微生物方法生产麻黄碱和伪麻黄碱的研究

麻黄碱和伪麻黄碱是药用植物麻黄的主要生物碱类次生代谢产物,具有重要的药用价值.中国是世界上惟一通过天然植物提取麻黄碱的国家,该文简述了近年来利用微生物半转化、微生物直接转化和重组微生物制备麻黄碱的研究进展,对各自存在的问题进行了讨论,展望了微生物在麻黄碱和伪麻黄碱生物合成中的应用前景.     

麻黄资源的利用与研究开发进展

本文介绍了麻黄资源的现状、麻黄碱的特性以及代谢途径 ,评述了有机合成、植物提取、组织培养以及微生物发酵半合成等生产麻黄碱方法及存在的问题 ,详细讨论了近年来麻黄组织培养的进展及其影响因素。强调生物技术应是解决麻黄碱生产中资源枯竭和保护环境的有效手段。     

麻黄碱对支气管平滑肌细胞增殖的影响

在前人工作的基础上,采用一种更简省的方法分离培养支气管平滑肌细胞;并且利用显微镜观察和MTT的方法,研究了麻黄碱对支气管平滑肌细胞形态和增殖的影响.结果表明:麻黄碱对支气管平滑肌细胞的形态没有明显影响,但是对平滑肌细胞的增殖有一定的抑制作用,并进一步阐述了麻黄碱治疗哮喘等呼吸系统疾病的作用机理.     

麻黄资源的利用与研究开发进展

本文介绍了麻黄资源的现状、麻黄碱的特性以及代谢途径,评述了有机合成、植 物提取、组织培养以及微生物发酵半合成等生产麻黄碱方法及存在的问题,详细讨论了近年来麻黄组织培养的进展及其影响因素。强调生物技术应是解决麻黄碱生产中资源枯竭和保护环境的有效手段。     

重组酵母菌生物合成麻黄碱的特性及L-Phe对其合成的影响

目的：探讨12株重组酵母菌生物合成麻黄碱的特性及L-Phe对麻黄碱生物合成的影响。方法：以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源对重组酵母菌进行培养,在相同条件下,在液体培养基中添加5mg/L的L-Phe,利用反向高压液相色谱（RP-HPLC）测定重组酵母菌培养液中麻黄碱和伪麻黄碱的含量。结果：重组酵母菌培养液中麻黄碱和伪麻黄碱的最高产量分别为18.85mg/L和4.11mg/L;L-Phe对各重组菌株生物合成麻黄碱的调控作用各不相同。结论：通过L-Phe对重组酵母菌生物合成麻黄碱和伪麻黄碱调控作用的探讨,将为研究重组菌株的遗传多样性提供依据。     

超高效液相色谱法测定麻黄中l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)测定麻黄中l-麻黄碱和d-伪麻黄碱含量的方法,为麻黄药材质量评价提供依据。方法:UPLC测定麻黄碱色谱柱为Waters Acquity BEH-C_(18)(2.1 mm×50 mm, 1.7μm);检测波长:214 nm;流动相为0.15%氨水水溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱(0.0～4.0 min,5%B→55%B;4.0～4.1 min,55%B→95%B;4.1～4.7 min,95%B;4.7～4.8 min,95%B→5%B;4.8～5.0 min,5%B),流速:0.7mL/min;柱温:25℃。结果:l-麻黄碱和d-伪麻黄碱分别在12.50～500.00μg/mL和10.50～420.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数均为0.9999,UPLC方法测定l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的回收率分别为101.99%和98.68%。应用UPLC方法测定麻黄药材中的l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的含量,麻黄药材两者含量分别为0.80%和0.18%。结论:与常规HPLC测定l-麻黄碱和d-伪麻黄碱含量方法比较,本文所用方法测定结果更加准确、全面、且重复性好,能够快速测定麻黄药材中的l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的实际含量;并且对麻黄碱及相关物质的测定有一定的指导意义。     

麻黄草中麻黄碱提取的工艺学研究

通过正我设计考察渗漉前的浸泡时间、温度、漉速和渗漉液用量麻黄草渗漉提取麻黄碱的影响,优化了渗漉条件;麻黄草中麻黄碱的鉴定及含量测定采用高效液相色谱（HPLC）分析技术。结果表明,在影响渗漉效果的4因素中,温度的影响远远大于其它3因素的影响,浸泡时间的影响最小,HPLC技术可以鉴定并定量麻黄草的乙醇渗漉液中麻黄碱,用乙醇对麻黄草进行浸泡和渗漉可以得到麻黄碱,其含量高于普通的索氏提取法,最好的渗漉条件是浸泡2d、漉速ml.min^－1、渗漉用液量130ml、温度40℃。     

旋光法测定盐酸麻黄碱滴鼻液的含量

盐酸麻黄碱为肾上腺受体激动药,有收缩血管的作用,盐酸麻黄碱滴鼻液在临床上广泛应用。它的含量测定方法有中和滴定法、紫外分光光度法。根据盐酸麻黄碱有旋光性的特点,本文试用旋光法测定盐酸麻黄碱滴鼻液的含量,结果满意。     

麻黃碱快速耐受性形成机制的探討

本文对于猫瞬膜,猫及大鼠血压对麻黄碱的快速耐受性进行了系統研究。在猫对麻黄碱快速耐受性产生过程中发现:(1) 麻黄碱对瞬膜的积累作用(机率)与积累剂量(对数)呈直线关系,(2) 瞬膜对电刺激交成神经的反应减弱,(3) 血压及瞬膜对静脉注射去甲腎上腺素的反应增加。与其他实驗动物相似,大鼠連续注射麻黄碱8毫克/公斤,其升压作用也易于产生快速耐受性。大鼠血压对麻黄碱产生快速耐受性后,酪胺的剂量反应曲线被压低,但去甲腎上腺素的曲线并无显著改变。猫预先注射利血平后,其瞬膜对麻黄碱的剂量反应曲线中部(2.5毫克/公斤)被压低。在猫和大鼠的剂量-升压反应曲线中,最大也卽最后一剂麻黄碱(猫:12.5毫克/公斤;大鼠:8毫克/公斤)的反应由于快速耐受性而有所降低;但用利血平后可使这个反应较对照組显著升高。大鼠预先用不同剂量利血平后,麻黄碱快速耐受性的产生趋于延緩;并且第一剂麻黄碱的升压作用,特别是在注射利血平5毫克/公斤,3—4小时后,有增强现象。切除腎上腺对上述結果似无影响。预先灌注去甲腎上腺素也可增强第一剂麻黄碱的升压作用,但与利血平化不同,对多数大鼠,反可促进快速耐受性的产生。大鼠产生快速耐受性后,灌注去甲腎上腺素可部分地恢复麻黄碱的升压作用。预先静脉注射可卡因2.5毫克/公斤可压低麻黄碱的剂量反应曲线。以上一系列实验資料提示麻黄碱快速耐受性的形成由于两种重要因素:(1) 麻黄碱直接作用的快速耐受性是由于受体的饱和,(2) 麻黄碱间接作用的快速耐受性是由于介质的耗竭。     

脱氧麻黄碱与心脏损害的关系

一项大鼠的研究表明,运用药物脱氧麻黄碱会使体内释放的免疫蛋白的排列发生剧烈的改变.该发现可解释长期以来滥用脱氧麻黄碱者为何会引起某些心脏疾病.脱氧麻黄碱是一种不昂贵的药品,可在家庭实验室中非法制造,为可导致大脑损伤的强烈兴奋剂.脱氧麻黄碱的应用可导致特别的心搏和高血压,可能因慢性疲劳和心脏损害所引起.此外,脱氧麻黄碱可以引起心脏动脉的炎症.在较早期的研究中,研究者已发现脱氧麻黄碱利用葡萄糖作为胶粘物使脱氧麻黄碱与蛋白质相结合,结果产生了糖化蛋白质.当科学家将脱氧麻黄碱 糖化蛋白质注射入啮齿类中时,啮齿类便如同对付外来物一样,制造抗体来对抗该异常蛋白.研究者提出假说认为,这种免疫反应是破坏性炎症反应的一部分,当糖化蛋白质在血管中形成沉积时便开启这种反应.在新研究中,科学家分析了大鼠的这种免疫反应过程,这些大鼠在3个月期间,能多次自我给药脱氧麻黄素.研究者将几条静脉用外科手术移植到27个实验大鼠背上去.每当大鼠钦压笼子里杠杆时,该静脉条便释放小剂量脱氧麻黄碱或无效物质到大鼠的循环系统中去.某些大鼠1天有6小时可给药,其它的大鼠1天有1小时可给药,对照组大鼠则接受安慰剂.大鼠在给药后立即感觉兴奋,6小时给药的大鼠频繁地钦压杠杆,这些大鼠形成对抗糖化蛋白质的抗体是不给药的大鼠的5倍.研究者在即将出版的Proceeding of the National Academy of Science上作了报道.给药脱氧麻黄素较少的大鼠形成抗体的量要比给药较多的大鼠少一半.1天给药6小时的大鼠血液中炎症蛋白质的浓度高于其它两组大鼠.糖化蛋白质沿血管壁与细胞相结合,然后抗体与它们相结合.这种结合将吸引大量炎性免疫细胞,其在正常情况下受到病原体的攻击.在这种情况下,炎性免疫细胞攻击自身的血管,这是一种慢性损害方式.先前的研究提示,在脱氧麻黄碱和异常免疫性之间存在某种联系,这就对构成慢性脱氧麻黄碱疾病可能机制的基础有了更为完全的了解.别的研究者完成的工作提示,脱氧麻黄碱损害心脏是由于削弱了胶原蛋白,胶原蛋白形成心脏的部分结构.而新研究提出了另一种解释.应该承认这两种理论都证明是确有根据的.