毛白杨悬浮细胞系的建立及再生植株的获得

以毛白杨基因型TC152无菌苗为材料,研究毛白杨悬浮细胞系建立与植株再生,结果表明,通过悬浮培养和固体培养两种方法诱导毛白杨悬浮细胞分化不定芽,最终获得无菌生根苗。愈伤组织在MS＋1.5mg·L-12,4-D＋30g·L-1蔗糖的液体培养基中振荡培养,12d可建立悬浮细胞系;悬浮细胞系继代培养基为MS＋0.8mg·L-12,4-D＋30g·L-1蔗糖,继代周期为7d,悬浮细胞在MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.1mg·L-1NAA＋0.5～1.0mg·L-1ZT＋30g·L-1蔗糖培养基中悬浮培养,可分化大量不定芽,每个培养瓶中可得到40～50个芽,个别不定芽玻璃化;不定芽在1/2MS＋0.6mg·L-1IBA＋20g·L-1蔗糖＋5.5g·L-1琼脂培养基上可分化不定根。悬浮细胞通过固体平板培养增殖为愈伤组织块后,在MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.1mg·L-1NAA＋1.0mg·L-1ZT＋30g·L-1蔗糖＋5g·L-1琼脂的固体培养基上,不定芽分化率可达到70.00%。     

马尾松幼胚体细胞胚胎发生研究

本论文首次报道了马尾松（Pinus massoniana Lamb.）幼胚体细胞胚胎发生的完整发育过程,并对影响马尾松胚性愈伤组织诱导的因素如球果采种期、球果冷藏处理时间、外植体处理方式等进行了探讨,统计胚性愈伤组织诱导率,进行增殖评价,探讨ABA浓度梯度对马尾松体细胞胚分化成熟的影响,试验数据用SPSS16统计分析软件进行方差分析、差异显著性检验。结果表明：1）2008~2009连续2年内15个采种期得到的幼胚,胚性愈伤组织诱导和增殖有显著性差异,最适宜的马尾松球果采种期是6月下旬至7月下旬,诱导率在9.66%~22.59%之间;2）球果冷藏处理时间,对胚性愈伤组织诱导有显著性差异,其中4℃冷藏球果15d有利于幼胚胚性愈伤组织诱导;3）雌配子体包含幼胚的接种处理方式是可取的;4）胚性愈伤组织经稳定增殖培养后,转入分化成熟培养基,得到体细胞胚状体＂爆发式＂分化成熟,数量多,质量好。适宜体胚成熟转化的培养基为：成熟LP培养基添加ABA5.0mg·L-1＋60.0g·L-1蔗糖,并附加L-谷氨酰胺和水解酪蛋白;5）成熟体细胞胚在无激素萌发型LP培养基上正常萌发,并转化为结构完整的小植株。本研究首次建立了马尾松幼胚体细胞胚胎发生技术平台,为马尾松遗传改良种质创新、缩短育种周期奠定了研究基础。     

浙皖粗筒苣苔的组织培养和快速繁殖

1植物名称浙皖粗筒苣苔（Briggsia chienii Chun）。2材料类别种子及无菌苗叶片。3培养条件MS为基本培养基。诱导种子发芽培养基：（1）MS＋6-BA 1.0 mg·L-（-1）（单位下同）＋NAA 0.5;诱导叶片分化培养基：（2）MS＋6-BA 2.0＋NAA 0.5;增殖继代培养基：同（1）;壮苗培养基：（3）MS＋6-BA0.1＋NAA 0.05;生根培养基：（4）1/2MS＋0.1%活性炭。以上培养基均含30 g·L-（-1）蔗糖和7.0 g·L-（-1）琼脂,pH 5.8。培养温度为（25±2）℃;     

文冠果的体细胞胚胎发生

文冠果种子在MS 6-BA 1.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 1.0 mg·L-1 3%蔗糖的固体培养基上暗培养,形成愈伤组织,愈伤组织在B5 6-BA0.5mg·L-1 NAA0.5mg·L-1 2%蔗糖的培养基中弱光悬浮培养形成体细胞胚.在蔗糖为1%时,子叶状胚萌发形成完整小植株.细胞学观察表明,文冠果体细胞胚源于胚性愈伤组织的外层细胞,此区域细胞富含淀粉粒.     

辽东栎的组织培养和植株再生

1植物名称辽东栎（Quercus liaotungensis Koidz.）。2材料类别成熟合子胚。3培养条件以MS为基本培养基。（1）不定芽诱导培养基：MS＋6-BA 1.0 mg·L-（-1）（单位下同）＋2,4-D 0.5;（2）不定芽增殖培养基：MS＋6-BA 1.0＋NAA 0.5＋GA_30.5;（3）生根培养基：1/2MS＋NAA 0.5。以上培养基均加入30 g·L-（-1）蔗糖和6.5 g·L-（-1）琼脂,pH 5.8。培养温度为（25±2）℃,光照强度为40～50μmol·m-（-2）·s-（-1）,光照时间为16 h·d-（-1）。     

亚麻胚性细胞悬浮培养体系的建立和影响因素

亚麻品种‘双亚五号’的胚性愈伤组织诱导最佳培养基为MB（MS无机盐加B5维生素）＋1.0mg·L^-12,4-D;细胞初始悬浮培养的最佳培养基为MB＋0.2mg·L-16-BA;细胞继代悬浮培养的最佳培养基为改良的MB（NH4NO3减半,KNO3加倍）＋0.02mg·L^-12,4-D＋0.2mg·L^-16-BA;适宜的蔗糖量为50g·L^-1;适宜的继代接种量为1.0～1.5g·（25mL）^-1;继代间隔为5～7d。     

鹿角苔的组织培养

1植物名称鹿角苔（Riccia Fluitans L.）。 2材料类别 叶状体。 3培养条件（1）启动培养基：1/2MS＋10g·L-1蔗糖＋2g·L-1活性炭＋3g·L-1琼脂粉;（2）生长培养基：1/2MS＋BA0.1mg·L-1（单位下同）＋NAA0.1＋40g·L-1土豆泥＋30g·L-1蔗糖＋1g·L-1活性炭＋3g·L-1琼脂粉;     

马尾松胚乳愈伤组织发生的初步研究

为获取马尾松(Pinus massoniana)单倍体材料，建立其胚乳组织培养体系，对马尾松胚乳不同的消毒方法进行筛选，并分析不同基本培养基、生长调节剂配比和热激处理对愈伤诱导的影响。结果表明，胚乳的最佳消毒方式为75%酒精处理30 s+2% NaClO消毒15 min，外植体污染率为0，死亡率仅为15.56%；生长素可促进愈伤诱导且是必需的；细胞分裂素浸泡种子可代替培养基中的细胞分裂素，并能取得比较好的胚乳愈伤诱导效果，1.0 mg·mL-1 6-BA浸泡30 min处理的效果最佳，在培养基WPM+NAA 2.0 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1中，愈伤诱导率高达87.78%；培养基DCR+NAA 2.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1的胚乳愈伤诱导率最高(68.75%)；热激处理可提高胚乳愈伤的诱导率和质量，以相对湿度85%下45 ℃热激10 min最佳，总愈伤诱导率为66.25%，成团愈伤诱导率达8.75%；增殖培养以培养基WPM+NAA 0.1 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1最佳，增殖率达83.33%。     

闽赣长蒴苣苔的组织培养和快速繁殖

1植物名称闽赣长蒴苣苔（Didymocarpus heucherifoliusHand.-Mazz.）。2材料类别幼叶。3培养条件MS为基本培养基。诱导不定芽分化培养基：（1）MS＋6-BA0.1 mg·L-（-1）（单位下同）＋NAA0.1;（2）MS＋6-BA 1.0＋NAA 0.5;（3）MS＋6-BA 2.0＋NAA0.5。增殖继代培养基：（2）;（3）;（4）MS＋6-BA 2.0＋NAA 1.0;（5）MS＋6-BA 0.05＋NAA 0.05。生根培养基：（6）1/2MS＋NAA 0.5;（7）1/2MS＋0.5%活性炭;（8）1/2MS＋0.1%活性炭。以上培养基均含30 g·L-（-1）蔗糖和7.0 g·L-（-1）琼脂,pH 5.8。培养温度为（25±2）℃,光照强度约为30μmol·m-（-2）·s-（-1）,光照时间为16h.d-（-1）。     

岩生报春的组织培养与快速繁殖

1植物名称岩生报春（Primula saxatilis Kom.）。2材料类别种子。3培养条件（1）种子萌发培养基：1/2MS;（2）无菌苗增殖培养基：MS;（3）丛生芽诱导和增殖培养基：MS＋6-BA 2.5 mg·L-（-1）（单位下同）＋NAA 1.0;（4）生根培养基：MS＋NAA 0.1。上述各培养基均添加7 g·L-（-1）琼脂和30 g·L-（-1）蔗糖,pH 5.8～6.0。培养温度为20～23℃,光照强度为20～25μmol·m-（-2）·s-（-1）,光照时间为14 h·d-（-1）。     

水杉愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导器官发生途径,建立了水杉（Metasequoia glyptostroboides）的植株再生体系,探讨了不同外植体（种胚、幼叶切块、茎段、根段）和植物生长调节剂对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响。结果表明：以种胚、无菌苗叶片、茎段和根作为外植体,在MS补加2,4-D、NAA和6-BA不同组合的培养基上都能诱导得到愈伤组织,其中种胚诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达100%,茎诱导效果次之,诱导率为97.1%。诱导愈伤组织效果较好的培养基有：MS＋1.0mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-16-BA、MS＋0.1mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA和MS＋0.5mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-1NAA。以愈伤组织在MS培养基上植株再生效果最好,再生率为62.5%。     

领春木体细胞胚胎发生及植株再生

以领春木（Eupteleapleiospermum Hook．f.etThoms．）种子幼胚为试验材料,对领春木体细胞胚胎发生进行了研究。结果表明：在附加1．0mg·L-1 2,4．D＋0．5mg·L-1 6-BA＋3％蔗糖＋0．8％琼脂的Ms培养基上可诱导出愈伤组织。愈伤组织在附加0．5mg·L-1 NAA＋0．5mg·L-1 6．BA的培养基上可形成体细胞胚;体胚在附加0．5mg·L-1 6-BA＋0．05mg·L-1 NAA＋0．1％PVP的1／2MS培养基上能大量增殖;将成熟体胚转移到不添加任何植物生长调节剂的MS培养基上,培养60d,形成正常植株。     

濒危植物佛手参种子的非共生萌发及种苗的快速繁殖

离体条件下对佛手参种子进行了非共生萌发研究,成功实现了种子萌发,并通过根状茎增殖和分化获得了大量再生种苗。结果表明,成熟佛手参种子难以萌发,而未成熟种子具有萌发能力,萌发率可达到20％,最适萌发培养基为：1／2MS＋1．0-2．0mg·L-1。KT＋0．1mg·L—NAA＋10．0mg·L-1腺嘌呤;根状茎增殖最适培养基为：1／2MS＋3．0mg·L。6-BA＋0．1mg·L-1 NAA＋10．0mg·L。腺嘌呤;芽分化最适培养基为：1／2MS＋I．0mg·L-1 KT＋10．0mg·L-1腺嘌呤。较高浓度的细胞分裂素（1．0mg·L。KT）与较低浓度类生长素（O．1mg·L-1 NAA）的配比对佛手参种子萌发、根状茎增殖及芽分化具有明显的促进作用;较高浓度的NAAA制种子萌发。根状茎与愈伤组织的增殖能力无明显差异,但前者的分化能力却显著高于后者。     

金线莲组织培养(简报)

以金线莲茎段为外植体进行离体快速繁殖体系研究。结果表明：芽诱导最佳培养基为1/2MS＋6-BA 1.5 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1;增殖培养基为1/2MS＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1＋香蕉100 g·L^-1;增殖系数达6～8倍;生根培养基为1/2MS＋IBA 1.0 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1＋活性炭0.2 g·L^-1,生根率可达95%。将生根苗移栽入滤水性好的细兰石与炭渣混合基质中,盖膜保湿。成活率可达90%。     

杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和快速繁殖

以‘玉女杂交兰’为材料,研究了培养时间、活性炭、切块大小和外源生长调节物质对类原球茎增殖和分化的影响。结果表明,培养时间、活性炭和切割处理对类原球茎增殖和分化影响显著,在培养基中添加活性炭或对类原球茎进行切割均能有效控制增殖过程中的芽分化。将类原球茎切成直径2~3 mm的小块接种到培养基MS＋1.0 mg.L-16-BA＋0.2 mg.L-1NAA＋0.3 g.L-1AC＋30 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,类原球茎增殖率为384.23%。将增殖后的类原球茎接种到培养基1/2MS＋1.5 mg.L-16-BA＋0.1 mg.L-1NAA＋20 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,芽分化率为463.06%。将分化的芽转入培养基1/2MS＋0.5 mg.L-1NAA＋0.5 g.L-1AC＋20 g.L-1蔗糖＋100 g.L-1土豆汁＋5.5 g.L-1琼脂中培养,生根率为100%,平均根分化数为2.80条.株-1。以泥炭土为基质,组培苗的移栽成活率可达97.78%。     

陇东地区野生紫花苜蓿植株再生体系的建立

以陇东地区野生紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,MS为基本培养基,研究划破种皮以及不同生长调节物质种类与配比对愈伤组织诱导和分化影响的结果表明：划破种皮可提高种子发芽率;在外植体中下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达92.2%;最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋2,4-D2.0mg·L^-1（单位下同）＋NAA1.0＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,最佳分化诱导培养基为MS＋KT0.5＋NAA0.3＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,成苗培养基为1/2MS＋NAA0.1＋1%蔗糖＋0.6%琼脂。     

Induction of somatic embryogenesis in loblolly pine (Pinus taeda L.)

Summary Several factors that may affect induction of somatic embryogenesis in loblolly pine (Pinus taeda L.) were investigated in 1994 and 1995. Megagametophytes containing immature zygotic embryos were excised from seeds as explants. Potassium chloride, silver nitrate, myo-inositol, coconut water, or polyamine was added to the control media (U.S. patent no. 5,036,007) to determine the effects of each single ingredient or their combinations on the initiation of embryogenic tissue. Supplements of myo-inositol at 22.2 mM resulted in increases in frequencies of cell mass extrusion and proliferation compared with the control media in consecutive years. Addition of silver nitrate showed the potential to promote initiation of embryogenic culture. The combination of 10 mM potassium with 29.4 μM silver nitrate achieved the highest frequencies in both extrusion and proliferation of embryogenic tissue. The combination of silver nitrate at 29.4 μM with addition of myo-inositol at 11.1 or 22.2 mM achieved a higher conversion rate from extrusion to proliferation. Polyamine did not significantly affect the induction of somatic embryogenesis, but coconut water was inhibitory. Published with approval of the Director of Arkansas Agricultural Experimental Station.     

百合体细胞胚胎发生和植株再生

以切花百合(Lilium)品种‘黄天霸’(‘Manissa’)花器官为外植体诱导体细胞胚胎发生与植株再生。结果表明,不同花器官、不同激素配比对愈伤组织形成均具有显著影响。花丝为最佳外植体,激素对愈伤组织诱导的影响效应为NAA>6-BA>2,4-D,最适培养基为MS+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-16-BA;激素诱导体细胞胚胎发生的影响效应为2,4-D>KT>6-BA,最佳培养基配方为MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1KT+1.0 mg.L-16-BA;MS培养基添加IBA可促进体细胞胚萌发成苗,体细胞胚芽成苗的最佳培养基为MS+0.2 mg.L-16-BA+1.0 mg.L-1IBA。