牛生长激素结构不均一性的研究

本文报导用常规方法分离纯化的牛生长激素,在还原性SDS-11％聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈分子量很接近的两条主带(22KD,21.5KD)。用单克隆抗体和多克隆抗体亲和层析技术分析了不同分子量形式的牛生长激素的转化,结果表明:牛生长激素可能在pH5.5条件下转化为21.5KD分子,在pH8.3条件下则转化18KD分子。这几种形式的牛生长激素均保留与抗体的结合力,但亲和力不尽相同,如在亲和层析的洗脱性质上存在差异。已检验分离并部分纯化了18KD分子以备作进一步的研究。     

垂体生长激素的化学

生长激素系脑垂体前叶嗜酸性细胞所分泌。动物截除垂体前叶之后,生长停止;注射垂体前叶抽提液则生长恢复;故其作用为促进各种组织的生长,而对于骨及软骨则有特殊的增生作用。临床上所见之肢端肥大症即系嗜酸性细胞产生过多的生长激素所致。当生长激素分泌不足时,发育停滞,形成侏儒症。自1945年李卓浩将生长激素与垂体前叶其他激素分离提纯后,才开始研究生长激素的化学。本文仅就十多年来的研究结果作一简要的介绍。目前生长激素的分离多采用牛脑垂体,故用牛生长激素做研究材料。     

牛和猪的生长激素在细菌中高效率表达

用垂体的Poly(A)mRNA制备的cDNA含有牛和猪生长激素(bGH,pGH)编码序列,并在细菌中克隆。由各自cDNA的核苷酸序列而得知的肽激素的一级结构大约有90％的同源性。为了组建能在细菌中高效产生成熟的动物生长激素的表达质粒,利用合成DNA的方法来修饰克隆的cDNA。     

Rifkin掀起了有关牛生长激素的激烈争论

经过几年的销声匿迹和制止生物技术商品化的失败,美国的Jeremy Rifkin和他的经济趋势基金会今天重新掀起了一场争论。这次他企图阻碍牛生长激素(bGH)的商品化。他极力煽动消费者抵制经bGH处理过的牛所产的奶。八月初,该基金会援引伊利诺伊大学医学中心Samuel Epstein的一篇文章,写信给美国12个最大的超级市场链锁店。文章声称,有些研究者发现bGH可从牛奶中被吸入血液,并引起激素效应和过敏反应,在婴孩中尤其如此。文章还声称,经bGH处理的奶牛     

FDA支持应用bGH提高奶产量

美国食品药物管理局(FDA)发表了有关一种新产品的科学数据综合评述,而这一产品的应用至今尚未被批准,这种事情还是头一次发生.这篇综述支持该机构的如下论点,即:牛生长激素(bGH)在人的消费过程中是安全的.该综述引述了120项有关bGH安全性的研究数据,包括16项未发表的、由生产该产品的单位自己进行的研究.批评家们     

慢病毒介导的牛生长素基因对小鼠胚胎发育的研究

生长素是促进动物生长发育所必需的激素之一。本研究探索牛生长激素(bovine growth hormone,bGH)对小鼠胚胎发育的影响。将牛生长激素基因连接到慢病毒载体(Lenti-CMV-EF1-eGFP)形成Lenti-CMV-bGH/EF1-eGFP,重组病毒经293T细胞包装后直接感染小鼠胚胎和G1胚胎干细胞(embryonicstemcells,ESCs)。阳性表达的胚胎经体外培养,发育到囊胚期的胚胎进行胚胎移植,为直接感染组。感染的小鼠G1胚胎干细胞注射到正常昆明白小鼠囊胚制作嵌合胚胎后进行胚胎移植,为嵌合体组。分别解剖3只妊娠15d的直接感染组和嵌合组的小鼠,观察受体小鼠妊娠情况。结果发现,在1-细胞期感染胚胎,感染效率可达(74.7±6.7)%,在2-细胞期连续感染,感染效率为(79.4±5.7)%,两组感染方法的效率没有显著差异(P>0.05)。1次和2次感染胚胎发育和正常胚胎之间没有显著差异((87.6±3.5)%,(85.4±6.3)%VS(83.0±5.5)%,P>0.05)。所有移植的胚胎没有发育到足月,解剖妊娠15d的小鼠,发现直接感染组没有妊娠,嵌合组胎盘发育正常,但胚胎部分已经死亡和被吸收。因此,本研究证明bGH对小鼠附着前胚胎发育没有影响,但影响小鼠胚胎附着后的发育。这为后期bGH的研究提供参考。     

草鱼生长激素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用经草鱼生长激素(gcGH)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/O-Ag14)融合,经3次克隆化培养和ELISA筛选,得到7株阳性杂交瘤细胞株,其中2株为强阳性。交叉试验表明,这些杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体(McAb)同大鳞大马哈鱼生长激素(sGH)、大鳞大马哈鱼促性腺激素(sGTH)及牛生长激素(bGH)均不起反应。小鼠腹水McAbs滴度高达1:1280000。受体-gcGH-McAb夹心试验表明,McAb确与有活性的gcGH有特异反应。用间接ELISA方法可检测到浓度为0.125#g/ml的gcGH。     

家畜的遗传工程

人们希望家畜的遗传工程能在农业生产方面产生较大的影响。但如果不经过多代的研究,不可能准确地估价转基因表达的结果。本文以两种转基因猪系为对象,系统地研究了因转基因而使其血液中生长激素(bGH)水平长期升高所产生的有利和不利的结果。连续两代表达bGH基因的猪在每日增重及食物利用率方面都有明显改进,而且身体组成也有变化,如皮下脂肪有明显减少。     

双抗体免疫沉淀法纯化牛生长激素poly(A)~+RNA的研究

我们用双抗体免疫沉淀法,从牛垂体多聚核糖体中分离出牛生长激素特异多聚核糖体,由此多聚核糖体纯化的牛生长激素Poly(A)~+RNA,可以在麦胚体外翻译系统中和兔网织红细胞体外翻译系统中促进~(14)C-亮氨酸的参入。合成的含~(14)-亮氨酸的翻译产物中有91％可以被牛生长激素抗体沉淀。用SDS-11％PAGE对翻译产物进行鉴定表明,翻译产物在25KD处呈一条放射自显影带,与报导的牛生长激素前体分子量相吻合。     

小鼠能变成大动物吗?

俄亥俄大学(Athens,OH)的John Kopchick和Wen Chen试图改进牛生长激素(bGH).他们将激素分子折叠,并插入小鼠体内,然而,他们却获得了意外的发现.他们所得到的与所期望的正相反,不是巨大鼠而是更小型的鼠,此鼠只有正常鼠一半大,其它特征不变.该方法适用于所有动物(包括人),是一项重大进展,为控制生长过程带来了