电泳纯。用凝胶过滤方法测得3X的分子量为147000,用凝胶电泳法测得EX1、EX2和EX3的分子量分别为2 3000、22000和41 000;βX、EX1、EX2和EX 3的等电点分别为4.6、5.9、4.1和3.9。本文还研究了各种酶的最适反应温度和PH、酶的热稳定性和pH稳定性;研究了金属离子和巯基试剂对酶活力的影响、动力学参数、氨基酸组成、底物持异性和反应产物等。各酶组份不具有分解纤维素的交叉活力。巯基试剂能完全抑制卢βX活力,其活力丧失可被半胱氨酸恢复。    

4.  海枣曲霉木聚糖酶的提纯和性质  被引次数:10
   曾宇成 张树政《微生物学报》,1987年第27卷第4期
   通过硫酸铵分段、异丙醇分段、Sephadex G一100凝胶过滤、及DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspetgillu,phornicis)的麦麸培养物抽提液中分离到4个成份的木聚糖酶,分别称之为X一1、X—II、x—III和X—IV。 经7%凝胶浓度的圆盘电泳及薄层等电聚焦分析,x一1、X.IJ和x—Ill皆为均一成分,x—Iv中则仍杂有少量X~llIo X-I的最适pH为4.0,最适温度45℃,在pH 5.0--9.0之间稳定,保温30分钟时的半失话温度t为90℃。X一和x一 的最适 分别为{.及5.,最适温度均为,稳定pH范I 11 IlI pH 50 50~(3画分别为6.0—10.0及7.0--10.0,t1分别为60及55"C。SDS一凝肢电泳法测得x一’、x-r/和x—111的分子量分别为26,500、35。,500及22,000。薄层凝胶等电聚焦法测得三者的等电点分别为{.7、{.4和4.0。在所测定的化学试剂中,Ag’、Hg’’和Mn冲对这三个酶均有较强烈的抑制作用。sDS对x—I活力影响较小,对x_I】和x—Ill则有强烈的抑制作用。脲对X-1的抑制作用大,对X-II和X—Ill的抑制作用小。    

5.  黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质  被引次数:15
   陈红歌 朱静《菌物系统》,2000年第19卷第1期
   由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉149发本酵液中存在两型木聚糖酶,依次为X-Ⅰ和X-Ⅱ。通过硫酸铵分级沉淀及DEAE-Sephadex A50柱层析分别将X-Ⅰ、X-Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由SDS-凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得X-Ⅰ和X-Ⅱ的分子量分别为37kDa,24kDa和23kDa,X-Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为27.6%和7.3%。X-Ⅰ和X-Ⅱ最适返应温度分别为50℃和55℃,pH为4.    

6.  顶青霉D15木聚糖酶提纯及性质研究  被引次数:1
   杨瑞鹏 胡慰望《天然产物研究与开发》,1990年第2卷第3期
   经硫酸铵分级沉淀,BiO-gelP60凝胶过滤,和DEAE离子交换层析,从顶青霉D_15的麦麸培养物中提纯,得到4个具有凝胶电泳纯的木聚糖酶组分D_(x1)、D_(x2)、2_(x3)、D_(x4)、SDS—凝胶电泳法测得各个组分的分子量是:D_(x1),76000;D_(x2),4300;D_(x3),32500;D_(x4),29500。圆盘等电聚焦电泳法测得4个组分的等电点分别为4.50、5.70、5.30和5.20。热处理60分钟,D_(x1)、D_(x2),D_(x3)、D_(x4)的半失活温度分别为51.7℃、50.8℃、54.6℃和55.6℃。D_(x1)、D_(x4)在pH3.6—6.6稳定,D_(x2)和D_(x3)则在pH2.4—6.0稳定。各组分的A_(280)(1cm(?)mg/m1)分别是:D_(x1),0.97;D_(x2),1.46;D_(x3),0.98和D_(x4),1.07。    

7.  粗毛栓菌木聚糖酶的纯化及性质  被引次数:2
   范美霞  付灿  孙迅  陶宗娅《菌物学报》,2010年第29卷第1期
   以麦草粉为基质培养粗毛栓菌Trametes gallica,浸提固态培养物得浸提液,后经超滤浓缩、硫酸铵盐析、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析、DEAE Sepharose fast flow阴离子交换层析和Sephadex G-150分子筛层析等分离与纯化步骤,获得部分纯化的木聚糖酶,其回收率和纯化倍数分别为1.45%和15.6。进一步经活性-PAGE回收,获得三种SDS-PAGE电泳纯级的木聚糖酶同工酶组分:XⅠ、XⅡ和XⅢ(按等电点从大到小排列)。三种组分分子量均约为19.0kDa;等电点分别为:5.6、4.7和4.0;含糖量分别为:0.25%、0.63%和3.4%;XⅠ既能降解木聚糖,又能降解纤维素;XⅡ的最适作用pH值为5.0,最适作用温度45℃;Mg2+、Fe2+对XⅡ有激活作用;Mn2+和Co2+有抑制作用;测得XⅡ的Km值为0.75mg/mL,Vmax为5,000mmoL/min·mg。    

8.  黑曲霉木聚糖酶的底物特异性和低聚木糖生产  被引次数:9
   吴克  蔡敬民  张洁  刘斌  居萌  王涛  潘仁瑞《工业微生物》,2000年第30卷第1期
   对黑曲霉(Aspergillus niger)木聚糖酶进行了纯化研究,结果表明,经Sephadex G-100和DEAE-SephadexA-50分离后,获得三个组分,称为X1、X2、X3。它们经PAGE电泳分析均为单一组分。对X1、X2、X3的相关性质,特别是底物特异性也作了研究,纯酶X3组分或部分纯化的酶可用于生产低聚木糖,产品得率为10%。    

9.  绿色木霉木聚糖酶的纯化和性质  被引次数:10
   吴克  刘斌  张洁  杨智  蔡敬民  潘仁瑞《生物学杂志》,2001年第18卷第6期
   绿色木霉木聚糖酶经分离纯化后,获得三个组分木聚糖酶,称为XⅠ,XⅡ和XⅢ,它们最反应温度分别为60℃、60℃、50℃,pH分别为5.5、5.0、0、4.5,pⅠ分别为XⅠ3.8,XⅡ3.4,XⅢ3.6。半失活温度分别为XⅠ37℃,XⅡ44℃,XⅢ40℃。    

10.  东方肉座菌EU7-22木聚糖酶和木糖苷酶基因克隆及生物信息学研究  
   龙传南  蒋凤姣  邬小兵  刘健  龙敏南《生物信息学》,2013年第11卷第1期
   东方肉座菌EU7-22具有高产半纤维素酶的能力。根据已报道的同属里氏木霉及绿色木霉木聚糖酶,木糖苷酶相关基因序列,设计PCR引物扩增出东方肉座菌内切木聚糖酶(XYNⅠ,XYNⅡ)及β-木糖苷酶(β-BXL)基因。序列经NCBIBlast分析:东方肉座菌xynⅠ基因与里氏木霉xyn1基因(X69573.1)的同源性最高达到91%;xynⅡ基因与绿色木霉xyn2基因(EF079061)同源性最高达到93%;β-bxl基因与里氏木霉β-bxl1基因(Z69257.1)的同源性最高达到94%。生物信息学分析表明内切木聚糖酶Ⅰ和Ⅱ均属于糖基水解酶家族11,N末端前19个氨基酸均为信号肽。内切木聚糖酶Ⅰ分子量为24.13kD,等电点为7.87,含有3个糖基化位点;内切木聚糖酶Ⅱ分子量为24.44kD,等电点为4.86,含有1个糖基化位点;β-木糖苷酶属于糖基水解酶家族3,分子量为87.27kD,等电点为5.49,N末端前20个氨基酸为信号肽,含有8个糖基化位点。利用SWISS-Model对木聚糖酶,木糖苷酶蛋白质三级结构进行了预测和模拟。对木聚糖酶和木糖苷酶基因及其编码蛋白质的生物信息学分析,为进一步研究这些基因的表达与调控、构建高效利用纤维素组份的工程菌株奠定基础。    

11.  黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质  
   陈红歌 朱静 梁改芹 严自正 贾新成 张树政《菌物学报》,2000年第19卷第1期
   由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉149发酵液中存在两型木聚糖酶,依次为X-Ⅰ和X-Ⅱ.通过硫酸铵分级沉淀及DEAE-SephadexA50柱层析分别将X-Ⅰ、X-Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由SDS一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得X-Ⅰ和X-Ⅱ的分子量分别为37kDa,76kDa,24kDa和23kDa,X-Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为276%和7.3%。X-Ⅰ和X-Ⅱ最适反应温度分别为50℃和55℃,pH为46和5.2。在pH4.6~9.2和pH4.0~10.0之间X-Ⅰ、X-Ⅱ活力稳定。50℃保温24h,X-Ⅰ活力仍为100%,而X-Ⅱ的活力已降为2.8%。HgCl和AgNO显著抑制X-Ⅰ、X-Ⅱ的活力。X-Ⅰ与X-Ⅱ水解不同来源的木聚糖,其产物有所不同。    

12.  棘孢曲霉SM-L22木聚糖酶系主要组分的纯化与性质  被引次数:2
   陈冠军  王娜  迟菲  刘稳《微生物学报》,2004年第44卷第3期
   经超滤浓缩、分子筛色谱、阴离子和阳离子交换层析 ,由棘孢曲霉发酵液最终分离得到 4个电泳纯的木聚糖酶主要组分Xy 1、Xy 2、Xy 3和Xy 4。通过SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测得各组分的分子量分别是 92 1 3、32 4 0、4 2 4 0和 2 7 0 3kD。实验证明这些酶组分均属于酸性木聚糖酶 ,Xy 1、Xy 2、Xy 3和Xy 4的最适反应pH分别为 5 0、4 0、4 6和 3~ 3 5。各酶组分在酸性条件下较稳定 ,碱性条件下酶活丧失较快。Xy 1及Xy 2的最适反应温度在75℃ ,在 5 0℃以下比较稳定 ;Xy 3及Xy 4最适反应温度为 5 5℃ ,在 4 0℃以下比较稳定。通过对各酶组分米氏常数的测定可知 ,Xy 1及Xy 2对底物桦木木聚糖的Km 值分别为 0 36 %和 0 2 6 % ,Xy 3及Xy 4的Km 值为 2 4 6 %和1 3 9%。 4种组分的Vmax 分别为 4 0 1 μmol min mg、8 81 μmol min mg、81 97μmol min mg、4 71 μmol min mg。Cu2 、Ag 对各组分都有较强的抑制作用 ,Mg2 、Ba2 、Ca2 能促进Xy 3的木聚糖酶活 ,Ca2 也可大幅度促进Xy 4的木聚糖酶活性。    

13.  嗜碱芽孢杆菌N16—5 β-甘露聚糖酶的纯化与性质  被引次数:2
   田新玉 徐毅 马廷和 周培瑾《微生物学报》,1993年第33卷第2期
   嗜碱芽孢杆菌(Bacillus sp.)NI 6—5产生的三种咆外碱性β-甘露聚糖酶(β-mannana-se)经硫酸铵沉淀、两次DEAE—Sephadex A-25离子交换住层析、羟基磷灰石吸附柱层析及制备PAGE等步骤,得到了凝胶电泳均一的样品。用SDS—PAGE测得纯化的β-甘露聚糖酶M-1、M-2和M-3的分子量分别为51000、38000阳34 700道尔顿。用PAGEIEF测得等电点p1分别为4.3、2.5和2.5。酶反应的最适pH为9.0(M-1)和10.0(M-2和M-3);三种酶的最适温度均为70℃;稳定pH为10.0左右(M-1和M-2)、8.0—10.0(M-3);M-1M-2和M-3的稳定温度分别为40、55和50℃。金属离子Ag+、Hg2+和Mn2+对三种酶均有抑制作用。Β-甘露聚糖酶M-1、M-2和M-3对魔芋葡萄甘露聚糖作用的K。分别为2.9、1.7和12.5mg/ml,Vmax值分别为2 7500、47500和15700mol.min-1·mg-1。Β-甘露聚糖酶M—1水解魔芋葡萄甘露聚糖产生单糖、双糖、三糖和四糖等低聚糖。    

14.  黑翅土白蚁纤维素酶纯化及其特性研究(英文)  
   杨天赐  莫建初  程家安《Entomologia Sinica》,2004年第1期
   利用DuoFlow层析系统阴离子交换柱UNOsphere Q,从黑翅土白蚁工蚁体内分离出内切葡聚糖酶。以羧甲基纤维素和水杨苷为底物,测得纯化酶的活性分别是原酶液的807.5和14.4倍。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得单一的蛋白条带,其分子量大小为80kDa。经双向电泳图谱分析,其等电点为6.4。    

15.  棘孢曲霉SML22木聚糖酶系主要组分的纯化与性  
   陈冠军 王娜 迟菲 刘稳《微生物学报》,2004年第44卷第3期
   经超滤浓缩、分子筛色谱、阴离子和阳离子交换层析,由棘孢曲霉发酵液最终分离得到4个电泳纯的木聚糖酶主要组分Xy-1、Xy-2、Xy-3和Xy-4。通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得各组分的分子量分别是92.13、32.40、42.40和27.03 kD。实验证明这些酶组分均属于酸性木聚糖酶,Xy-1、Xy-2、Xy-3和Xy-4的最适反应pH分别为5.0、4.0、4.6 和3~3.5。各酶组分在酸性条件下较稳定,碱性条件下酶活丧失较快。Xy-1及Xy-2的最适反应温度在75℃,在50℃以下比较稳定;Xy-3及Xy-4最适反应温度为55℃,在40℃以下比较稳定。通过对各酶组分米氏常数的测定可知,Xy-1及Xy-2对底物桦木木聚糖的Km值分别为0.36%和0.26%,Xy-3及Xy-4的Km值为2.46%和13.9%。4种组分的Vmax分别为4.01μmol/min/mg、8.81μmol/min/mg、81.97μmol/min/mg、4.71μmol/min/mg。Cu2+、Ag+对各组分都有较强的抑制作用, Mg2+、Ba2+、Ca2+能促进Xy-3的木聚糖酶活,Ca2+也可大幅度促进Xy-4的木聚糖酶活性。    

16.  黑曲霉纤维素酶系中β-葡聚糖纤维二糖水解酶的提纯和性质  
   王沁  赵学慧《天然产物研究与开发》,1992年第3期
   通过硫酸铵分段,Sephadex G-100凝胶过滤及DEAE-SephadexA-25(A-50)离子交换柱层析等提纯步骤,从黑曲霉(Aspergillus niger)培养液中分离到β-葡聚糖纤维二糖水解酶的两个组分(Ⅰ-3a,Ⅰ-3b),经凝胶电泳鉴定均为单一带,Ⅰ-3a和Ⅰ-3b的最适pH分别为4.0及4.5,最适温度50℃及45℃,在pH2.0—8.0之间稳定,保温1h时的半失活温度t 1/2分别为52℃及48℃。SDS-凝胶电泳法测得Ⅰ-3a和Ⅰ-3b的分子量分别为57000及55000;聚丙稀酰胺凝胶等电聚焦法测得二者的等电点分别为3.2和3.0。在所测定的化学试剂中,Ag~+、Hg~(2+)和Cu~(2+)对该酶均有较强的抑制作用。    

17.  黑曲霉A3木聚糖酶固体发酵研究  被引次数:21
   蔡敬民 吴克《工业微生物》,1997年第27卷第2期
   筛选了一株高产木聚糖酶的黑曲霉A3菌株,研究了其在固体培养基中的发酵条件。该菌最适培养条件为:起始pH4.6。28℃,1ml孢子悬液接种量,蔗渣粉:麸皮为1.5:1,发酵3天,木聚糖酶活力可达5147IU/g培养基干重。氮源组成,温度、pH及发酵时间对曲中木聚糖酶和纤维素酶的比例有较大影响。与液体发酵相比,粗酶的最适反应温度均为55℃,最适反应pH值分别为4.6和4.2,在不同温度下保温1h,测得    

18.  黑曲霉X-1产木聚糖酶液体发酵工艺研究  被引次数:1
   黄林  钟敏  涂晓勇  肖四生  涂国全《生物技术》,2008年第18卷第6期
   目的:提高黑曲霉X-1菌株液体发酵木聚糖酶的产量.方法:采用单因素和正交试验对黑曲霉X-1菌株产木聚糖酶液体发酵培养基和培养条件进行了优化.结果:通过正交试验找出最大影响因素为玉米芯和葡萄糖的供应,优化后的最佳培养基和培养条件为:玉米芯粉3%,葡萄糖0.5%,蛋白胨1%,KH2PO4 0.5%,MgSO4·7HO 0.1%,Tween-80 0.‰,pH 6.5,30℃、200r/min摇瓶培养120h.结论:黑曲霉X-1菌株在优化后的培养基和培养条件下,木聚糖酶活力高达1 630.78U,比优化前木聚糖酶活力(724.63U)提高了125.05%.    

19.  Armillariella tabescens EJLY2098β-甘露聚糖酶的诱导、纯化及酶学性质分析  被引次数:2
   姚冬生 黄小葵 刘大岭 谢春芳 胡熔《中国生物工程杂志》,2006年第26卷第7期
   Armillariella tabescens EJLY2098经魔芋精粉诱导,可产β-甘露聚糖酶,再用正交实验优化诱导培养基,结果在培养基为魔芋精粉2%、蛋白胨1%、土豆汁25%、KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、维生素B1 0.01%时可诱导出较高活性的酶。用DEAE-阴离子交换色谱从培养上清分离纯化β-甘露聚糖酶,出现2个活性组份。 活性组份P2 的SDS-PAGE分析,发现为电泳纯的一条带,分子量约78.9kD。 HPTLC分析, P2为内切β-甘露聚糖酶;酶反应的最适温度为60℃,最适pH 为4.0~6.0。保温30min的半失活温度t1/2为63℃,在pH 4.5~6.0之间稳定性较好。Na+和Ba2+对其有激活作用,等电点pI约为4.0~4.1。本研究获得了一株产β-甘露聚糖酶的新菌种,为进一步用基因工程方法克隆并构建具有完整自主知识产权的重组β-甘露聚糖酶基因工程菌提供了一个重要的基础工作。    

20.  海枣曲霉β-半乳糖苷酶的提纯与性质  
   曾宇成  程秀兰  张树政《中国生物化学与分子生物学报》,1987年第3卷第6期
    通过过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双相分离、Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、羟基磷灰石层析及SephadexG-100凝胶过滤等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)麦麸培养物抽提液中提纯得到凝胶电泳均一的β-半乳糖苷酶。该酶的最适pH为3.5—4.0,最适温度为60℃(反应15分钟),在pH5.0—8.5之间及60℃以下稳定。在65℃和70℃保温时失活50%的时间分别为27和2分钟。用SDS凝胶电泳法和梯度凝胶电泳法分别测得该酶的分子量为115,000和118,000。薄层凝胶等电聚焦法测得其等电点为pH4.6。    

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