植物RAPD标记的可靠性研究

随着ＲＡＰＤ技术应用范围越来越广,ＲＡＰＤ的优缺点也不断反映出来。相左实验结果的出现,对ＲＡＰＤ标记可靠性提出了置疑。本文从重复性、序列同源性和系统学价值三个方面,就ＲＡＰＤ标记的可靠性研究的现状进行了综述。并就怎样提高ＲＡＰＤ标记的可靠性进行了探讨     

利用RAPD技术进行植物性状标记及辅助选择

近等基因系、混合分离群体法是ＲＡＰＤ 标记的主要策略。目前,ＲＡＰＤ标记广泛用于抗线虫、抗病、雄性不育等辅助选择的研究中,取得了可喜的成绩。由于遗传距离的不同,使ＲＡＰＤ 标记具有基因型的差异。寻找无重组的ＲＡＰＤ 标记或将ＲＡＰＤ标记转化为ＲＦＬＰ标记,可以解决这一问题。随着连锁程度的降低选择效率也随着降低。相斥相的ＲＡＰＤ标注可提高选择效率将ＲＡＰＤ标记转化为ＳＣＡＲｓ、ＡＰＳＰｓ 标记,可以解决ＲＡＰＤ 标记稳定性差的问题。来源于ＲＡＰＤ 标记的ＳＣＡＲｓ 标记将在辅助选择中发挥巨大的作用。     

随机扩增多态性DNA技术在林业中的应用

１ＲＡＰＤ的原理随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）系１９９０年由美国科学家采用ＰＣＲ技术发展起来的。在发现ＲＡＰＤ多态性的同时,也证明了ＲＡＰＤ标记的分离符合孟德尔独立分配规律,从而确立了ＲＡ...     

种质资源鉴定的一种分子遗传技术标准：随机扩增多态性DNA（RAPD）

ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）变异越来越多地被用于种质样品的鉴定。由于在某些条件下,ＲＡＰＤ结果重性较差,限制这一技术的应用。本文综合了一些文献中引起片段变异的主要原因,分析了减少这些不需要变异的方法。由此提出了一个含有全部描述符的项目表,它包括ＲＡＰＤ必不可少的条件和再现植物材料ＲＡＰＤ结构的必须核对的程序。此标准程序和描述形式有促进类似材料在不同实验室所做结果进行比较,而且允许ＲＡＰＤ结果作     

丹顶鹤与白枕鹤的领域比较研究

丹顶鹤与白枕鹤的领域比较研究ＡＣＯＭＰＡＲＡＴＩＶＥＳＴＵＤＹＯＮＴＥＲＲＩＴＯＲＩＥＳＯＦＷＨＩＴＥＮＡＰＥＤＣＲＡＮＥＡＮＤＲＥＤＣＯＲＯＷＮＥＤＣＲＡＮＥ关键词丹顶鹤白枕鹤领域ＫｅｙｗｏｒｄｓＲｅｄｃｒｏｗｎｅｄｃｒａｎｅ,Ｗｈｉｔｅｎ...     

RAPD技术在水稻上的应用

ＲＡＰＤ技术在水稻上的应用李文海（浙江农业大学核农所,杭州３１００２９）１ＲＡＰＤ的原理及特点ＲＡＰＤ是随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）的简写,系１９９０年由美国科学家Ｗｉｌｉａｍｓ和Ｗｅｌｓｈ几乎...     

一种供RAPD分析用蜘蛛模板DNA的快速提取方法

简要介绍了一种高效、快速提取蜘蛛模板 Ｄ Ｎ Ａ 供 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 分析的方法⒚该方法具有快速简便、重复性好的优点,提取的 Ｄ Ｎ Ａ 无污染物产生,完全能满足 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 研究的需要⒚     

几种因素对山茶属植物RAPD分析的DNA扩增的影响

多种因素会影响ＲＡＰＤ扩增,本研究试验了引物、Ｍｇ２＋和ｄＮＴＰ的浓度以及Ｔａｑ酶来源对山茶属植物进行ＲＡＰＤ分析的ＤＮＡ扩增的影响。结果表明这些因素对扩增结果都会产生影响,通过比较分析,得到了一个对于山茶属植物进行ＲＡＰＤ分析较理想的扩增条件。     

鱼类胃肠胰内分泌系统APUD细胞研究的现状

鱼类胃肠胰内分泌系统ＡＰＵＤ细胞研究的现状潘黔生,方之平（华中农业大学水产学院,武汉４３００７０）关键词鱼类,胃肠胰内分泌系统,ＡＰＵＤ细胞ＰＲＥＳＥＮＴＰＲＯＧＲＥＳＳＩＮＴＨＥＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＡＰＵＤＣＥＬＬＳＩＮＧＡＳＴＲＯ－ＥＮＴＥＲＯ－...     

大鼠RAPD标记的观察

采用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,分析ＳＤ和Ｗｉｓｔａｒ二种大鼠的基因多态性,探讨用ＲＡＰＤ标记鉴别二种大鼠及其血标本实验中的认证,结果表明,二种大鼠表现出了各自不同的多态性ＲＡＰＤ标记,作为大鼠的分子标记,可在基因水平区别二种大鼠,故认为是一种大鼠研究的分子依据。     

扩增条件对茶类植物RAPD带的影响

采用梯度分析的方法试验了模板ＤＮＡ、引物、镁离子、ｄＮＴＰ和Ｔａｑ酶的浓度对茶类植物进行ＲＡＰＤ分析中ＤＮＡ扩增结果的影响。实验表明这些条件的变化对扩增出来的ＲＡＰＤ带的数目和强弱会产生影响。经过比较分析,筛选出对于茶类植物进行ＲＡＰＤ分析较理想的扩增条件：２．０ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２,２００ｕｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ,１５ｎｇ引物／２０ｕｌ反应体积,４ｎｇ模板ＤＮＡ／ｕｌ反应体积,１ＵＴａｑ酶／２０ｕｌ反应体积。     

芥菜16个变种的RAPD研究

利用ＲＡＰＤ技术对芥菜（ＢｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａＣｏｓ．）１６个变种的遗传变异进行研究。从６０个随机引物中筛选出２７个有效引物,共扩增出３３６条ＤＮＡ带,其中２７５条为多态性带,占８１８５％,平均每个引物扩增的ＤＮＡ带数为１２４４条。利用１９个有效引物扩增的２４０条ＤＮＡ带对芥菜１６个变种间的亲缘关系进行ＵＰＧＡ聚类分析,计算出１６个变种间的平均遗传距离为７３４,在此基础上建立了中国菜用芥菜１６个变种的ＤＮＡ分子系统树图。该系统将芥菜的１６个变种划归Ａ、Ｂ、Ｃ三个组,其中Ａ组７个变种,Ｂ组８个变种,Ｃ组只有１个变种,Ｂ组又可细分为两个亚组。对芥菜遗传多样性的分子基础进行了探讨。     

10个品系小鼠的RAPD 分析

小鼠是应用最为广泛的实验动物,预先了解品系或近交系的遗传纯度或系间遗传距离,对于试验材料的选取和实验结果分析都有很大帮助.传统的实验动物遗传监测多限于基因表型的检测,检测位点在整个基因组中所占比例小,分布不均.由于RAPD方法的优势,用一系列引物可检测出覆盖整个基因组的遗传改变,在动、植物品系鉴定和遗传监测方面已取得大量成果(陈洪等,1994;沈曦等,1999),但对多品系小鼠的研究报道较少.因此,本研究选用10个常用小鼠品系,筛选较好的多态标记,建立各品系的RAPD图谱,以区分不同品系的小鼠,为今后的质量监测工作提供参照标准;同时根据RAPD扩增结果计算出各品系间的相对遗传距离,在DNA水平探讨不同品系小鼠间的亲缘关系.     

仙客来(Cyclamen persicum Mill.)的种质资源RAPD分析

利用RAPD技术对20个现今栽培的名优仙客来品种的分类和亲缘关系进行研究,从100个随机引物中筛选出18个用于PCR反应,共在153个位点上扩增出条带,平均每个引物扩增位点8．5个,多态性位点144个,占总带数的94．1％,这种多肽性可以进行品种的鉴定,聚类分析将各品种材料分为4个类群,提出仙客来除目前的观察性状分类以外,还应具有更科学的以遗传基础为基准的分类方法,也从分子水平揭示了目前栽培的仙客来品种的遗传基础的狭窄性,对RAPD技术在仙客来育种的进一步应用也作了相应的探讨。     

野生稻基因组随机扩增多态性DNA(RAPD)分析

用18个随机引物对2份栽培稻、12份包含有六个基因组型的野生稻DNA进行了扩增,共获得147个多态性DNA片断,把这些多态性DNA片断作为遗传位点用UPGMA法计算出各材料间的遗传相似性系数,并作了聚类分析．主要结果如下：1普通野生稻同栽培稻的亲缘关系很近,其中江永普通野生稻更接近于粳稻．2．CCDD组的Oryzalatifolia和EE组的O．australiensis遗传多态性相似。3．B、C、D、E组的遗传多态性相似,组成一个复合体,此复合体与A组的遗传多态性也相似,而F组则相距较远．4．O．mcyeriana和Rhynchofyzasabulata尚未确定组型,RAPD测定结果表明,前者与其它组型的种亲缘关系较远,后者则与AC复合体的种较近．     

RAPD分析快速鉴定双歧杆菌

本文应用ＲＡＰＤ技术,选用１１种引物,以嗜酸乳杆菌为对照,对６种１３珠双歧杆菌菌株基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,分析其ＤＮＡ指纹图谱,并计算其相似性指数。结果表明,双歧杆菌和非双歧杆菌之间,其相似性指数有显著差异;选择合适的引物进行扩增,双歧杆菌不同种间和同种不同株间可表现不同的ＤＮＡ指纹图谱。本文还对ＲＡＰＤ技术应用于双歧杆菌分类鉴定的可能性进行讨论。     

部分小檗科植物的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析了部分小檗科（Berberidaceae）5个属6种植物：猫儿刺（Berberis julianae Schneid.）,日本绿叶小檗（Berberis thunbergii DC.）,阔叶大功劳（Mahonia bealei (Fort.)Carr.),南天竹（Nandina domestica Thunb.）,淫羊藿（Epimedium sagittatum (S.etZ.)Maxim.）和八角莲（Dysosma versipellis (Hance)M.Cheng.）。经筛选Sangon公司的60个引物,其中29个引物的谱带清晰呈多态性。采用UPGMA法对求出的遗传距离进行聚类分析,结果显示：在小檗科内建立十大功劳属（Mahonia）和南天竹属（Nandina）是合理的。     

RAPD标记构建水稻分子连锁图

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）,在一个水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）的双单倍体（ＤＨ）群体中发展分子标记,仅用５２ 个ＲＡＰＤ标记建成了一个水稻ＲＡＰＤ分子连锁图。该图覆盖基因组的总长度为８９８．４ ｃＭ （ｃｅｎｔｉｍ ｏｒｇａｎ）,标记间的平均间距为１７．３ ｃＭ,它能与用同一群体构成的ＲＦＬＰ图谱互相补充     

东北地区大豆种质资源的RAPD聚类分析

对东北地区不同类型大豆共３２份材料进行了ＲＡＰＤ分析,并应用ＰＳＢＡＰＣ２软件按照最远法构建了聚类图。结果表明,东北不同地区的栽培大豆各以较近的关系聚在一起,基本反映了大豆品种生态类型的地理分布。野生种和半野生种大豆可以聚为一类,但二者与栽培大豆明显分开,故初步认为与野生种的亲缘关系较近,或应归类到野生种中。     

辣椒疫霉产毒共分离RAPD标记的研究

辣椒疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｃｏｐｓｉｃｉ）毒素的产生是由一个不完全显性基因所控制,通过ＲＡＰＤ／ＢＳＡ分析证明,用ＯＰＷ１２扩增得到一条约１３００ｂｐ的ＲＡＰＤ标记带,该带与辣椒疫霉产毒共分离。纯化回收ＯＰＷ１２　１３００ＤＮＡ,共转化感受态Ｅ．ｃｏｌｉ　ＤＨ５ａ,筛选出３个白色阳性克隆,序列分析发现该标记ＤＮＡ为１２９１ｂｐ。这一标记ＤＮＡ序列的阐明为进一分析产毒遗传机理提供了新的信息。